基因测序在β地中海贫血稀有突变患者产前诊断中的应用

基因测序在β地中海贫血稀有突变患者产前诊断中的应用

贺骏

（长沙市妇幼保健院遗传科）

摘要：目的基因测序在β地中海贫血稀有突变患者产前诊断中的应用效果。方法选取夫妇A、夫妇B作为研究样本。采用血细胞全自动分析仪检测血液常规，做血红蛋白电泳分析，采用PCR仪扩增β球蛋白基因，于ABI3730测序仪上测序。对两组患者的检验结果进行观察与分析。结果夫妇A与夫妇B均为β地中海贫血稀有突变携带者，但胎儿未遗传。结论应将基因测序应用到β地中海贫血稀有突变患者产前诊断中，提高β地中海贫血稀有突变患儿的检出率，为新生儿健康水平的提升提供保证。

关键词：基因测序；β地中海贫血稀有突变；反向杂交芯片技术；聚合酶链反应

前言：

地中海贫血为单基因遗传病的一种，临床较常见，其中的β地中海贫血突变患者较为罕见，对新生儿的健康不利。常规采用聚合酶链反应结合反向杂交芯片技术检测β地中海贫血突变，准确率较高。有研究指出，将基因测序技术应用到疾病的诊断中，诊断效果同样较好。本文于本院收治的2对产检夫妇作为样本，对基因测序在β地中海贫血稀有突变患者产前诊断中的应用价值进行了探讨：

1资料与方法

1.1一般资料

夫妇A：孕妇25岁，丈夫年龄27岁。夫妇B：孕妇30岁，丈夫年龄29岁。两孕妇均于2017年在丈夫的陪同下，来院做产前检查。筛查结果提示，两者均为地中海贫血患者。建议采用聚合酶链反应结合反向杂交芯片技术，以及基因测序技术，进一步诊断，以明确病情。

1.2方法

1.2.1地中海贫血的筛查方法

地中海贫血的筛查方法以血液常规检查及血红蛋白电泳分析为主：（1）采用血细胞全自动分析仪检测血液常规。（2）做血红蛋白电泳分析。

1.2.2基因诊断方法

患者存在HbA2升高或血红蛋白电泳异常的症状，采用α、β地中海贫血基因诊断试剂盒，进行基因诊断。

1.2.3基因测序方法

基因测序方法如下：（1）采用PCR仪扩增β球蛋白基因，于ABI3730测序仪上测序。（2）测序范围：上游至-126，下游至终止密码子后230碱基位置。（3）参考序列：U01317。

1.2.4产前诊断方法

确诊为β地中海贫血稀有突变的患者，需于孕18--24周，来源抽取脐血1ml或羊水10ml，提纯DNA，并行基因测序，评估胎儿是否携带β地中海贫血稀有突变基因。

1.3观察指标

观察两组产检夫妇的基因序列检测结果。

2结果

2.1夫妇A基因序列检测结果

夫妇A血常规结果见表1：

表1夫妇A基因序列检测结果

图1夫妇A中女性的基因测序结果

通过对孕妇A的胎儿基因测序结果的观察发现：胎儿基因未见异常。

2.2夫妇B基因序列检测结果

夫妇A血常规结果见表2：

表2夫妇A基因序列检测结果

图2夫妇B中女性的基因测序结果

通过对孕妇B的胎儿基因测序结果的观察发现：胎儿未遗传β地中海贫血稀有突变。

3讨论

地中海贫血临床较常见，主要包括α地中海贫血与β地中海贫血两种[1]。β地中海贫血，指β链的合成受到抑制的一组血红蛋白病，具有遗传性。携带β地中海贫血基因的患儿，出生时症状表现多不明显。当月龄达到3m后，部分新生儿开始发病。根据患儿病程的不同，其临床症状同样存在一定的差异。骨骼的改变，是疾病的主要表现形式。发病初期，骨骼改变多体现在掌骨部位，继而逐渐发展至肋骨区域。达到颅骨后，患儿头部形状会随之发生改变，体现出头部过大、眼距增加、额部突起等特点[2]。如不及时治疗，患儿死亡率极高。可见，β地中海贫血，对儿童健康水平的影响极大。如能够通过产检诊断出疾病，则可及时终止妊娠，以减少患儿的出生率，减轻患儿家庭的负担。

将聚合酶链反应结合反向杂交芯片技术，以及直接基因测序技术，应用到β地中海贫血稀有突变患者疾病的诊断过程中，检出率较高。本文两组夫妇的诊断结果提示，4例患者均为β地中海贫血稀有突变携带者。通过对4例患者血常规检测指标的观察发现，夫妇B中的男性，血液各项指标无异常。表明，单独采用血常规检验方法诊断β地中海贫血稀有突变，漏诊率较高。两例胎儿基因测序未发现β地中海贫血稀有突变。认为胎儿均较为健康。

当前，β地中海贫血稀有突变的治疗方法，主要包括输血、去铁、切除脾、移植造血干细胞以及基因治疗等。输血能够有效纠正机体缺氧症状，降低肠道对铁的吸收量，抑制疾病的进展。但却容易对患儿的生长发育造成影响。去铁能够直接降低机体内铁的含量，使脾肿大的症状得到缓解。移植造血干细胞，能够从根本上使疾病得到治疗，但费用较高。基因治疗要求从分子的水平入手，纠正基因表达，使疾病得到控制。可以看出，上述治疗方法均存在一定的缺陷。因此，落实产检，及早发现疾病，并终止妊娠，仍属于当前控制β地中海贫血稀有突变患儿出生率的主要方法。产前诊断能够及时检出夫妇是否为β地中海贫血稀有突变携带者，同时也能够清楚的了解胎儿的健康水平。如基因测序结果提示胎儿携带β地中海贫血稀有突变基因，则不建议保胎。

应将基因测序应用到β地中海贫血稀有突变患者产前诊断中，提高β地中海贫血稀有突变患儿的检出率，为新生儿健康水平的提升提供保证。

参考文献

[1]李浩贤，孙筱放.无创产前诊断技术应用于地中海贫血的研究进展[J].中国医药生物技术，2017，12（02）：166-170.

[2]曾劲伟，方颖迪，崔金环.育龄人群稀有β地中海贫血基因突变分析[J].中国卫生检验杂志，2014，24（15）：2235-2237