简介：摘要目的探讨猪脱细胞真皮基质(pADM)在体外培养中对毛囊角质形成细胞增殖的影响及其机制。方法体外实验培养毛囊角质形成细胞，按照干预措施不同分为6组，A组为单纯毛囊角质形成细胞组；B组为毛囊角质形成细胞+pADM组(20 mg/L)；C组为毛囊角质形成细胞+肿瘤坏死因子-α(TNF-α)组(10 μg/L)；D组为毛囊角质形成细胞+TNF-α抑制剂组(Lenalidomide)；E组为毛囊角质形成细胞+TNF-α(10 μg/L)+pADM组(20 mg/L)；F组为毛囊角质形成细胞+TNF-α抑制剂+pADM组(20 mg/L)。用实时荧光定量聚合酶链反应(RT-PCR)法分别测定各组的淋巴增强因子1(LEF-1) mRNA及细胞核增殖抗原(Ki-67) mRNA的表达。免疫荧光标记法检测B、E、F组的毛囊角质形成细胞，观察pADM对毛囊角质形成细胞增殖的影响。两组间比较采用独立样本t检验。结果A组(LEF-1，1.093±0.121，Ki-67，1.100±0.089)毛囊角质形成细胞中LEF-1 mRNA及Ki-67 mRNA的表达低于B组(LEF-1，2.973±0.234，Ki-67，2.577±0.067)和D组(LEF-1，1.867±0.045，Ki-67，1.967±0.136)，但高于C组(LEF-1，0.450±0.090，Ki-67，0.490±0.026)。A组与B组、A组与C组、A组与D组之间的差异均有统计学意义(A比B，tLEF-1＝14.280，P<0.05；tKi-67＝15.390，P<0.05；A比C，tLEF-1＝4.887，P<0.05；tKi-67＝ 6.356，P<0.05；A比D，tLEF-1＝5.875，P<0.05；tKi-67＝9.030，P<0.05)；B组(LEF-1，2.973±0.234，Ki-67，2.577±0.067)毛囊角质形成细胞中LEF-1 mRNA及Ki-67 mRNA的表达高于E组(LEF-1，1.793±0.078，Ki-67，1.940±0.165)，而低于F组(LEF-1，4.257±0.266，Ki-67，3.193±0.155)，B组与E组，B组与F组的差异均有统计学意义(B比E，tLEF-1＝8.964，P<0.05；tKi-67＝6.634，P<0.05；B比F，tLEF-1＝9.749，P<0.05；tKi-67＝-6.425，P<0.05)；免疫荧光结果显示，B组毛囊角质形成细胞数量高于E组而低于F组。结论在体外培养中，pADM可能通过下调TNF-α促进LEF-1和Ki-67的表达，从而促进毛囊角质形成细胞的增殖。

简介：摘要目的观察溶瘤腺病毒差异显示编码3(DD3)-ZD55-精子相关抗原9(SPAG9)在体外对激素依赖性前列腺癌LNCaP细胞的治疗效果，并探讨作用机制。方法将LNCaP细胞分为4组进行干预，分别为磷酸盐缓液组(PBS)、病毒对照组[ZD55-增强型绿色荧光蛋白(EGFP)，10 MOI]、病毒治疗组(ZD55-SPAG9，10 MOI)、DD3启动子调控组(DD3-ZD55-SPAG9，10 MOI)。细胞计数试剂盒(CCK-8)检测细胞存活率；Transwell检测细胞迁移和侵袭能；蛋白质印迹法(Western blot)检测SPAG9、E-钙黏蛋白(E-cadherin)、波形蛋白(Vimentin)与基质金属蛋白酶-2(MMP-2)和腺病毒早期区1A基因(E1A)的表达。多组之间采用方差分析，进一步组间比较采用SNK法。结果CCK-8结果，DD3-ZD55-SPAG9组、ZD55-SPAG9组和ZD55-EGFP组LNCaP细胞存活率均显著低于PBS组[(73.80 1.43)%、(73.66 2.19)%、(81.79 2.59)%比100%，F＝1038.210，P<0.01]，ZD55-SPAG9组与DD3-ZD55-SPAG9组细胞存活率降低更为显著，但两者之间存活率差异无统计学意义(P>0.05)。Transwell迁移结果，DD3-ZD55-SPAG9组、ZD55-SPAG9组和ZD55-EGFP组小室底膜细胞数明显低于PBS组[(52.57±5.57)、(48.67±4.04)、(69.67±6.02)比(109.06±9.54)，F＝384.466，P<0.05]，ZD55-SPAG9组与DD3-ZD55-SPAG9组细胞迁移能力降低更为显著，且两者之间差异无统计学意义(P>0.05)。侵袭实验结果，DD3-ZD55-SPAG9组、ZD55-SPAG9组和ZD55-EGFP组穿透Matrigel胶，进入小室下层的细胞数目明显少于PBS组[(58.33±3.79)、(55.36±7.51)、(78.06±4.36)比(115.67±11.59)，F＝305.885，P<0.01]，提示细胞侵袭能力显著降低，ZD55-SPAG9组与DD3-ZD55-SPAG9组细胞侵袭能力降低更为显著。Western blot结果显示，与PBS组比较，DD3-ZD55-SPAG9组、ZD55-SPAG9组和ZD55-EGFP组内SPAG9蛋白表达下调[(0.32±0.07)、(0.47±0.09)、(0.66±0.05)比1，F＝594.522，P<0.01]，E-cadherin表达上调[(4.80±0.34)、(3.80±0.35)、(2.81±0.52)比1，F＝482.275，P<0.01]，Vimentin表达下调[(0.33±0.04)、(0.46±0.06)、(0.53±0.05)比1，F＝903.749，P<0.01]，MMP-2表达下调[(0.30±0.03)、(0.44±0.05)、(0.60±0.05)比1，F＝1 540.940，P<0.01]，上述变化在ZD55-SPAG9组与DD3-ZD55-SPAG9组内更为显著。WPMY-1细胞内E1A在DD3-ZD55-SPAG9组内的表达明显低于ZD55-SPAG9和ZD55-EGFP组。结论溶瘤腺病毒DD3-ZD55-SPAG9在体外可以有效降低LNCaP细胞的存活率，并抑制迁移和侵袭，并对正常细胞具有更高的安全性。

