枸橼酸莫沙必利片的HPLC测定

枸橼酸莫沙必利片的HPLC测定

余辉林川

余辉林川（福建省肿瘤医院350004）

【摘要】目的建立枸橼酸莫沙必利片剂含量测定的HPLC。方法色谱柱：PhenomenexC18(4.60mm×250mm,5μm)；流动相：乙腈-(5：95，V/V)，流速：1mL•min–1，检测波长274nm。结果枸橼酸莫沙必利片剂中辅料和有关物质对主药无干扰，在50～200μg•mL-1范围内线性关系良好，r=0.9998，加样平均回收率（n=9）为100.4%。结论本方法准确可靠，专属性强，灵敏度高，可用于枸橼酸莫沙必利的质量控制。同时为今后开展液相色谱-质谱技术联用奠定基础。

【关键词】HPLC枸橼酸莫沙必利含量测定

【中图分类号】R927.2【文献标识码】A【文章编号】2095-1752（2013）23-0045-02

DeterminationofMosaprideCitrateTabletsbyHPLC

YuHui,LinChuan

(FujianTumorHospital,Fuzhou,350014)

【Abstract】Objective:ToestablishamethodofHPLCfortheanalysisofmosapridecitrate.Method:TheHPLCmethodwasperformedonanSHIMDAU10Avpliquidchromatography.PhenomenexC18column(4.66mm×250mm,5μm)wasusedwiththemobilephaseofdeionizedwater-acetonitrile(95:5,V/V).Theflowratewas1.0mL•min-1andthedetectionwavelengthwassetat274nm.Result:Therelationshipbetweenthepeakareaandtheconcentrationofmosapridecitratewaslinearintherangeof50-200μg•mL-1withrof0.9998.Theaveragerecovery(n=9)was100.4%.Conclusion:Themethodisaccurate,sensitiveandtheresulthasgoodspecificity.Itcanbeusedforthequalitycontrolofmosapridecitratefromfermentationliquor.Simultaneously,themethodwouldbethefoundationforHPLC-MS.

【Keywords】HPLCMosaprideCitrateQuantitativedetermination

枸橼酸莫沙必利是消化道促动力剂，主要用于功能性消化不良伴[1]。其作用机制是通过兴奋肌间神经丛的5-HT4，刺激乙酰胆碱释放,增强胃及十二指肠运动,是新型安全有效的消化道动力药[2]。现行标准[3]尚未收载该品种的有关物质的检查方法。为有效控制药品的质量，本文参考有关文献[4-7]，采用HPLC法对枸橼酸莫沙必利片剂有关物质进行检测。

1仪器与试剂

1100型高效液相色谱-质谱联用仪（美国Agilent公司），配二元梯度泵、在线脱气机、自动进样器。枸橼酸莫沙必利对照品（含量99.6%，中国食品药品检定研究院），枸橼酸莫沙必利片（5mg/片，江苏豪森药业股份有限公司）；乙腈、甲醇为色谱纯。

2方法

2.1色谱条件及质谱条件

色谱柱：PhenomenexC18（4.60mm×250mm,5μm）；预柱：PhenomenexC18（4×3.0mm）；流动相：水-乙腈(95：5，V/V)；流速：1mL•min–1；检测波长：274nm；进样量：10μL；柱温：25℃。

2.2溶液的制备：

2.2.1对照品溶液：取枸橼酸莫沙必利对照品约50mg，精密称定，置50mL量瓶中，加甲醇适量并稀释至刻度，作为对照品溶液。

2.2.2供试品溶液取：取枸橼酸莫沙必利片剂50mg，精密称定，研细，置50mL量瓶中,加甲醇适量并释至刻度,振摇15min,作为供试品溶液。

3方法学考察

3.1系统适应性试验

分别量取橼酸莫沙必利对照品溶液，按“2.1”项下的色谱条件各进样10μL，结果（见图1）。对照品的保留时间为：16.2min。理论塔板数按枸橼酸莫沙必利峰计算不低于10000，分离度大于2.0（如图1）。

图1枸橼酸莫沙必利对照品HPLC图

3.1专属性考察

取枸橼酸莫沙必利2份10mL的供试品溶液，各加0.2ml盐酸(1mol•L–1)和氢氧化钠（1mol•L-1）溶液进行强酸、强碱破坏。另取10mL供试品溶液于100℃水浴加热30min，取出，冷却至室温。

将破坏后的供试品溶液按照“2.1”项下的色谱条件下进行降解产物检出实验。结果表明，在强酸、强碱、高温等破坏的供试品溶液的色谱图中均有不同杂质峰产生，且均与主成分峰分离良好（如图2、3、4）。

3.2线性关系考察

按“2.2.1”项下方法分别配制成50μg•mL-1、75μg•mL-1、100μg•mL-1、150μg•mL-1、200μg•mL-1的浓度不等的对照品溶液，按上述色谱条件各进样10μL，以枸橼酸莫沙必利对照品的峰面积Y对浓度X（μg•mL-1）进行线性回归分析，回归方程和相关系数分别为：Y=19718X-202.2；r=0.9998。结果表明，枸橼酸莫沙必利在50～200μg•mL-1范围内线性关系良好。

3.3系统精密度、重复性及溶液的稳定性试验

取“2.2.1”项下的供试品溶液，连续进样6次，以峰面积计算RSD值为0.6%（n=6）。

取“2.2.2”项下的供试品溶液，照“2.2.1”项下的方法配制6份溶液，以峰面积计算RSD值为0.44%（n=6）。

取“2.2.2”项下的供试品溶液，分别于0、1、4、6、8h测定，杂质含量在8h内未增加，表明供试品溶液在8h内是稳定的。

3.4加样回收率试验

按“2.2.1”项的方法操作，配制成100μg•mL-1的枸橼酸莫沙必利标准品溶液，分别取3mL、5mL和7mL至25mL容量瓶中，各加入10mL的供试品溶液，加甲醇稀释至刻度。照“2.2.1”项下的色谱条件各进样10μL，按外标法计算枸橼酸莫沙必利的浓度。

结果显示，低、中、高3个浓度的回收率（n=3）分别为101.2%、100.5%、99.6%；RSD分别为0.19%、0.06%、0.08%；平均回收率为100.4%，RSD为0.11%（n=9）。

3.5供试品测定

取批号分别为120402，120502，120602，120702，120702，120702，120702，120702，120702的8批供试品溶液，分别按照“2.1”项下的色谱条件各进样10μL测定含量，结果见表1。

表1供试品含量测定结果（n=10）

4讨论

4.1检测波长的选择取“2.2.1”项下的对照品溶液在200nm～400nm的波长范围内进行全扫描，枸橼酸莫沙必利在274nm和309nm处均有最大吸收，但274nm波长的响应值比308nm波长的响应值大，故检测波长选择274nm。

4.2流动相的选择本试验曾比较多种流动相系统，经选择以水-乙腈的流动相系统最好，并为下一步的HPLC-ESI-MS分析枸橼酸莫沙必利有关杂质奠定了基础。

参考文献

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[2]DrugSpecificationsPromulgatedbySFDA.MosaprideCitrateTablets.1999.WS-541(X-482)-99.

[3]王守箐.HPLC测定枸橼酸莫沙必利片的有关物质[J].药物分析杂志,2011,31(12):2330-2332.

[4]祖金凤.气相色谱法测定枸橼酸莫沙必利中有机溶剂残留量[J].齐鲁药事,2011,30(9):519-520.

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[6]蔡梅，李忠红，杨丹.枸橼酸莫沙必利的手性分离[J].海峡药学,2008,20(3):56-58.

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