家族性鼻咽癌MTS1基因分子遗传学研究

家族性鼻咽癌MTS1基因分子遗传学研究

林玉宗

（福建省泉州市光前医院362321）

摘要：鼻咽癌是我国常见的恶性肿瘤之一，其相关性因素有：EB病毒感染，化学致癌因素，遗传因素，其中鳞状细胞癌比较常见，为此众多学者对其作出了广泛的研究和关注。虽然目前鼻咽癌的病因尚未知晓，但大多数学者认为其病因如同其他很多恶性肿瘤一样，鼻咽癌的发生、发展是各种致癌因素共同作用的结果，地域，生活习惯、职业、暴露致癌物质情况、发病年龄，癌基因与抑癌基因失控以及机体的免疫功能状况等因素[1]。这种病在早期鼻咽癌有多种症状。常见临床症状为鼻塞、涕中带血、耳闷堵感、听力下降、复视及头痛等，或回吸后咳出血痰。由于早期症状并不明显，所以这些症状被误认为是鼻炎或鼻窦炎，所以很容易被忽视。而我国的鼻咽癌发病率则是世界上最高的国家之一，西方基本上没有患者患有鼻咽癌。根据统计，世界上将近八成的鼻咽癌患者都是发生在中国的，南方的鼻咽癌发病几率要比比方比较高，主要在广东，广西，福建等地发生，浙江也属于鼻咽癌的高发地，鼻咽癌的发生几率其实和遗传环境还有生活习惯有着紧密的联系，鼻咽癌患者有三成左右都有家族的历史。其中华南地区、广东和香港等地属于高发地区，比其他国家高出100倍以上。目前还未查出鼻咽癌的发病机制，大多人认为是遗传、病毒感染和环境等因素导致的。有学者提出三次打击学说对鼻咽癌进行解释：某些家族性病例会携带种系突变，再加上EB病毒和环境因素的综合作用造成鼻咽癌的发生。而且鼻咽癌具有鲜明的家族聚集性特征，某个家族出现鼻咽癌病史，其他的家族成员患上鼻咽癌的几率比正常人要高出很多。我国的鼻咽癌高发区居民移居他国后，其发病率就会有所降低，但与当地居民相比还是略高一筹，这种情况充分说明鼻咽癌受到了遗传因素的影响。因此本文就鼻咽癌与MTS1基因分子的相关性进行了研究，现报道如下。

关键词：家族性鼻咽癌；MTS1基因分子；遗传学研究

引言

鼻咽癌是鼻咽部的一种恶性肿瘤，常发于我国的南方地区和东南亚地区，属于发病率较高的恶性肿瘤，那么为什么会出现这种情况呢？这也和地域，生活习惯、职业、暴露致癌物质情况、发病年龄等这些因素有重要关系，如、遗传易感性：鼻咽癌不属于遗传性疾病，但是从流行病学研究所发现的情况，又提示遗传背景在鼻咽癌的发病过程中起着十分重要的作用。主要对人类白细胞抗原，姐妹染色单体交检率，染色体脆性部位及畸变的研究。这是引发鼻咽癌的病因之一，其次广东人都喜欢吃腌制的食物，腌制的食品内含有致癌物质的，如：亚硝胺类：可诱发动物肿瘤，其中二甲基亚硝胺，二己基硝胺，在广州咸鱼中含量高，所以认为广东人鼻咽癌发病率高，这也是广东为何有那么多人患有鼻咽癌的主要原因。空气污染也是引发鼻炎的主要一个原因，广东人特别喜欢烧香，因此这也是主要的引发病因。在实验中可以发现，鼻咽癌的基因定位也是致癌的主要一个原因。这几点也是鼻烟癌主要的引发病因，如果在日常的生活中我们可以减少病因的存在，那么就可以与有效的减少鼻咽癌的发生几率。流行性病学研究发现，鼻咽癌不但具有地区差异性和易感性，还有家族聚集性，在我国的一些家族中已经先后出现了罹患鼻咽癌的现象[2]。家族性多发病例的发生率约为7%。其价值聚集的现象是遗传易感性和致癌性、免疫缺陷、种族差异以及宿主个体对环境致癌物的相互作用的结果。国内外已经有多个关于家族聚集性鼻咽癌的报道，其中广东叶氏家族和江苏陈氏家族的鼻咽癌案例较为典型，北方地区则比较罕见[3]。

1.研究对象

选取我院放疗科2006年-2015年收治的泉州洛江杜姓某家族中的5例鼻咽癌患者及其血缘亲属5例作为研究对象，患者家属记为对照组，发现有慢性炎症；鼻咽癌患者记为实验组。鼻咽癌患者均未接受过化疗和放疗，经病理检查确诊为磷状细胞癌。随后收集研究对象的鼻咽组织，按照常规的方式使用石蜡进行包埋，并整理好所有研究对象的随诊资料。其中男性6例，女性4例；年龄为32-70岁，平均年龄为（47.8±6.5）岁。所选对象及其家属均同意参与此次研究，并签署了知情同意书。