简介：无

简介：摘要目的评估卡巴他赛治疗转移性去势抵抗性前列腺癌(mCRPC)患者中前列腺特异性抗原(PSA)闪烁的发生率和特征及其对生存时间的影响。方法对2007年1月至2012年5月期间进行卡巴他赛二线化疗治疗的125例mCRPC患者的临床资料进行回顾性研究。收集卡巴他赛治疗前和治疗期间患者的基线特征、疾病史和PSA水平。患者的总生存期(OS)和放射/临床无进展生存期(PFS)通过Kaplan-Meier方法估计的不同PSA定义，并使用对数秩检验进行比较。结果共125例患者纳入研究，中位PFS和OS分别为6.5和13.3个月。根据所使用的不同定义，PSA闪烁的发生率、相对振幅和PSA峰值时间以及随后的总生存期(PFS和OS)都存在差异，闪烁发生率为8.3%～30.6%，闪烁持续时间为0.6～2.6个月。闪烁后较基线值降低50%患者的中位OS和PFS与PSA即时反应患者比较，差异无统计学意义(P＝0.96、0.46)，但优于非应答者(P＝0.006、0.003)，与基线相比30%下降的闪烁患者的生存结果相似。结论对于卡巴他赛所诱发的PSA即时反应，无论初始是否有闪烁发生，对于治疗所带来的生存率的提高都没有明显的影响。在评估PSA即时反应效果时，可以忽略在治疗前12周期间紫杉醇所诱导引起的PSA闪烁。

简介：摘要目的比较人源化CD19嵌合抗原受体(CAR)-T细胞与鼠源CD19 CAR-T细胞的功能。方法收集8名健康志愿者的外周静脉血T细胞，行人源化和鼠源CD19 CAR慢病毒感染，制备人源化和鼠源CD19 CAR-T细胞，采用细胞计数8法检测细胞增殖情况。以急性淋巴细胞白血病Nalm-6细胞作为靶细胞，采用乳酸盐脱氢酶法检测对照CD3+ T细胞、人源化及鼠源CD19 CAR-T细胞的细胞杀伤活性。将30只Nalm-6细胞荷瘤裸鼠采用随机区组法随机分为3组，每组10只，分别经尾静脉注射人源化CAR-T细胞、鼠源CAR-T细胞和对照CD3+ T细胞悬液。采用流式细胞术检测内眦静脉血Nalm-6细胞占外周血细胞比例和CD19 CAR-T细胞占T细胞比例。观察裸鼠的生存时间。结果体外培养24 h，鼠源和人源化CAR-T细胞的增殖率分别为(68.50±0.93)%和(80.63±1.41)%，差异有统计学意义(t＝20.353, P<0.001)；共培养48 h时，分别为(91.38±1.41)%和(148.13±1.25)%，差异亦有统计学意义(t＝85.364, P<0.001)。效靶比为1∶1时，共培养24 h，人源化CD19 CAR-T细胞组与鼠源CD19 CAR-T细胞组对Nalm-6细胞的杀伤活性差异无统计学意义(P＝0.169)；共培养48 h，人源化CD19 CAR-T细胞组对Nalm-6细胞的杀伤活性高于鼠源CD19 CAR-T细胞组(P<0.01)。效靶比为4∶1时，共培养24和48 h，人源化CD19 CAR-T细胞组对Nalm-6细胞的杀伤活性均高于鼠源CD19 CAR-T细胞组(均P<0.01)。CAR-T细胞治疗第7天，人源化CD19 CAR-T细胞组、鼠源CAR-T细胞组裸鼠外周血中Nalm-6细胞比例下降至最低；21 d后，鼠源CAR-T细胞组裸鼠体内Nalm-6细胞比例高于人源化CAR-T细胞组(P21 d＝0.001, P28 d<0.001, P35 d<0.001)。人源化CD19 CAR-T细胞组和鼠源CAR-T细胞组裸鼠外周血中CAR-T细胞比例均于CAR-T细胞治疗第7天达到峰值，人源化CD19 CAR-T细胞组高于鼠源CAR-T细胞组(P7 d＝0.002)。鼠源CAR-T细胞组裸鼠外周血中CAR-T细胞于第14天消失，人源化CAR-T细胞组裸鼠外周血中CAR-T细胞至第21天消失。鼠源CAR-T细胞组和人源化CD19 CAR-T细胞组裸鼠的中位生存时间分别为42和63 d，差异有统计学意义(χ2＝15.382，P<0.001)。结论人源化CD19 CAR-T细胞比鼠源CD19 CAR-T细胞增殖能力强、对急性淋巴细胞白血病细胞的杀伤活性高、体内存留时间长，用于急性淋巴细胞白血病的临床疗效可能会优于鼠源CD19 CAR-T细胞。

