使用四代 HIV 抗原抗体试剂筛查联合蛋白印迹或核酸补充实验的检测对降低漏诊率的价值分析

使用四代 HIV 抗原抗体试剂筛查联合蛋白印迹或核酸补充实验的检测对降低漏诊率的价值分析

关红焱 1 辛勤 2

北京市西城区疾病预防控制中心 北京 100121

2.航天中心医院 北京 100049

【摘要】：目的：探索使用四代HIV抗原抗体试剂筛查联合蛋白印迹或核酸补充实验的检测对降低漏诊率的价值。方法：本次研究对象为120份艾滋病筛查实验室送检标本，均进行四代HIV抗原抗体检测，随后再运用蛋白印迹和核酸检测法进行补充实验，分析各项检测 的符合率。结果：120例检测标本中，蛋白印迹实验HIV抗体阳性率为66.67%，蛋白印迹试验联合核酸检测HIV阳性率为78.33%；在88例三代阳性+四代阳性标本中，蛋白印迹试验HIV阳性率为90.91%，蛋白印迹试验联合核酸检测97.73%。结论：面对四代HIV抗原抗体检测有反应的标本时，单方面运用蛋白印迹进行补充实验检测仍存在漏检问题，因此需联合HIV核酸实验，从而提高准确率。

【关键词】：四代HIV抗原抗体；蛋白印迹；核酸；检测；漏诊率

四代HIV（艾滋病病毒）抗原抗体能够有效缩短艾滋病检测的窗口期，敏感性较高，且能够同时对P24抗原和HIV抗体进行检测，近年来开始广泛推广于临床。蛋白印迹试验无法对P24抗原进行检测，能够为抗体检测提供依据，若病变为P24抗原产生的炎性反应，蛋白印迹试验无法确证，从而导致漏诊。随着近年来，医疗技术的完善和进步，核酸检测开始广泛推广于临床，第四代HIV抗原抗体检测能够作为初筛手段方案，但在补充实验过程中，运用核酸联合蛋白印迹实验，能够真正实现对HIV感染的早期确诊^[1]。而本文进一步探索HIV核酸、蛋白印迹、四代HIV抗原抗体联合检测的优势，如下文报道。

1 资料和方法

1.1 资料

将120份艾滋病筛查实验室送检标本为试验对象，此次试验均在2016年2月10日至2020年2月19日期间完成。本次的送检标本经过雅培化学发光试剂筛查为有反应性。

1.2 方法

检测方法：本次使用的第四代HIV检测试剂为雅培公司提供的Rchitect HIVAg/Ab COMBO，复检时使用北京万泰胶体硒试剂、杭州艾博乳胶法试剂、英科新创和北京万泰三代酶联免疫吸附试验，确证试剂由MP公司提供的HIV BLOT2.2；HIV-1 2.0试剂由梅里埃公司提供NUCLISENS EASYQ ，用于检测病毒核酸；NU-CLISEMS EASYQ 病毒载量仪、TECAN PROFIBLOT 48全自动蛋白印迹仪、雅培公司提供Architect I2000SR化学发光仪，本次运用的所有试剂均进行校准检测，均在合理范围。

三代抗体试剂检测和四代抗体检测结果均为阳性，标记为三代阳性+四代阳性，并随后进行蛋白印迹确证实验，对于阴性标本或不确定样本，需实施核酸检测。若三代抗体检测为阴性，四代抗原抗体联合检测结果为阳性者，需标记为三代阴性+四代阳性，并进行核酸检测和蛋白印迹检测，本次所有方法均按照说明书进行。HIV感染判定^[2]：VL（病毒载量）＞5000拷贝/mL；未感染HIV判定：未检测出病毒载量。

1.3 观察指标

分析HIV检测情况。

分析三代阳性+四代阳性的核酸和蛋白印迹检测结果。

2 结果

2.1 HIV检测情况

120例检测标本中，35（26.67%）例女性，85例（70.83%）男性。随后进行蛋白印迹实验复检，80例（66.67%）HIV-1抗体阳性，12例（10.00%）（HIV抗体不确定）抗体不确定，28例（23.33%）HIV抗体阴性。而28例经蛋白印迹试验为阴性标本中，进行核酸检测，4例阳性，24例阴性。12例不确定抗体中，经核酸实验，2例阴性，10例阳性。蛋白印迹试验联合核酸检测阳性率高于蛋白印迹试验（P＜0.05）。如表1所示：

表1：对比各项检测方式符合率

2.2 三代阳性+四代阳性的核酸和蛋白印迹检测结果

88例三代阳性+四代阳性标本，蛋白印迹实验复检（蛋白印迹作为补充实验），80例（90.91%）HIV-1抗体阳性，7例（7.95%）HIV抗体不确定，1例（1.14%）HIV抗体阴性。蛋白印迹试验联合核酸检测97.73%（86/88）。7例不确定抗体中，主要包括p24gp160（所占比71.43%）、gp160（所占比14.28%）、p24（所占比14.28%），随后进行核酸检测，1例P24单带样本无核酸检测值，其余6例有检测值，最高为2.2×10

⁶拷贝/mL，最低为6400拷贝/mL。

3 讨论

目前临床上在检测艾滋病病毒时，常用方法包括病毒核酸检测，抗原检测、抗体检测，虽然均可提供一定参考依据，但不同检测方式特异性和敏感性均存在差异性，为了以最低检测成本达到最优检测效果，临床常运用组合检测法。目前第四代抗原抗体检测有助于实现HIV感染早期发现，促使艾滋病窗口期缩短，但相比于单独检测抗体或抗原，增加了潜在特异性风险，影响整体检测效果，因此常用于初筛，后期通过联合复检，更能够确定病变^[3]。以四代阳性和三代阳性样本为标准，蛋白印迹检测阳性符合率高达90.91%，由此说明，蛋白印迹检测能够有效检测出HIV抗体，对三代阳性和四代阳性标本确证价值较高，但在不确定样本中，经过核酸再次复检仍存在阳性标本，由此说明，单方面运用蛋白印迹检测仍存在漏诊率，因此需广泛推广联合检测模式。此外还需注意两个问题，（1）核酸检测成本较高，对于四代实验假阳性标本，需考虑临床病史、年龄、S/CO值，进行排除，从而降低检测成本；（2）三代抗体试剂进行复检时，为了防止样本在筛查环节延迟发现或漏检，还需选择敏感性较高的检测试剂。

总而言之，在面对蛋白印迹不确定的四代和三代阳性标本，需再次进行核酸检测，从而实现早期诊断感染标本，便于患者得到有效治疗。

参考文献：

[1]陈明娟,罗晓英.平湖市2015-2018年HIV-1/2抗体筛查有反应性样本的蛋白印迹试验结果分析[J].中国艾滋病性病,2019,25(6):562-564.

[2]杜文静,徐婷,赵欣.61例HIV抗体筛查呈反应性蛋白印迹试验阴性样本核酸检测结果分析[J].中国艾滋病性病,2017,23(6):567-568.

[3]于玲,于莉.HIV抗原抗体筛查结合核酸定量补充检测的应用[J].中国卫生标准管理,2019,10(16):111-113.