402例乙肝患者HBV-DNA和HBV-M同步检测结果分析

402例乙肝患者HBV-DNA和HBV-M同步检测结果分析

贾爱红司书梅申雪粉

（1河北省邯郸市传染病医院检验科河北邯郸056002）

（2河北省邯郸市传染病医院传染产科河北邯郸056002）

【摘要】目的：乙肝患者血清HBV-M与HBV-DNA联合检测临床应用价值。方法：对402例乙肝患者血清标本采用免疫化学发光分析法和实时荧光定量PCR技术分别进行HBV-M和HBV-DNA定量测定，以HBV-M血清学模式进行分组分析，探讨两者的关系特点。结果：HBV血清学常见模式6种和少见模式5种。乙肝大三阳患者血清标本HBV-DNA阳性率为55.9%，病毒载量中、高拷贝复制；乙肝小三阳患者血清标本HBV-DNA阳性率为19.48%，病毒载量中、低拷贝复制；第8组阳性率为61.0%，病毒载量以中、低拷贝复制。结论：HBV-DNA定量检测在各种HBV-M血清学模式具有差异，为临床诊断、治疗提供了重要依据。

【关键词】乙肝；HBV-M；免疫化学发光法；HBV-DNA；实时荧光定量PCR

【中图分类号】R446【文献标识码】A【文章编号】1007-8231（2016）24-0233-01

乙型肝炎病毒（HBV）属于嗜肝DNA病毒科，是乙型病毒性肝炎患者的病原体。我国人群中HBV携带率约为10%，约有1.2亿人携带HBV[1]。HBV感染可表现为重症肝炎、急性肝炎、慢性肝炎或无症状携带者，部分慢性肝炎可演变成肝硬化或肝癌。HBV-M为乙肝病毒感染的血清学标志物。HBV-DNA是反应HBV复制最可靠指标。对两者同步检测结果统计分析，期望能为临床提供有效依据。

1.对象与方法

1.1对象

2013年邯郸市第六医院就诊的402例乙肝患者。

1.2方法

1.2.1标本采集：患者静脉血5毫升，促凝管采集，取血清检测。

1.2.2仪器与试剂：化学发光仪，SLAN-PCR扩增仪，HBV-M试剂，HBV-DNA荧光定量PCR试剂。

1.2.3HBV-M血清学标志物检测：化学发光法。

1.2.4HBV-DNA定量检测：实时荧光PCR技术，HBV-DNA＞500copies/mL判断为阳性。

2.结果

根据乙肝HBV-M血清学模式类型，将402例HBV血清学结果分为常见模式和少见模式（见表），前者88.81%，后者11.19%。HBV血清学常见模式6种，大三阳占40%，PCR阳性率为55.9%；小三阳占38%，PCR阳性率为19.48%；4、5、6组所占比例较少，PCR为阴性。HBV血清学少见模式5种，8组占10.2%，PCR阳性率为61.0%；7、9、11组各有1例，9、11组PCR为阳性；7、10组PCR为阴性。

注：“-”表示无数据。

3.讨论

HBV-M是临床上乙肝病原学诊断标准。本方法是继ELISA法检测后新一代测定技术。HBV-M检测常用指标包括：HBsAg、HBsAb、HBeAg、HbeAb和HbcAb。HbsAg为病毒外膜蛋白的重要组成成分，为HBV感染的主要血清学检测指标。在感染早期就会出现在血液中，并会持续数月或终生，判断患者是否感染乙肝病毒的依据。荧光定量PCR检测HBV-DNA是临床基因诊断的有效手段。

周丽敏[2]文献报道乙肝标志物共24种模式。本研究共搜集11种模式，在大三阳与小三阳模式中，HBV-DNA阳性率分别为55.9%和19.9%，病毒含量具有差异。与张海业[1]数据相比，大三阳组HBV-DNA阳性率较低，可能是（1）患者经用药治疗后，HBV-DNA较HBeAg易于转阴；（2）与病毒发生变异有关；（3）HBV-DNA呈低水平复制受HBV-DNAPCR试剂检测下限低灵敏度局限。大三阳组病毒载量以高、中浓度拷贝复制，提示病毒在体内复制活跃，传染性强，E抗原的存在与HBV病毒量存在正相关性；小三阳病毒载量以中、低浓度拷贝复制，提示病毒未停止复制，只是复制缓解或部分患者出现病毒基因变异。本研究中1，5模式仅有1例，其HBV-DNA为阳性，该模式见于抗原抗体低浓度转化，或病毒亚型感染所致。乙肝大三阳组与小三阳组HBV-DNA对比结果说明，HbeAg与乙肝病毒载量复制紧密相关。

罕见模式中，第8组占总入组数的10.20%，其HBV-DNA阳性率61.0%，说明HbeAg/抗Hbe血清转换期，病毒并未完全停止复制或病毒基因变异。9和10各有一例，HBV-DNA均为阳性。相关研究表明HbsAb作为保护性抗体只有达到一定水平才能达到中和病毒、发挥保护作用的水平[3]。HBV-M与HBV-DNA无明显相关性。

综上所述，虽然HBV-M化学发光检测虽有高灵敏度、强特异性、宽线性范围等特点，但不能100%反应病毒复制情况，而HBV-DNA的定量检测能准确、灵敏地反映体内是否存在HBV病毒及其动态增殖水平。因此，两者定量联合检测可以了解乙型肝炎患者体内HBV感染、复制等情况，为乙肝病毒的治疗方案选择、疗效观察、预后判断、变异检测等提供非常有价值的依据。此外，关注HBV-M罕见模式与HBV-DNA联合检测，为以后乙肝病毒致病机理的研究具有重要意义

【参考文献】

[1]张海业，孙朔萌，韦兰.乙肝血清标志物模式与HBV-DNA含量的关系探讨[J].临床检验，2011，17（10）:1229-1232.

[2]周丽敏.乙肝病毒标志物2431例检测模式汇总及分析[J].临床和实验医学杂志，2012，11(1):65-67.

[3]李甲芬，张静，马希祥.156份血标本乙肝五项指标定量与定性检测结果分析[J].山东医药，2010，50（51）:79-80.