简介：摘要目的探讨血清涎液化糖链抗原-6（KL-6）水平与RA伴间质性肺疾病（RA-ILD）患者免疫功能的相关性，为临床诊疗提供理论依据。方法收集资料完整的RA炎患者86例，根据是否合并ILD分为非RA-ILD组和RA-ILD组，检测所有研究对象血清KL-6水平和免疫功能（CD3+、CD4+、CD8+计数和CD4+/CD8+比值），分析血清KL-6水平与免疫功能的相关性。相关性分析采用Pearson或Spearman相关性分析。结果研究共纳入非RA-ILD患者54例，RA-ILD患者32例。RA-ILD患者以男性为主，CRP、ESR和RF水平显著升高，差异有统计学意义（t值分别为6.382、7.243、7.748，P<0.05）。RA-ILD组KL-6水平[（835±72）U/ml]显著高于非RA-ILD组[（434±45）U/ml]，差异有统计学意义（t=31.670，P<0.05）；同时，RA-ILD患者的CD8+淋巴细胞计数显著降低，CD4+/CD8+比值显著升高，差异有统计学意义（t值分别为3.456、4.993，P<0.05）。相关性分析结果显示，血清KL-6水平与抑制性T细胞（CD8+）呈负相关（r=-3.563，P=0.031），与CD4+/CD8+比值呈正相关（r=4.879，P=0.011）。结论血清KL-6水平与RA-ILD患者的免疫功能异常密切相关。血清KL-6水平可作为评估RA-ILD患者免疫状态的重要指标。

简介：摘要目的评估糖皮质激素对CD19嵌合抗原受体T细胞（CAR-T细胞）靶向杀瘤过程中增殖的影响。方法健康志愿者的外周血单个核细胞（PBMC）作为T细胞来源，经CD3磁珠分选及CD19 CAR慢病毒转染制备CD19 CAR-T细胞；采用流式细胞术（FCM）测定CD19 CAR-T细胞转染率及其在培养体系中所占比例；采用CFDA SE细胞增殖示踪荧光探针试剂标记CD19 CAR-T细胞后测定其荧光强度；LDH细胞毒性检测方法检测不同浓度的糖皮质激素对B细胞肿瘤细胞株杀伤活性的影响。结果①CD19 CAR-T细胞CD19 CAR转染率为（51.34±5.28）%。②24 h后不同剂量甲泼尼龙对Nalm6、Pfeiffer及U2932细胞的杀伤活性高于地塞米松，48 h后低浓度（4 mg/ml）甲泼尼龙对Nalm6、Pfeiffer、U2932细胞杀伤活性高于低浓度（0.75 mg/ml）地塞米松，而高浓度（12 mg/ml）甲泼尼龙杀伤活性低于高浓度（2.25 mg/ml）地塞米松。但各个时间不同剂量甲泼尼龙组对EHEB细胞的杀伤活性均低于对应时间、剂量的地塞米松。③CD19 CAR-T细胞在不同浓度糖皮质激素作用下的比例及平均荧光强度比较，地塞米松对CD-19 CAR-T细胞的增殖抑制作用强于甲泼尼龙，两种糖皮质激素的高浓度组较低浓度组对CD19 CAR-T细胞的增殖抑制作用更明显。④CD19 CAR-T细胞与不同肿瘤细胞共培养体系中，其比例及平均荧光强度比较，地塞米松对CD19 CAR-T细胞的增殖抑制作用强于甲泼尼龙，两种糖皮质激素的高浓度组较低浓度组对CD19 CAR-T细胞的增殖抑制更明显。结论CD19 CAR-T细胞靶向不同肿瘤细胞株过程中地塞米松对CD19 CAR-T细胞的扩增和增殖抑制作用大于甲泼尼龙，高剂量组该抑制作用更加明显。

