胃癌中促红细胞生成素蛋白的表达及临床病理意义的研究

胃癌中促红细胞生成素蛋白的表达及临床病理意义的研究

董永胜李玉栋

董永胜李玉栋（内蒙古北方重工集团有限公司医院内蒙古包头014030）

【中图分类号】R735.2【文献标识码】A【文章编号】1672-5085（2012）41-0105-02

【摘要】目的通过检测胃癌及正常胃组织中促红细胞生成素（EPO）蛋白的表达，分析其表达的相关性，并探讨其临床意义。方法应用免疫组化sp法检测117例胃癌及20例正常胃粘膜组织中EPO蛋白的表达，用统计学方法分析其与各临床病理因素的关系。结果117例胃癌组织中有88例（75.2％）EPO蛋白阳性表达；正常胃粘膜组织中均未见EPO蛋白的表达；EPO的表达在临床分期及淋巴结转移中有差统计学意义（P<0.05）。结论胃癌中存在EPO蛋白的过表达，使肿瘤细胞适应缺氧环境，从而促进肿瘤的侵袭与转移。

【关键词】胃癌促红细胞生成素免疫组化

红细胞生成素（EPO）是由成人肾脏间质及胎儿肝脏生成，主要刺激骨髓造血，促进红细胞生成、增加红细胞容量的主要激素。恶性肿瘤生长代谢旺盛，导致局部缺氧和坏死是实体肿瘤内部的一种常见特征,缺氧条件诱导缺氧诱导因子（HIF-lα）的水平升高，HIF-1的过表达诱导许多与肿瘤缺氧有关的基因的表达，EPO是其效应分子之一，因而表达升高[1]。

本研究应用免疫组化的方法检测EPO在胃癌组织中的表达情况，并分析其与临床病理因素的关系，旨在为临床治疗胃癌及判断预后提供帮助。

1材料和方法

1.1研究对象本实验收集包头医学院第三附属医院病理科2002年1月至2007年5月间经病理证实为胃癌并行手术切除的标本组织117例作为研究对象，用距癌组织至少5cm以上的远端切缘20例作为对照，均有完整的临床病理资料及术后随访资料。其中男性79例，女性38例，年龄38-76岁，平均年龄55.1岁，其中<55岁者56例，≥55岁者61例；肿瘤直径<5厘米者72例，≥5厘米45例；按组织学类型分为乳头状腺癌5例，管状腺癌76例，粘液腺癌20例，印戒细胞癌l2例，小分化癌4例；按照组织学分级分为高-中分化66例及低-未分化51例；根据肿瘤浸润深度分为粘膜肌内12例、浆膜内73例及超出浆膜32例；淋巴结有转移者66例，淋巴结无转移者51例。按照美国癌症联合会(AJCC)TNM分期标准：I-II期41例，Ⅲ-Ⅳ期76例。所有病例手术前均未接受过放疗、化疗或免疫治疗。

1.2研究方法标本的采集和石蜡切片的制备：从医院病理科档案材料中选取具有完整资料的各型胃癌组织、正常胃粘膜组织切片及对应蜡块，分类后，复核切片选取形态典型蜡块进行切片并用sp法做免疫组化染色。免疫组化检测试剂盒均购于福州迈新生物制品公司。严格按照试剂盒说明书进行操作。以磷酸盐缓冲液(PBS)代替一抗作阴性对照，用试剂公司提供阳性切片作阳性对照。光学显微镜下观察组织切片的显色反应。

1.3结果判定EPO主要表达于胃癌细胞胞浆，阳性显色为棕色或棕黄色颗粒。其表达强度结果由染色细胞数评判，随机观察高倍镜(X400倍)下5个视野的表达情况，取平均值，按照阳性肿瘤细胞数占总的细胞数的百分比分成两组：(－)标准为<10％肿瘤细胞呈阳性，(+)标准为≥10％的细胞呈阳性。

1.4统计学处理应用SPSSl3.0统计软件对数据进行统计学处理。两样本率的比较采用四格表资料的x2检验或x2连续性校正检验(n≥40且1≤T<5)、Fisher精确概率法(n≤40或T<1)；多样本率的比较采用行x列表资料的x2检验；参数间的相关性采Spearman等级相关分析；P＜0.05为有统计学意义。

2结果

2.1胃癌中EPO的表达胃癌组织中EPO的阳性表达率为75.2％（88/117），正常胃粘膜上皮中未见EPO的表达，两者比较差异有统计学意义（P<0.01）。

2.2EPO表达与胃癌的临床病理参数的关系EPO的表达在不同患者年龄、性别、肿瘤组织学类型、肿瘤大小及分化程度等指标中无差异（P>0.05），而在浸润深度、临床分期及淋巴结转移中有差异性（P<0.05）。

3讨论

红细胞生成素（EPO）是由成人肾脏间质及胎儿肝脏生成，主要刺激骨髓造血，促进红细胞生成、增加红细胞容量的主要激素。HIF-1诱导EPO表达增加可促进红细胞生成，增加血液氧的运输，减轻肿瘤组织缺氧，增强肿瘤细胞的适应性。EPO基因中存在着缺氧反应元件，其中有两个HIF-1α的结合位点[2]。本研究显示，正常胃组织中未见EPO的表达，而在胃癌组织中EPO过表达，EPO的表达与肿瘤的临床分期、肿瘤浸润深度及淋巴结转移关系密切。

就本实验中EPO蛋白的表达与临床病理因素的研究显示，EPO的表达仅与临床分期、浸润深度及有无淋巴结转移有关。这一结果与其他研究者的结果既有相同之处，也存在不同之处。

本试验中EPO与患者的性别和年龄之间不存在相关性，与江晨等报道相同。

本试验结果显示EPO与病理组织类型无关。这一结果也江晨等[7]大多数研究结果相同。综合这些结果可推测无论何种组织学类型的肿瘤，随着体积的增大都可能会出现缺氧，机体对缺氧最直接的反应就是通过激活HIF-1α促进大量新生血管形成，来增加局部血供，从而保证肿瘤细胞的代谢，进而启动了EPO的表达。

综上所述，EPO可促进红细胞生成，增加血液氧的运输，减轻肿瘤组织缺氧。胃癌组织中EPO的阳性表达，可作为判断肿瘤具有高度侵袭转移潜能和预后不良的重要指标，结合临床病理特征，有助于找出术后高危患者，制订个体化治疗策略，有利于提高临床治疗效果。

参考文献

[1]宋华，孙颖洁，许传亮，等.膀胱移形细胞癌中促红细胞生成素及其受体的表达[J].临床与实验病理学杂志，2007，23（4）：456.

[2]王芳，师永红.缺氧诱导因子1α在肿瘤侵袭中的作用[J].中华病理学杂志，2008,37（12）：838.

[3]江晨，于建宪，卫红军，等.利用组织芯片技术研究促红细胞生成素在胃癌组织中的表达及其意义[J].中华病理学杂志，2006（35）：559-560.