2.研究方法

使用UltraSensitiveS-P免疫组并结合微波抗原修复法检测研究对象的p16蛋白表达；使用地高辛标记的RNA原位杂交技术检测p16基因的RNA表达；使用聚合酶链反应和单链构象检测p16基因突变情况；使用多重聚合酶链反应检测p16基因纯合性缺失程度，并综合其家族p16基因的分子遗传学特征进行判断。

3.结果分析

（1）鼻咽癌P16蛋白表达结果10例对象中有5例的慢性炎症病变组织呈阳性，占50.0%；低分化磷状细胞癌患者中5例为颈部转移，p16蛋白阳性者2例，占40.0%；未转移者的阳性率为60.0%（3/5）。（2）原位杂交技术显示患者的p16RNA阳性率为33.33%（3/10），其中有2例对象的标本无阳性表达。（3）鼻咽癌p16聚合酶链反应单链构象分析显示没有出现1例基因突变现象。（4）多重聚合酶链反应分析发现有1例患者的p16E2纯合性缺失，占20.0%。所有患者都没有发现有人缺失p16E1。

4.结论

（1）慢性炎症组织与鼻咽癌组织中都含有p16蛋白表达，但是鼻咽癌组织的p16蛋白阳性率低于慢性炎症组织，染色强度也更低。同时，鼻咽癌颈部转移组织的p16基因表达低于鼻咽癌非转移组织，而且死亡病例中并没有检测出p16蛋白表达。这一结果表明在鼻咽癌组织中可能存在p16基因突变，与肿瘤恶性行为也存在很大的关联，由此可以推测p16对鼻咽癌的发生有很大的影响。（2）在原发性肿瘤组织中的p16基因丢失率明显低于细胞系，其原因在于原发性肿瘤组织不仅含有癌细胞，还有非恶性间质细胞，从而降低了PCR扩增的特异性与灵敏度，人们在研究时容易低估p16基因的丢失发生率[4]。此外，p16基因的高度甲基化也是导致基因不转录的一个因素。p16基因在鼻咽癌组织中的RNA阳性率为33.33%，其余患者都是不表达p16mRNA。这种情况一般发生在分化差或有淋巴肿瘤的患者身上，而p16mRNA与鼻咽癌的转移和分化的关系还需作进一步的研究。（3）研究发现鼻咽癌患者有p16E2纯合性缺失案例，无p16E1纯合性缺失，因为p16E2缺失是p16基因存活于鼻咽癌的一种方式，这样癌细胞就可以快速生长，患者的病情也会不断恶化。但是，因为选取的研究对象有限，所以无法证实除了p16E1以外是否还有其他外显子缺失或者其他基因失活方式，鼻咽癌家族中有人缺失p16E1的具体原因还需进行深度调查。（4）本次研究并未发现p16基因突变的情况，但是存在表达下调的案例，目前推测可能与p16基因异常甲基化有关。鼻咽癌家族患者的p16基因改变与散发性鼻咽癌患者的p16基因改变情况一致，而且都有p16E2缺失的迹象，这就可以证明家族性鼻咽癌患者与散发性鼻咽癌患者的p16基因异常情况一致，至于是否具有遗传可能性还需查找更多资料进行论证[5]。（5）根据鼻咽癌患者的p16蛋白、p16RNA表达和p16E2缺失结果得出，p16基因在鼻咽癌中的失活率较高，由此证明p16基因与鼻咽癌的发生存在一定的联系[6]。同时，本文研究结果显示，p16基因缺失并不是造成p16基因表达下调的主要因素，而p16E2缺失却是最常见的p16基因失活方式，在鼻咽癌疾病发展中具有重要作用。

参考文献

[1]夏云飞，钱建杨，张恩罴，主编.实用鼻咽癌放疗学[M].北京，北京医科大学出版社，2003年，3-37.

[2]汤敏中，蔡永林，郑裕明，等.人类白细胞抗原与鼻咽癌的相关性[J].遗传，2012，34（12）：1505-1507.

[3]黄莉，王若峥.HLA-B特异性抗原Bw4与新疆汉族鼻咽癌的相关性研究[J].新疆医科大学学报，2015，14（07）：835-838.

[4]胡云辉，刘凯，耿晓涛，等.HLA-B等位基因与新疆地区鼻咽癌相关性及其临床意义[J].中华放射肿瘤学杂志，2016，25（08）：799-801.

[5]陈婷，吴冉，王若峥，等.HLA-DRB1位点等位基因多态性与新疆汉族鼻咽癌的相关性研究[J].新疆医科大学学报，2013，36（07）：902-904.

[6]孙革，喻琼，甄建新，等.南方汉族人群HLA-DPA1和-DPB1基因多态性与鼻咽癌的关联研究[J].国际输血及血液学杂志，2013，36（03）：225-228.