简介：摘要目的比较人源化CD19嵌合抗原受体(CAR)-T细胞与鼠源CD19 CAR-T细胞的功能。方法收集8名健康志愿者的外周静脉血T细胞，行人源化和鼠源CD19 CAR慢病毒感染，制备人源化和鼠源CD19 CAR-T细胞，采用细胞计数8法检测细胞增殖情况。以急性淋巴细胞白血病Nalm-6细胞作为靶细胞，采用乳酸盐脱氢酶法检测对照CD3+ T细胞、人源化及鼠源CD19 CAR-T细胞的细胞杀伤活性。将30只Nalm-6细胞荷瘤裸鼠采用随机区组法随机分为3组，每组10只，分别经尾静脉注射人源化CAR-T细胞、鼠源CAR-T细胞和对照CD3+ T细胞悬液。采用流式细胞术检测内眦静脉血Nalm-6细胞占外周血细胞比例和CD19 CAR-T细胞占T细胞比例。观察裸鼠的生存时间。结果体外培养24 h，鼠源和人源化CAR-T细胞的增殖率分别为(68.50±0.93)%和(80.63±1.41)%，差异有统计学意义(t＝20.353, P<0.001)；共培养48 h时，分别为(91.38±1.41)%和(148.13±1.25)%，差异亦有统计学意义(t＝85.364, P<0.001)。效靶比为1∶1时，共培养24 h，人源化CD19 CAR-T细胞组与鼠源CD19 CAR-T细胞组对Nalm-6细胞的杀伤活性差异无统计学意义(P＝0.169)；共培养48 h，人源化CD19 CAR-T细胞组对Nalm-6细胞的杀伤活性高于鼠源CD19 CAR-T细胞组(P<0.01)。效靶比为4∶1时，共培养24和48 h，人源化CD19 CAR-T细胞组对Nalm-6细胞的杀伤活性均高于鼠源CD19 CAR-T细胞组(均P<0.01)。CAR-T细胞治疗第7天，人源化CD19 CAR-T细胞组、鼠源CAR-T细胞组裸鼠外周血中Nalm-6细胞比例下降至最低；21 d后，鼠源CAR-T细胞组裸鼠体内Nalm-6细胞比例高于人源化CAR-T细胞组(P21 d＝0.001, P28 d<0.001, P35 d<0.001)。人源化CD19 CAR-T细胞组和鼠源CAR-T细胞组裸鼠外周血中CAR-T细胞比例均于CAR-T细胞治疗第7天达到峰值，人源化CD19 CAR-T细胞组高于鼠源CAR-T细胞组(P7 d＝0.002)。鼠源CAR-T细胞组裸鼠外周血中CAR-T细胞于第14天消失，人源化CAR-T细胞组裸鼠外周血中CAR-T细胞至第21天消失。鼠源CAR-T细胞组和人源化CD19 CAR-T细胞组裸鼠的中位生存时间分别为42和63 d，差异有统计学意义(χ2＝15.382，P<0.001)。结论人源化CD19 CAR-T细胞比鼠源CD19 CAR-T细胞增殖能力强、对急性淋巴细胞白血病细胞的杀伤活性高、体内存留时间长，用于急性淋巴细胞白血病的临床疗效可能会优于鼠源CD19 CAR-T细胞。

简介：摘要目的评估糖皮质激素对CD19嵌合抗原受体T细胞（CAR-T细胞）靶向杀瘤过程中增殖的影响。方法健康志愿者的外周血单个核细胞（PBMC）作为T细胞来源，经CD3磁珠分选及CD19 CAR慢病毒转染制备CD19 CAR-T细胞；采用流式细胞术（FCM）测定CD19 CAR-T细胞转染率及其在培养体系中所占比例；采用CFDA SE细胞增殖示踪荧光探针试剂标记CD19 CAR-T细胞后测定其荧光强度；LDH细胞毒性检测方法检测不同浓度的糖皮质激素对B细胞肿瘤细胞株杀伤活性的影响。结果①CD19 CAR-T细胞CD19 CAR转染率为（51.34±5.28）%。②24 h后不同剂量甲泼尼龙对Nalm6、Pfeiffer及U2932细胞的杀伤活性高于地塞米松，48 h后低浓度（4 mg/ml）甲泼尼龙对Nalm6、Pfeiffer、U2932细胞杀伤活性高于低浓度（0.75 mg/ml）地塞米松，而高浓度（12 mg/ml）甲泼尼龙杀伤活性低于高浓度（2.25 mg/ml）地塞米松。但各个时间不同剂量甲泼尼龙组对EHEB细胞的杀伤活性均低于对应时间、剂量的地塞米松。③CD19 CAR-T细胞在不同浓度糖皮质激素作用下的比例及平均荧光强度比较，地塞米松对CD-19 CAR-T细胞的增殖抑制作用强于甲泼尼龙，两种糖皮质激素的高浓度组较低浓度组对CD19 CAR-T细胞的增殖抑制作用更明显。④CD19 CAR-T细胞与不同肿瘤细胞共培养体系中，其比例及平均荧光强度比较，地塞米松对CD19 CAR-T细胞的增殖抑制作用强于甲泼尼龙，两种糖皮质激素的高浓度组较低浓度组对CD19 CAR-T细胞的增殖抑制更明显。结论CD19 CAR-T细胞靶向不同肿瘤细胞株过程中地塞米松对CD19 CAR-T细胞的扩增和增殖抑制作用大于甲泼尼龙，高剂量组该抑制作用更加明显。

