手工微柱凝胶免疲检验法在AB0、RhD血型抗原鉴定中的应用

手工微柱凝胶免疲检验法在AB0、RhD血型抗原鉴定中的应用

康宝利

（旬阳县医院陕西安康725700）

【摘要】目的：研究手工微柱凝胶免疲检验法在AB0、RhD血型抗原鉴定中的应用效果；方法：收集我院2015年1月～2015年12月1068例健康体检人群作为研究对象，按照随机数字表法分为观察组和对照组各534例，观察组采用手工微柱凝胶免疲检验法检测血型，对照组采用试管法检测血型。结果：经手工微柱凝胶免疲检验法和试管检验法对1068例健康体检人群进行ABO、RhD血型抗原检验结果相符率100%，两种方法对比P>0.05；结论：手工微柱凝胶免疲检验法比试管法血型鉴定操作更方便，结果判断清晰准确，灵敏度高，具有很强的临床应用价值。

【关键词】手工微柱凝胶免疲检验法；AB0、RhD血型抗原鉴定；应用效果

【中图分类号】R446.11【文献标识码】A【文章编号】1007-8231（2016）19-0097-02

血型鉴定是根据人体血液中含有的血型抗原分类的，常见的有A型、B型、O型及AB型，此外还存在RH等特殊血型[1]。血型鉴定主要用于临床输血、在皮肤、肾移植等器官移植的时候选择ABO血型相符的供体，不孕症和新生儿溶血症病因的分析，亲子鉴定等[2]，血型鉴定在临床上相当重要，用以危重病人的抢救，所以选择检验方法很重要，我院就试管法和手工微柱凝胶免疲检验法的临床效果做了研究。

1.资料与方法

1.1资料

收集我院2015年1月～2015年12月1068例健康体检人群作为研究对象，其中男560例，女508例，年龄14～63岁，平均（30.62±3.74）岁。所有受检人群未服用对检测有影响的药物，未患对检测有影响的疾病，不处于妊娠期及哺乳期，本次研究受检人群都知情同意并签字。按照随机数字表法分为观察组和对照组，每组534例，两组一般资料差异无统计学意义（P＞0.05），具有可比性。

1.2研究方法

对照组采用试管法检测血型具体方法为加1滴抗D试剂于一支预先标记好的试管中，再加一滴约2%～5%的被检红细胞悬液于试管中混匀，离心，立即以1000r/min离心1min。观察结果用肉眼观察，完全凝集的试管，液体清亮，底部有红细胞的凝块，管底细胞呈花边状，轻弹试管凝块不散，完全不凝的液面清亮，血细胞均匀地沉到管底，边缘整齐，用手指轻弹试管，红细胞像一缕烟似地立即上升，随即成为均匀的悬液;轻微凝集的，必须将液体转到载片上镜检后决定，如果凝集表示被检红细胞上存在D抗原Rh(D)阳性，无凝集为Rh(D)阴性。试管法ABO血型鉴定：根据IgM类特异性血型抗体与红细胞膜上特异性抗原结合能出现凝集反应的原理，用已知IgM类特异性标准抗A和抗B血清来测定红细胞上有无相应的A抗原或（和）B抗原，同时用已知标准A型红细胞和B型红细胞来测定血清中有无相应的天然IgM类抗A或（和）抗B，静脉EDTA抗凝血2.0～3.0ml，以3000r/min离心3分钟，分离上清液，单克隆或多克隆抗A、抗B试剂，3～5%A、B及O型试剂标准红细胞悬液。

凝集判断：++++：红细胞凝集成一大片或几片，仅有少数单个游离红细胞，血清清晰透明；+++：红细胞凝集成数个大颗粒凝块，有少数单个游离红细胞，血清透明；++：红细胞凝成数个小颗粒凝块，游离红细胞＜1/2；+：红细胞凝成数个小颗粒凝块，游离红细胞＞1/2；±：红细胞凝成数个微小颗粒凝块，周围有很多游离红细胞。

观察组采用手工微柱凝胶免疲检验法，选择检验仪器为江阴力博医药生物技术有限公司的卡与标准细胞、应用LB-3000医用低速离心机，具体方法为采集好血液标本，常规质量检测，采集血液量为5ml,将其分为3份，对标本进行分离血清、红细胞、将获得的0.8%～1%红细胞悬液50μL加入抗A、抗B、抗D微柱凝胶检测管中采用2级离心法离心2分钟，而后加速离心3分钟。红细胞发生凝集，离心后留在微柱的表面为阳性，红细胞下沉到微柱的底部为阴性。

1.3统计学方法

应用SPSS13.0统计软件进行，计量资料以均值±标准差表示，组间比较行t检验，计数资料用率表示，采用χ2检验，取P＜0.05时差异具有统计学意义。

2.结果

1068例健康体检的人群应用试管法和手工微柱凝胶免疲检验法分别对血液样本中ABO、RhD血型抗原鉴定后，检验结果相符率100%，两种方法的结果对比无统计学差异（P＞0.05），见表。

表两种方法检验结果比较[n（%）]

组别nABO阳性RhD阳性

观察组534324（60.67）533（99.81）

对照组534324（60.67）534（100.00）

3.讨论

血型检测非常重要，所有疾病抢救输血前必须检查是什么血型，只有血型配型才会使输入的血液不发生凝集，血型检查对产前检查也相当重要，检查双方ABO血型不合或RH血型不合，都可引起新生儿或胎儿溶血病，从而发生死胎、死产、甚至新生儿的死亡的不良妊娠结局。

本文就手工微柱凝胶免疲检验法在血型检测中的应用与试管法作对比，结果两种方法的结果对比无统计学差异P＞0.05。手工微柱凝胶免疲检验法目前在国外输血邻域以逐渐作为常规用于ABO、Rh血型定型，在微柱凝胶介质中，红细胞与相应的介质相结合，通过低速离心，凝集的红细胞悬浮于凝胶中，而未与相应的抗体结合的红细胞沉到管底，凝胶试验有几种不同的胶可分别做血型抗原检测，血型不完全抗体检测等，与试管法比较操作简单，反应灵敏、省略了洗涤细胞及结果确认等过程，结果可靠、明确易于判读、工作程序化及标准化，重复性好，在检测中可节约材料，而且对于不规则红细胞血型抗体的检测手工微柱凝胶免疲检验法优于普通的试管法。

综上所述，手工微柱凝胶免疲检验法在AB0、RhD血型抗原鉴定中的应用效果显著，可以取代以往的试管法和玻片法，此法在血型鉴定操作中更方便，结果判断清晰准确，灵敏度高，具有很强的临床应用价值。

【参考文献】

[1]田宁.手工微柱凝胶免疫检验法在ABO、RhD血型抗原鉴定中的应用[J].大家健康:学术版,2014,8(8):81-82.

[2]王玫,王红菊,吕莉.浅谈卡式微柱凝胶法在血型鉴定中的应用[J].当代医药论丛,2014,(2):99-99.