摘要
摘要目的评价脊髓线粒体自噬在姜黄素减轻小鼠糖尿病神经病理性痛(DNP)中的作用。方法选择SPF级健康雄性C57BL/6小鼠，2月龄，体重20~25 g，采用腹腔注射链脲佐菌素130 mg/kg方法制备DNP模型。取DNP建模成功的小鼠36只，采用随机数字表法分成3组(n＝12)：DNP组、DNP＋姜黄素组(DPR组)、DNP＋姜黄素＋环孢素A组(DRC组)。另取12只正常C57BL/6小鼠腹腔注射等容量生理盐水，为正常对照组(NC组)。DPR组给予姜黄素200 mg/kg灌胃，1次/d，持续7 d；DRC组每次姜黄素灌胃前，鞘内注射线粒体自噬抑制剂环孢素A 10 mg/kg，1次/d，持续7 d，NC组和DNP组于同时点灌胃等容量生理盐水，1次/d，持续7 d。于灌胃前、灌胃1、3、5、7 d时测定机械缩足反应阈(MWT)。最后1次行为学测试完成后，取L4-6段脊髓组织，采用JC-1法和DCFH-DA法分别联合流式细胞仪检测线粒体膜电位和ROS含量，采用Western blot法检测微管相关轻链蛋白3(LC3)、Beclin1和P62的表达水平，计算LC3-Ⅱ/Ⅰ比值，透射电镜检测线粒体自噬小体，采用免疫荧光双标技术观察LC3-Ⅱ与线粒体外膜转位酶复合体蛋白20(TOM20)共表达情况。结果与NC组比较，DNP组MWT和线粒体膜电位降低，ROS含量和LC3-Ⅱ/Ⅰ比值升高，Beclin1表达上调，P62表达下调(P<0.05)，线粒体自噬小体形成增加，LC3-Ⅱ和TOM20共表达增加。与DNP组比较，DPR组MWT和线粒体膜电位升高，ROS含量降低，LC3-Ⅱ/Ⅰ比值升高，Beclin1表达上调，P62表达下调(P<0.05)，线粒体自噬小体形成增加，LC3-Ⅱ和TOM20共表达增加。与DPR组比较，DRC组MWT和线粒体膜电位降低，ROS含量升高，LC3-Ⅱ/Ⅰ比值降低，Beclin1表达下调，P62表达上调(P<0.05)，线粒体自噬小体形成减少，LC3-Ⅱ和TOM20共表达减少。结论姜黄素减轻小鼠DNP的机制可能与上调脊髓线粒体自噬水平，改善线粒体功能有关。
出版日期
2022年12月13日（中国期刊网平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