简介：【摘要】目的 探讨前列腺特异性抗原(PSA)联合肿瘤标志物在前列腺癌患者中的筛查效果及与病理的符合率。方法 选取2019年1月-2020年6月我院收治的前列腺癌患者66例作为前列腺癌组，同时选择良性前列腺增生患者66例作为良性前列腺增生组，另外选择同期健康体检人群66例作为健康组。比较三组人群PSA、血清指标水平、不同血清标志物在前列腺癌患者中的阳性表达情况、不同血清标志物在前列腺癌患者中的诊断符合率、特异度、敏感度。结果 前列腺癌组、良性前列腺增生组PSA、C1P2A、LEDGF、AMACR、SSX-2、CEA、CYFRA21-1、NSE比健康组大（P＜0.05）；血清标志物联合阳性表达情况比单纯一种标志物高（P＜0.05）；血清标志物联合诊断符合率、特异度、敏感度比单纯一种标志物高（P＜0.05）。结论 前列腺癌诊断中，PSA联合肿瘤标志物诊断的价值较高，符合率、特异度、敏感度更高，可以将其作为诊断与筛查前列腺癌的首要因子。

简介：摘要目的分析在第二代嵌合抗原受体(CAR)的基础上设计的同时分泌白细胞介素7(IL7)和趋化因子19(CCL19)的第四代嵌合抗原受体T细胞(CAR-T)，在多发性骨髓瘤微环境中增殖、趋化、清除肿瘤细胞和持久性等方面的能力。方法通过2A自剪切肽技术构建第四代CAR载体质粒，采用第三代慢病毒包装系统制备高滴度慢病毒，通过流式细胞术检测慢病毒转导效率和CAR-T细胞亚型的变化；采用酶联免疫吸附实验(ELISA)检测CAR-T细胞中IL7和CCL19的分泌情况；手工计数法分析CAR-T细胞在培养过程中的增殖活性；Transwell迁移实验验证CAR-T细胞趋化能力；荧光素酶生物发光法检测CAR-T细胞特异性杀伤活性；小鼠异体移植模型验证CAR-T细胞体内抗骨髓瘤活性和安全性。结果流式细胞术结果显示，抗CS1 CAR-T和抗CS1-IL7-CCL19 CAR-T细胞CAR的表达率分别为(91.50±0.29)%和(46.70±0.12)%，表明CAR-T细胞构建成功。亚型分析显示，抗CS1-IL7-CCL19 CAR-T细胞中T记忆干细胞(TSCM)的比例为(67.58±0.59)%，高于抗CS1 CAR-T[(50.74±1.01)%，P＝0.000 1]，具有更强的免疫记忆功能，持久性更佳。抗CS1-IL7-CCL19 CAR-T细胞较对照组(MOCK-T)和抗CS1 CAR-T组能够持续分泌IL7和CCL19(P<0.000 1)。抗CS1-IL7-CCL19 CAR-T细胞在慢病毒转导后的第9天细胞数达到(22.77±0.79)×106个，高于抗CS1 CAR-T细胞[(9.40±0.79)×106个，P＝0.000 1]，具有更强的增殖能力。Transwell迁移实验中，抗CS1-IL7-CCL19 CAR-T细胞对于反应T细胞的趋化细胞数为(109.00±4.04)个/视野，高于对照组和抗CS1 CAR-T组[分别为(9.33±1.20)个/视野和(7.33±0.88)个/视野，均P<0.000 1]，具有更强的趋化能力。杀伤实验结果显示，与对照组细胞比较，抗CS1-IL7-CCL19 CAR-T和抗CS1 CAR-T均具有特异性的杀伤效能(P<0.000 1)。动物实验表明，抗CS1-IL7-CCL19 CAR-T细胞降低了荷瘤小鼠的肿瘤负担(P<0.000 1)，并延长了总生存时间(P＝0.006 1)。结论第四代抗CS1-IL7-CCL19 CAR-T细胞在不影响体内外抗骨髓瘤活性的情况下，有着更强的增殖活性、趋化能力和持久性，为克服传统CAR-T细胞存活率低下、持久性差以及受肿瘤微环境抑制等缺陷提供了策略，为第四代CAR-T细胞的临床应用提供了前期实验依据。

