T7肽通过下调 COX-2表达抑制肿瘤生长的实验研究

T7肽通过下调 COX-2表达抑制肿瘤生长的实验研究

1 杜芳芳 2 隋文文 1 闫建伟 [ 通讯作者 ]

1 济南市第二人民医院 山东济南 250001

2东营市东营区人民医院 山东东营 257000

【摘要】目的：探讨Tumstatin中具有抗血管生成活性的T7肽片段可能的调控靶蛋白，进一步研究T7肽抗肿瘤血管生成的机制。方法：1．建立HepG₂肝癌裸鼠移植瘤模型，随机分为对照组，T7肽低剂量(2.2mg/kg/d)组，T7肽高剂量组(4.4mg/kg/d)组，5-FU(20 mg/kg)组，每组10只。连续干预21天,观察T7肽对肿瘤生长的抑制作用。2.采用免疫组织化学法检测各组肿瘤组织COX-2蛋白水平表达。结果：5-FU组，T7肽高、低剂量组与对照组肿瘤重量比较差异有统计学意义（P<0.05）。三个给药组IR分别为63.6%、50.6%、28.6%。T7肽高、低剂量组中COX-2蛋白表达降低（P<0.01）。结论：T7肽可抑制HepG₂肝癌组织中COX-2的表达，抑制肝癌的生长，降低肿瘤重量和体积。

【关键词】T7肽；COX-2；血管生成

研究表明，环氧化酶2（cyclooxygenase, COX）是花生四烯酸代谢途径中的关键限速酶。COX-2在大多数细胞中并不存在。但在肿瘤细胞中常常表达^[1-2]。前期研究证实，COX-2在肝癌、胰腺癌、胃癌、结肠癌、乳腺癌、前列腺癌等多种肿瘤组织中均呈高表达^[3-4]。研究提示，COX-2在肝癌的发生和发展中起重要作用。并且，在肝癌中COX-2基因表达明显上调，超过正常肝组织及肝炎组织^[5-6]。其致癌机制与降低抗肿瘤免疫反应、诱导肿瘤血管生成、抑制肿瘤细胞的凋亡有关^[7]。本研究建立人肝癌细胞HepG₂肝癌裸鼠移植瘤模型，探讨肿瘤抑素T7肽抑制肿瘤生长的作用机制。

1方法

1.1细胞培养

HepG₂肝癌细胞置于DMEM高糖基础培养液中，并添加10％胎牛血清(FBS)、1％青、链霉素混合液(100U/ml的青霉素、100mg/ml的链霉素)。常氧条件下将细胞于37℃、5％CO₂的培养箱内培养。

1.2统计学方法

采用SPSS 17.0软件，所有计量数据均以`x±s表示。组间数据比较采用One-way ANOVA两两比较法，P <0.05为差异有统计学意义。

2结果

2.1对肿瘤生长的影响

T7肽高、低剂量组与对照组肿瘤重量比较差异有统计学意义（P<0.05）。与对照组比较，三个给药组肿瘤体积缩小（P<0.01），IR分别为63.6%、50.6%、28.6%。

2.2 T7肽对肿瘤组织中COX-2蛋白表达的影响

T7肽高、低剂量组能显著降低肝癌组织中COX-2的表达，抑制肿瘤生长。

3讨论

肿瘤抑素(Tumstatin)在研究肺-肾出血综合征时被发现^[8-9]，它对人体正常细胞的损害微乎其微，但对肿瘤细胞具有明显抑制作用。其通过靠位于N端的2l肽和位于C端的19肽发挥双重抗肿瘤效果^[10]。本研究利用免疫组织化学法检测肿瘤组织中COX-2的表达，结果表明与对照组比较，T7肽高、低剂量组能显著降低肝癌组织中COX-2的表达，抑制了肿瘤生长。这可能是T7肽抑制肿瘤生长的作用机制。这为临床抗肿瘤药物开发提供了新思路。

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