抗人球蛋白试验对免疫性溶血性贫血诊断应用价值

抗人球蛋白试验对免疫性溶血性贫血诊断应用价值

王威

哈尔滨市血液病肿瘤研究中心实验室150010

摘要：目的：探讨抗人球蛋白试验对免疫性溶血性贫血的诊断及临床意义；方法：选取我院2017年1月~2017年12月期间疑似免疫性溶血性贫血患者80例血液标本用抗人球蛋白试验采用直接抗人球蛋白试验与间接抗人球蛋白试验。结果：直接抗人球蛋白试验（DAT）的阳性验出率明显高于间接抗人球蛋白试验（IAT），差异显著具有统计学意义。结论：直接抗人球蛋白试验（DAGT）阳性常见于自身免疫性溶血性贫血，直接试验阳性是诊断依据。

关键词：抗人球蛋白试验；免疫性溶血性贫血；价值

自身免疫性溶血性贫血（AIHA）是由于机体免疫调节系统功能紊乱，产生针对自身红细胞的抗体，与红细胞表面抗原结合，活化补体，导致红细胞破坏加速、寿命缩短，而引起的溶血性贫血。抗球蛋白试验是最早检出不完全抗体的方法。自身免疫性溶血性贫血抗人球蛋白大多阳性[1]。直接抗人球蛋白法可检查受检者红细胞是否已被不完全抗体致敏；间接抗人球蛋白法可用于鉴定Rh血型及血清中是否存在不完全抗体[2]。现对免疫性溶血性贫血的临床诊断中的应用价值进行分析如下。

1资料与方法

1.1一般资料选取我院2017年1月~2017年12月期间疑似免疫性溶血性贫血患者80例，其中男性36例，女性44例。年龄15～81岁，平均年龄４５±2.5岁。

1.2方法凝集试验，用AHG检测与红细胞结合的抗体称直接试验（DAGT）；检测血清中游离的抗体因需用O型红细胞吸附再与AHG反应，称间接试验（IAGT）。

1.2.1直接抗人球蛋白试验（DAGT）制备被检标本10％红细胞悬液：取被检红细胞，用9g/L氯化钠溶液洗涤3次后，配成10％红细胞悬液。加样：取试管3支，标明测定管、阳性对照管和阴性对照管。各管混匀后，放置室温30分钟观察结果；或1000r／min离心1分钟，轻轻混匀后观察结果。

1.2.2间接抗人球蛋白试验（IAGT）取试管3支，标明测定管、阳性对照管和阴性对照管。混匀，置37℃水浴1小时后，用9g／L氯化钠溶液洗涤3次，最后每管配成10％的红细胞悬液。每管各加2滴抗人球蛋白血清，混匀后，放置室温30分钟观察结果；或1000r／min离心1分钟，轻轻混匀后观察结果[3]。

1.3统计学分析所有数据资料采用SPSS20.0统计学软件进行处理分析，计数资料采用百分率（%）表示，组间采用x2检验，P<0.05表示为组间差异具有统计学意义。

2结果

自身免疫性溶血性贫血（AIHA）患者80例，直接抗人球蛋白试验（DAGT）验出阳性情况有，总检出例数77例（96.25%），IgG+C3d型40例（50.0%），IgG型13例（16.25%），C3d型24例（30.0%）；间接抗人球蛋白试验（IAT），验出阳性情况有，总检出例数21例（26.25%）。直接抗人球蛋白试验（DAT）的阳性验出率明显高于间接抗人球蛋白试验（IAGT），差异显著具有统计学意义。

3讨论

抗人球蛋白试验（Coombs试验）是检测自身免疫性溶血性贫血的针对自身红细胞的自身抗体（IgG）。分为检测红细胞表面有无不完全抗体的直接抗人球蛋白试验（DAGT）和检测血清中有无不完全抗体的间接抗人球蛋白试验（IAGT）。直接抗人球蛋白试验检验标本应新鲜，试管要洁净，避免血浆蛋白污染，以防假阴性[4]。洗涤红细胞既要充分，又要尽可能缩短洗涤时间，以免包被的IgG被洗脱。每次洗涤要尽可能除去液体，加入9g／L氯化钠溶液后要充分混匀。抗人球蛋白血清应按说明书使用最佳稀释度，以免产生前带或后带现象而误为阴性结果[3]。必要时，可将抗血清作倍量稀释，以出现凝集的最高稀释倍数的倒数为直接抗人球蛋白试验的效价。对阴性结果最好进行核实，即在测定管内再加1滴阳性对照红细胞悬液，如出现凝集，则表示测定管内的抗人球蛋白确未被消耗，阴性结果正确。如需检测体内致敏红细胞的免疫球蛋白类型，可分别用单价的抗IgG、抗IgM或抗C3血清进行测定。

间接抗人球蛋白试验）洗涤红细胞要充分、迅速，切勿用手指压住试管口进行颠倒混匀，以免手中蛋白混入而影响试验结果。离心速度与时间要严格控制。原则上应以最小离心力、在最短时间能使阳性对照管出现阳性反应为宜[5]。

抗人球蛋白试验（库姆斯试验，Coombs试验）以直接抗人球蛋白试验（DAGT）最常用。取受检者的抗凝静脉血，分离的红细胞膜上存在IgG和（或）C3d，用抗人球蛋白试剂抗IgG和（或）C3d与其结合，使红细胞发生凝集。间接抗人球蛋白试验（IAGT）是以受检者血清与O型或Rho（D）阳性红细胞孵育使其致敏，再与抗人球蛋白试剂作用，观察凝集现象。

直接抗人球蛋白试验用于检测自身免疫性溶血性抗体，阳性见于自身免疫性溶血性贫血，为临床早期诊断、治疗自身免疫性溶血性贫血提供依据，具有重要的临床应用价值。

参考文献：

[1]胡利亚，兰炯采，张克勤，等.自身免疫性溶血性贫血直接与间接抗人球蛋白试验的探讨[J].郑州大学学报（医学版），1994（1）：83-85.

[2]李永莉，陈晓丹，陈星群，等.抗人球蛋白试验检测自身免疫性溶血性贫血的临床意义[J].海南医学院学报，2003，9（1）：33-34.

[3]徐艳，赵玉平，沈琳，等.直接和间接抗人球蛋白试验均阳性的自身免疫性溶血性贫血[J].实用医技杂志，2006，13（18）：3327-3327.

[4]穆万洋，邓安彦，吴春磊，等.抗人球蛋白试验对自身免疫性溶血性贫血患者的指导用血意义[J].医学信息，2013（18）：588-588.

[5]张勇萍，杨世明，曹丽妍，等.抗人球蛋白试验阳性及其临床意义的探讨[J].细胞与分子免疫学杂志，2011，27（11）：1245-1246.