简介：摘要目的分析在第二代嵌合抗原受体(CAR)的基础上设计的同时分泌白细胞介素7(IL7)和趋化因子19(CCL19)的第四代嵌合抗原受体T细胞(CAR-T)，在多发性骨髓瘤微环境中增殖、趋化、清除肿瘤细胞和持久性等方面的能力。方法通过2A自剪切肽技术构建第四代CAR载体质粒，采用第三代慢病毒包装系统制备高滴度慢病毒，通过流式细胞术检测慢病毒转导效率和CAR-T细胞亚型的变化；采用酶联免疫吸附实验(ELISA)检测CAR-T细胞中IL7和CCL19的分泌情况；手工计数法分析CAR-T细胞在培养过程中的增殖活性；Transwell迁移实验验证CAR-T细胞趋化能力；荧光素酶生物发光法检测CAR-T细胞特异性杀伤活性；小鼠异体移植模型验证CAR-T细胞体内抗骨髓瘤活性和安全性。结果流式细胞术结果显示，抗CS1 CAR-T和抗CS1-IL7-CCL19 CAR-T细胞CAR的表达率分别为(91.50±0.29)%和(46.70±0.12)%，表明CAR-T细胞构建成功。亚型分析显示，抗CS1-IL7-CCL19 CAR-T细胞中T记忆干细胞(TSCM)的比例为(67.58±0.59)%，高于抗CS1 CAR-T[(50.74±1.01)%，P＝0.000 1]，具有更强的免疫记忆功能，持久性更佳。抗CS1-IL7-CCL19 CAR-T细胞较对照组(MOCK-T)和抗CS1 CAR-T组能够持续分泌IL7和CCL19(P<0.000 1)。抗CS1-IL7-CCL19 CAR-T细胞在慢病毒转导后的第9天细胞数达到(22.77±0.79)×106个，高于抗CS1 CAR-T细胞[(9.40±0.79)×106个，P＝0.000 1]，具有更强的增殖能力。Transwell迁移实验中，抗CS1-IL7-CCL19 CAR-T细胞对于反应T细胞的趋化细胞数为(109.00±4.04)个/视野，高于对照组和抗CS1 CAR-T组[分别为(9.33±1.20)个/视野和(7.33±0.88)个/视野，均P<0.000 1]，具有更强的趋化能力。杀伤实验结果显示，与对照组细胞比较，抗CS1-IL7-CCL19 CAR-T和抗CS1 CAR-T均具有特异性的杀伤效能(P<0.000 1)。动物实验表明，抗CS1-IL7-CCL19 CAR-T细胞降低了荷瘤小鼠的肿瘤负担(P<0.000 1)，并延长了总生存时间(P＝0.006 1)。结论第四代抗CS1-IL7-CCL19 CAR-T细胞在不影响体内外抗骨髓瘤活性的情况下，有着更强的增殖活性、趋化能力和持久性，为克服传统CAR-T细胞存活率低下、持久性差以及受肿瘤微环境抑制等缺陷提供了策略，为第四代CAR-T细胞的临床应用提供了前期实验依据。

简介：摘要1型糖尿病合并自身免疫性甲状腺疾病是自身免疫多内分泌腺病综合征(APS)Ⅲ型最常见的类型，但重症肌无力合并APS Ⅲ型罕见报道。本研究对1例先后出现眼肌型重症肌无力、1型糖尿病、桥本甲状腺炎的APS Ⅲ型合并重症肌无力的男性患者进行了人类白细胞抗原(HLA)基因分析及文献回顾11例APSⅢ合并重症肌无力，发现HLA-DR9/DQ9可能为重症肌无力合并APS Ⅲ型的一种特殊HLA亚型。

简介：摘要目的探讨血浆可溶性白细胞分化抗原14亚型(soluble leukocyte differentiation antigen 14 subtype，又称Presepsin)联合中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白(neutrophil gelatinase associated lipocalin，NGAL)对儿童脓毒症早期诊断和预后预测的价值。方法选取2017年6月至2020年10月我院收治的94例脓毒症患儿，41例发生休克为脓毒性休克组，53例未发生休克为脓毒症组。选择同期本院体检健康儿童41例为对照组。检测3组血浆Presepsin、NGAL、降钙素原(procalcitonin，PCT)和C-反应蛋白(C-reactive protein，CRP)水平。记录脓毒症患儿小儿危重病例评分、序贯器官衰竭(sequential organ failure，SOFA)评分。根据患儿入院28 d病死率分为存活组75例，死亡组19例。比较存活组和死亡组血浆Presepsin、NGAL、PCT和CRP水平及小儿危重病例评分、SOFA评分。采用Pearson检验和受试者工作特征曲线分析血浆Presepsin、NGAL与小儿危重病例评分、SOFA评分的相关性以及对儿童脓毒症早期诊断、预后预测的价值。结果脓毒症组和脓毒性休克组血浆Presepsin、NGAL、PCT和CRP水平均高于对照组，且脓毒性休克组均高于脓毒症组(P<0.05)；死亡组血浆Presepsin、NGAL、PCT、CRP水平和SOFA评分均高于存活组，小儿危重病例评分低于存活组(P<0.05)。血浆Presepsin、NGAL与小儿危重病例评分均呈负相关(r＝-0.676，P<0.001；r＝-0.664，P<0.001)，与SOFA评分均呈正相关(r＝0.781，P<0.001；r＝0.749，P<0.001)。当血浆Presepsin水平为468.91 ng/L时，诊断脓毒症的敏感度为85.6%，特异度为77.5%。当血浆NGAL水平为38.94 ng/mL时，诊断脓毒症的敏感度为82.4%，特异度为65.8%。血浆Presepsin联合NGAL早期诊断儿童脓毒症的曲线下面积(area under curve，AUC)为0.912(95%CI 0.865～0.959)，高于血浆Presepsin的AUC 0.857(95%CI 0.785～0.928)和NGAL的AUC 0.761(95%CI 0.680～0.841)。当血浆Presepsin水平为816.92 ng/L时，预测脓毒症预后的敏感度为73.2%，特异度为76.1%。当血浆NGAL水平为51.27 ng/mL时，预测脓毒症预后的敏感度为67.4%，特异度为68.0%。血浆Presepsin联合NGAL预测儿童脓毒症预后的AUC为0.891(95%CI 0.816～0.966)，高于血浆Presepsin的AUC 0.795(95%CI 0.698～0.892)和NGAL的AUC 0.714(95%CI 0.577～0.851)。结论临床通过检测血浆Presepsin和NGAL水平有助于早期诊断儿童脓毒症和判断病情严重程度，对评价患儿预后有指导意义，有利于改善患儿预后。

