VEGF与mTOR在子宫内膜癌组织中的表达及意义

VEGF与mTOR在子宫内膜癌组织中的表达及意义

马海琴1徐浩2*

马海琴1徐浩2*

（1徐州市妇幼保健医院妇产科江苏徐州221000；2徐州医学院附属医院妇产科江苏徐州221000）

【中图分类号】R737【文献标识码】A【文章编号】1672-5085（2013）07-0173-02

【摘要】目的研究探讨VEGF与mTOR在子宫内膜癌中的表达及其临床意义。方法利用SP免疫组化法对VEGF与mTOR在54例子宫内膜癌，20例正常子宫内膜组织中的表达情况进行检测。结果VEGF与mTOR的表达在子宫内膜癌组与对照组间差异有统计学意义(P<0.01)。VEGF在子宫内膜癌组织中的表达与年龄及病理分期呈正相关（p<0.01），mTOR在子宫内膜癌中的表达与年龄和手术病理分期均无明显关系（p>0.05）。结论在子宫内膜癌的发生发展中存在VEGF与mTOR异常高表达，为子宫内膜癌的靶向生物治疗提供依据。

【关键词】子宫内膜癌VEGFmTOR

子宫内膜癌是妇科临床常见的恶性肿瘤，发病率逐年上升，分子生物学研究认为，信号传导系统的缺陷和异常活化导致肿瘤凋亡抑制和增殖异常活化是肿瘤发生的主要机制［１］。导致肿瘤的发生和发展成为众多研究者关注的热点，已有大量研究［２］表明mTOR信号通路与细胞生长增殖、细胞周期调控、细胞迁移等密切相关，mTOR信号通路在子宫内膜癌的发生发展中有重要的意义［３］［４］。本研究通过检测VEGF与mTOR在子宫内膜癌组织中的表达，以证实VEGF与mTOR在子宫内膜癌的发生发展中的意义。

1.材料与方法

1.1材料

标本来源于徐州医学院附属医院病理科2009年-2012年的子宫内膜组织蜡块，均经病理组织学确诊，包括54例子宫内膜癌,20例正常子宫内膜，年龄为46-71岁，中位年龄60岁。病变组织浸泡于10%甲醛溶液中，常规石蜡包埋。

1.2主要试剂和仪器

兔抗人多克隆抗体p-mTOR，兔抗人多克隆抗体VEGF,SP免疫组化试剂盒及DAB显色剂均购自bioworld生物科技公司，抗体稀释浓度均为1:100。以PBS代替一抗作为空白对照。

1.3试验方法

选取组织标本均经10%中性甲醛固定，石蜡包埋,4um连续切片，采用链霉抗生物素蛋白-过氧化物酶法(SP法)免疫组织化学染色法检测。免疫组化步骤按SP试剂盒说明书操作。

1.4结果判读

显微镜下观察，p-mTOR阳性染色主要在细胞胞质，VEGF主要在细胞质中表达,先用低倍镜阅片，再用高倍镜选取5个高倍视野，首先将染色强度打分:0分为无色，1分为淡黄色，2分为棕黄色，3分为棕褐色。(染色深浅需与背景着色相对比)。再将阳性细胞所占的百分比打分:0分为阴性，1分为阳性细胞<10%，2分为阳性细胞11%-50%，3分为阳性细胞51%-80%，4分为阳性细胞=>81%。染色强度与阳性细胞百分比的乘积大于6分为高表达，小于6分为低表达［５］。

1.5统计计学处理:

应用SPSS13.0软件进行统计分析，利用χ2检验，P<0.05具有统计学意义。

2.结果

2.1VEGF与mTOR在正常子宫内膜及子宫内膜癌组织中的阳性表达比较，差异有统计学意义(P<0.01)，见表1。

表1VEGF与mTOR在正常子宫内膜及子宫内膜癌组织中的表达

组别例数(例)VEGF阳性表达mTOR阳性表达

正常组2013

子宫内膜癌544245

χ231.75629.902

p<0.01<0.01

2.2VEGF在子宫内膜癌组织中的表达与年龄及病理分期呈正相关（p<0.01），mTOR在子宫内膜癌中的表达与年龄和手术病理分期均无明显关系（p>0.05），见表2。

表2VEGF与mTOR的表达与子宫内膜癌年龄及病理分期的关系

3.讨论

研究［6］表明，恶性肿瘤的生长、转移及预后与新生血管的生成密切相关。肿瘤的血管生成主要由肿瘤细胞产生的血管形成因子诱导，VEGF为血管生成中最关键的因子。mTOR信号转导通路可以可以通过多种途径促进HIF-1a(低氧诱导因子la)的表达，启动VEGF(血管内皮生长因子)基因的转录，促进VEGF的表达，VEGF与其特异性受体结合后刺激血管内皮细胞生长、诱导新生血管腔形成及增加血管通透性，为肿瘤生长提供大量营养物质以及为肿瘤细胞浸润及远处转移提供了机会［７］。VEGF与子宫内膜癌的预后密切相关［８］［９］。文献报道［10］［11］正常子宫内膜VEGF增殖期低表达，分泌期表达增高；基底层表达高于功能层，间质表达低于腺体；正常内膜表达明显低于子宫内膜癌，这提示VEGF参与子宫内膜生理性修复，但过度表达导致子宫内膜恶变。哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mammaliantargetofrapamvycin,mTOR)是一种丝氨酸/苏氨酸激酶，由2549个氨基酸组成，分子量为289kD，属于PIKK家族(PtdIns3K-relatedkinasefamily)成员之一［１２］，mTOR是细胞生长和增殖的关键调节分子，mTOR可接收生长因子、营养、能量等多种信号，通过PI3K/AKT途径或AMPK途径来发挥作用。该通路在子宫内膜癌的发生发展中有重要的意义［１３］［１４］因此联合检测VEGF与mTOR在子宫内膜癌组织中的表达利于了解子宫内膜癌的生物学行为及预后，也为子宫内膜癌的靶向治疗提供了积极的指导性作用，但其特异性还需进一步研究。

参考文献

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［4］SalveeenHB,StefaneeonI,KretzechmarEI,etal.SignificanceofPTENalterationsinendometrialcarcinoma:apopulation-basedstudyofmutations,promotermethylationandptenproteinexpreeeion[J].IntJOncol,2004,25(6):1615-1623.

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［6］KerbelRS．Tumorangiogenesis．NEnglJMed.2008,358(19)：2039-2049.

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［9］TopolovecZ,CorusicA,BabicD,etal.VascularendothelialgrowthfactorandintratumoralmicrovesseldensityasprognosticfactorsinendometrialCancer.CoilAntropol.2010.34(2);447-453.

［10］NARD0LG.Vascularendothelialgrowthfactorexpressionintheendometriumduringthemenstrualcycle，implantationwindowandearlypregnancy[R].CurrOpinObstetGynecol,2005,17(4);419-423.

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［13］AliIU.Gatekeeperforendometrium,ThePTENtumorsuppreeeorgene[J].JNat1CancerInst,2000,92(11),861-863.

［14］SalveeenHB,StefaneeonI,KretzechmarEI,etal.SignificanceofPTENalterationsinendometrialcarcinoma:apopulation-basedstudyofmutations,promotermethylationandptenproteinexpreeeion[J].IntJOncol,2004,25(6):1615-1623.