黄芪多糖对小鼠免疫功能的影响

黄芪多糖对小鼠免疫功能的影响

朱永俸1石高星1吴剑平1李珊珊1袁婧1黄立师1刘

朱永俸1石高星1吴剑平1李珊珊1袁婧1黄立师1刘佳2(通讯作者)

（1长沙医学院2010级生物技术专业湖南长沙410219）

（2长沙医学院生物学教研室湖南长沙410219）

【摘要】目的探讨黄芪多糖对小鼠的免疫功能的影响。方法连续28天黄芪多糖以4.0，1.0，0.25g／kg浓度给予小鼠灌胃,检测小鼠的胸腺，脾脏指数及小鼠腹腔巨噬细胞的吞噬能力。结果低浓度组的胸腺指数高于空白组（P=0.017），中浓度组的脾脏指数高于空白组（P=0.002），其他各组差别无统计学意义。各组小鼠腹腔巨噬细胞的吞噬率、吞噬指数无显著差别（F=2.088，P=0.140）。结论黄芪多糖可能通过提高胸腺和脾脏的功能从而增强免疫力，但对参与非特异免疫的巨噬细胞影响不明显。

【关键词】胸腺脾脏指数吞噬能力

【中图分类号】R965【文献标识码】A【文章编号】2095-1752（2013）31-0254-02

长期以来，人类生活在一个充满危险的环境，得以存续的同时，也获得了非凡的免疫力。免疫力低下的机体易于感染、易于生病；如引发过敏反应、自身免疫病等，因此优化免疫力已经成为了医学研究的热点之一。中药黄芪的使用迄今已有2000多年的历史，有利尿、抗疲劳、抗衰老、抗应激、降压等多方面作用，关于黄芪是否能够增强机体免疫能力尚需研究。黄芪的主要活性成分是黄芪多糖，因此，本实验通过给小鼠连续灌胃黄芪多糖，研究黄芪多糖对小鼠免疫力是否具有提升作用。

1材料与方法

1.1材料

1.1.1主要试剂和仪器

黄芪多糖(纯度70%，批号：20130310)；电子恒温不锈钢水浴锅（上海市南阳仪器有限公司）；光学显微镜（MOTIC公司）；1%鸡红细胞悬液；6%淀粉肉汤(含0.3%台盼蓝)）；吉姆萨染液；其他试剂为分析纯。

1.1.2动物

40只SPF级昆明小鼠，雄性，体重(22±2)g，由湖南斯莱克景达实验动物有限公司提供，批号43004700000750，长沙医学院湖南省重点建设学科标准动物室饲养。

1.2方法

1.2.1动物处置

实验以4.0，1.0，0.25g／kg浓度设3个剂量组，另设1个对照组，每组10只小鼠，采用灌胃法，对照组给予等量蒸馏水，每天一次，连灌28天，第27、28天向小鼠腹腔注射6%淀粉肉汤1ml。第29天，称重后腹腔注射20%鸡红细胞悬液0.5-1ml,轻柔小鼠腹部。30min后,再向腹部内注射0.5ml小鼠生理盐水,轻柔小鼠腹部。3min后，将小鼠以颈部脱位法处死。小鼠剪开腹腔，用不装针头的注射器吸取腹腔液涂片，吉姆萨染色后，检测巨噬细胞吞噬能力。分离脾脏和胸腺，洗净吸干水分，称重。

1.2.2胸腺和脾脏指数的测定

摘取小鼠的胸腺和脾脏，用滤纸吸干残血后，称重（mg），按公式计算胸腺指数和脾脏指数，即：胸腺指数=胸腺重量/（小鼠体重×10）

脾脏指数=脾脏重量/（小鼠体重×10）（每10g小鼠体重含有的胸腺或脾mg重量，mg/10g）

1.2.3巨噬细胞吞噬能力的测定

剪开腹部皮肤，将注射器伸入小鼠腹腔中，吸取腹腔液，把腹腔液滴加在洁净的载玻片上，然后将载玻片置于电子恒温不锈钢水浴锅中，在37℃恒温孵育30分钟。将载玻片取出，用水轻轻的冲洗，去除上清和未粘附在玻片上的细胞在室温下晾干。再用甲醛固定3分钟，晾干后用吉姆萨染色，冲洗多余的染液晾干。在油镜下观察计数100个巨噬细胞，计算出吞噬百分率（吞噬了鸡红细胞的巨噬细胞所占比率）和吞噬指数（每100个巨噬细胞中吞噬了红细胞个数)。

1.2.4统计学方法

采用SPSS19软件进行数据分析处理，数据以`x±s表示。多组间比较采用单因素方差分析，组间两两比较方法采用LSD法，P<0.05有统计学意义。

2结果

2.1黄芪多糖对胸腺指数，脾脏指数的影响

经过28天不同浓度的黄芪多糖灌胃，各组的胸腺指数存在区别（F=3.588，P=0.036），其中低浓度组的胸腺指数高于空白组（P=0.017），其他各组差别无统计学意义。各组的脾脏指数存在区别（F=4.914，P=0.012），其中中浓度组的胸腺指数高于空白组（P=0.002）。

表1黄芪多糖对小鼠胸腺指数与脾脏指数的影响（x-±s，n=10）

3讨论

本实验主要研究黄芪多糖（APS)对小鼠免疫器官（包括脾脏，胸腺）及对小鼠的吞噬细胞的吞噬能力的影响。黄芪多糖的主要生物活性成分，包括两种葡聚糖(AG-l、AG-2)和两种杂多糖，大量研究表明黄芪多糖具有抗病毒、抗氧化、抗应激、防治腹泻等多种生理功能。近年来许多学者从不同角度对其进行了研究，发现其具有很好的免疫调节作用[1]，郝钰等[2]证实APS可通过增强淋巴细胞与内皮细胞的粘附而促进淋巴细胞再循环，增加淋巴细胞与抗原的接触机会，从而扩大免疫反应，增强机体免疫功能。张建刚等[3]也有谈及到：APS的免疫增强机理主要与下列因素有关：促进动物免疫器官发育、提供更多的免疫活性细胞，活化免疫细胞(T细胞、B细胞、K细胞和NK细胞等)，激活巨噬细胞功能、增强其吞噬、处理、传递抗原的作用：促进细胞因子的分泌及活性等。据边传周等报道[4]，黄芪多糖它能提高淋巴细胞的转化率，提高机体对抗原的免疫应答能力，增强巨噬细胞的吞噬能力。而本实验研究只发现黄芪多糖对小鼠的胸腺和脾脏有一定的影响，而对小鼠的吞噬细胞的吞噬功能没有显著影响，是否对非特异性免疫无优化作用，这一点尚需进一步研究。黄芪多糖作为畜禽免疫增强剂已被人们所接受，本实验确认了黄芪多糖在一定程度上对免疫系统增强作用，希望为其用于提高人类免疫力提供更多依据。

参考文献

[1]张小梅.黄芪多糖的免疫调节作用及抗肿瘤作用研究进展[J].大连大学学报，2003，24(06）：101-104

[2]郝钰，邱全英，等.黄芪多糖对淋巴细胞与血管内皮细胞粘附的影响及其分子机制[J].免疫学杂志，2000,16（3）：206—209

[3]张建刚，陆银，邓波波.黄芪多糖的生物学功能及其在养猪生产中的应用[J].养猪,2010,(6)：9-10.

[4]边传周，王老七.黄芪多糖对断奶仔猪免疫功能及腹泻的影响[J].畜牧与兽医，2005，37(1)：ll—12.