简介：摘要目的探讨血浆可溶性白细胞分化抗原14亚型(soluble leukocyte differentiation antigen 14 subtype，又称Presepsin)联合中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白(neutrophil gelatinase associated lipocalin，NGAL)对儿童脓毒症早期诊断和预后预测的价值。方法选取2017年6月至2020年10月我院收治的94例脓毒症患儿，41例发生休克为脓毒性休克组，53例未发生休克为脓毒症组。选择同期本院体检健康儿童41例为对照组。检测3组血浆Presepsin、NGAL、降钙素原(procalcitonin，PCT)和C-反应蛋白(C-reactive protein，CRP)水平。记录脓毒症患儿小儿危重病例评分、序贯器官衰竭(sequential organ failure，SOFA)评分。根据患儿入院28 d病死率分为存活组75例，死亡组19例。比较存活组和死亡组血浆Presepsin、NGAL、PCT和CRP水平及小儿危重病例评分、SOFA评分。采用Pearson检验和受试者工作特征曲线分析血浆Presepsin、NGAL与小儿危重病例评分、SOFA评分的相关性以及对儿童脓毒症早期诊断、预后预测的价值。结果脓毒症组和脓毒性休克组血浆Presepsin、NGAL、PCT和CRP水平均高于对照组，且脓毒性休克组均高于脓毒症组(P<0.05)；死亡组血浆Presepsin、NGAL、PCT、CRP水平和SOFA评分均高于存活组，小儿危重病例评分低于存活组(P<0.05)。血浆Presepsin、NGAL与小儿危重病例评分均呈负相关(r＝-0.676，P<0.001；r＝-0.664，P<0.001)，与SOFA评分均呈正相关(r＝0.781，P<0.001；r＝0.749，P<0.001)。当血浆Presepsin水平为468.91 ng/L时，诊断脓毒症的敏感度为85.6%，特异度为77.5%。当血浆NGAL水平为38.94 ng/mL时，诊断脓毒症的敏感度为82.4%，特异度为65.8%。血浆Presepsin联合NGAL早期诊断儿童脓毒症的曲线下面积(area under curve，AUC)为0.912(95%CI 0.865～0.959)，高于血浆Presepsin的AUC 0.857(95%CI 0.785～0.928)和NGAL的AUC 0.761(95%CI 0.680～0.841)。当血浆Presepsin水平为816.92 ng/L时，预测脓毒症预后的敏感度为73.2%，特异度为76.1%。当血浆NGAL水平为51.27 ng/mL时，预测脓毒症预后的敏感度为67.4%，特异度为68.0%。血浆Presepsin联合NGAL预测儿童脓毒症预后的AUC为0.891(95%CI 0.816～0.966)，高于血浆Presepsin的AUC 0.795(95%CI 0.698～0.892)和NGAL的AUC 0.714(95%CI 0.577～0.851)。结论临床通过检测血浆Presepsin和NGAL水平有助于早期诊断儿童脓毒症和判断病情严重程度，对评价患儿预后有指导意义，有利于改善患儿预后。

简介：摘要目的探索儿童异基因造血干细胞移植（allo-HSCT）后供者HLA型别识别不同巨细胞病毒（CMV）抗原肽亲和力与发生CMV感染的相关性。方法回顾性分析武汉儿童医院血液肿瘤科146例allo-HSCT患儿移植后6个月内发生CMV再激活、CMV感染、CMV组织器官病的数据，分析其与供者HLA型别识别CMV抗原肽差异的相关性。结果纳入研究的146例移植后患儿中HLA型别与PP65单独高亲和力82例（56.16%），移植后发生CMV感染34例（41.46%）；IE-1高亲和力型5例，移植后感染0例；无明确亲和力多肽2例，感染0例；PP65+IE-1高亲和力型52例，移植后感染13例（25.00%）；与PP65和PP50共同高亲和力型5例，移植后感染3例；未遇到仅与PP50高亲和力HLA供者。与仅携带PP65高亲和力等位基因组比较，伴有IE-1高亲和力HLA位点供者移植后表现出更低的CMV感染发生率（22.81%对41.46%，P=0.029）。结论CMV PP65和IE-1高亲和力型别HLA类型覆盖约99.8%的供者，选择CMV抗原肽IE-1高亲和力型别HLA供者或可降低儿童血液病患者allo-HSCT后CMV感染风险。

简介：摘要目的探索儿童异基因造血干细胞移植（allo-HSCT）后供者HLA型别识别不同巨细胞病毒（CMV）抗原肽亲和力与发生CMV感染的相关性。方法回顾性分析武汉儿童医院血液肿瘤科146例allo-HSCT患儿移植后6个月内发生CMV再激活、CMV感染、CMV组织器官病的数据，分析其与供者HLA型别识别CMV抗原肽差异的相关性。结果纳入研究的146例移植后患儿中HLA型别与PP65单独高亲和力82例（56.16%），移植后发生CMV感染34例（41.46%）；IE-1高亲和力型5例，移植后感染0例；无明确亲和力多肽2例，感染0例；PP65+IE-1高亲和力型52例，移植后感染13例（25.00%）；与PP65和PP50共同高亲和力型5例，移植后感染3例；未遇到仅与PP50高亲和力HLA供者。与仅携带PP65高亲和力等位基因组比较，伴有IE-1高亲和力HLA位点供者移植后表现出更低的CMV感染发生率（22.81%对41.46%，P=0.029）。结论CMV PP65和IE-1高亲和力型别HLA类型覆盖约99.8%的供者，选择CMV抗原肽IE-1高亲和力型别HLA供者或可降低儿童血液病患者allo-HSCT后CMV感染风险。

简介：摘要目的探讨CD19及CD22嵌合抗原受体T细胞（CAR-T）序贯治疗复发难治纵隔B淋巴母细胞淋巴瘤（B-LBL）的效果。方法报道华中科技大学同济医学院附属同济医院2017年3月收治的1例经CD19及CD22 CAR-T序贯治疗的复发难治纵隔B-LBL患者，分析CD19及CD22 CAR-T序贯治疗后1、3、6、12、18个月原发病缓解相关指标，并复习相关文献。结果该患者经过三线化疗后疾病复发进展，后行CD19及CD22CAR-T序贯治疗。在细胞免疫治疗过程中，患者出现1级细胞因子释放综合征，经积极治疗，病情稳定后出院。患者定期来院复查，动态追踪观察纵隔包块。行CAR-T治疗后患者纵隔包块明显缩小，病情持续缓解达18个月。结论CD19及CD22 CAR-T序贯治疗为复发难治B-LBL提供了新的治疗手段。对于常规化疗效果欠佳的患者，应尽早积极行CAR-T治疗，从而提高缓解率，改善患者的远期预后。

简介：摘要目的探讨奥西替尼对晚期肺腺癌一线酪氨酸激酶抑制剂（TKI）耐药患者的疗效及癌胚抗原（CEA）、血管内皮生长因子（VEGF）表达的影响。方法选择2017年6月至2019年6月金华广福肿瘤医院接诊的晚期一线TKI耐药肺腺癌患者（T790M检测阴性或拒测）72例作为研究对象。按照随机数字表法分为观察组和对照组各36例。对照组采用传统培美曲塞+顺铂（AP）方案治疗，观察组采用甲磺酸奥西替尼靶向治疗。在治疗前和治疗4周后，记录两组患者血清CEA、VEGF水平以及治疗4周后患者治疗效果、不良反应发生情况和治疗6个月、1年、2年后各时间点生存率情况。结果观察组患者有效率、控制率分别为80.6%（29/36）、94.4%（34/36），明显高于对照组的58.3%（21/36）、75.0%（27/36），差异均有统计学意义（χ2=4.193、5.261，均P<0.05）。两组治疗前血清CEA、VEGF水平差异均无统计学意义（均P>0.05），两组治疗后血清CEA、VEGF水平均有明显降低（均P<0.05），观察组血清CEA、VEGF水平分别为（5.36±0.33）U/mL、（121.56±11.57）ng/L，均明显低于对照组的（8.25±0.54）U/mL、（163.68±14.59）ng/L（t=27.399、13.572，均P<0.001）。观察组不良反应发生率为19.4%（7/36），明显低于对照组的44.4%（16/36）（χ2=5.173，P=0.011）。观察组患者6个月、1年、2年总生存率分别为94.29%、77.14%、60.00%，对照组患者6个月、1年、2年总生存率分别为91.43%、54.29%、34.29%，两组6个月生存率差异无统计学意义（χ2=0.352，P=0.251），观察组1年、2年生存率均明显高于对照组（χ2=4.058，P=0.044；χ2=4.644，P=0.031）。结论奥西替尼靶向治疗一线TKI耐药的晚期肺腺癌疗效显著，可有效抑制血清CEA、VEGF表达，延长患者生存期，具有临床应用价值。

简介：摘要探讨微RNA-21（miR-21）与癌胚抗原（CEA）、神经特异性烯醇化酶(NES)及CYFRA21-1对非小细胞肺癌（NSCLC）预后预测的临床价值。NSCLC患者确诊时已经错过最佳手术时间，化疗成为最主要的治疗手段，但患者生存率并未得到明显提升。实验室血清学指标检测具有样本易获得、操作方便、价格低廉、无创伤以及可连续监测等各种优点，可用来进行评估NSCLC患者的预后情况。其中，miR-21与CEA、NSE及CYFRA21-1是临床上常用于预测NSCLC疗效和预后的血清学指标。