50例外周血造血干细胞采集效果分析

50例外周血造血干细胞采集效果分析

苗莹莹 张根玲 滕本秀

陆军军医大学第二附属医院输血科 重庆 400037

【摘要】目的 探讨COM. TEC与 CoBE Spectra 血细胞分离机采集外周血造血干细胞效果，保障临床移植要求提高移植成功率。 方法 对本院50名使用血细胞分离机进行外周血干细胞采集的异体造血干细胞移植健康供者采集效果入组进行研究，其中COM. TEC血细胞分离机采集25例，共循环27次，CoBE Spectra血细胞分离机采集25例,共循环28次，重复采集者前后使用同一台机器。比较两组产品中白细胞总数、单个核细胞比例、RBC、Hct、 Plt以及MNC细胞数、CD34+ 细胞数和产品体积。结果 两种机器的产品中白细胞总数、 RBC、Hct和产品的体积有统计学差异；而Plt、单个核细胞比例、产品MNC细胞数和CD34+ 细胞数无统计学差异。 结论 两种血细胞分离机均能采集有效的MNC细胞数和CD34+ 细胞数，满足临床移植需求，但是CoBE Spectra 血细胞分离机采集的产品中RBC的污染率更低，特别适用于主要ABO血型不合的外周血造血干细胞采集者；而COM. TEC血细胞分离机采集的产品体积小，适用于干细胞需要超低温冷冻保存的自体外周血造血干细胞采集者。

【关键词】外周血造血干细胞；血细胞分离机；采集效果

近年来，因外周血造血干细胞采集时不需要麻醉，痛苦小，操作简单，安全性高，移植后造血功能与免疫功能恢复快^[2]，从而促使外周血造血干细胞移植技术迅速发展并广泛应用于临床^[1]，目前已成为治疗血液病和实体瘤的有效方法。如何使用血细胞分离机采集到足够数量的外周血造血干细胞^[3]，同时最大限度的控制被采集者红细胞和血小板等其他血液成分的损失^[4，5]，既能满足干细胞采集的成功，同时又能保证被采集者的安全^[6]，具有重要的临床研究意义。本文对COM. TEC与 CoBE Spectra两种主流使用的血细胞分离机采集外周血造血干细胞的效果进行比较，以期为临床采集工作及干细胞移植提供参考。

1. 材料与方法

   1. 采集对象

50例均为本院2016年造血干细胞移植健康供者，其中男性31例，女性19例，中位年龄34.98±14.61岁（年龄范围12～62岁），所有健康供者采集前均签署知情同意书。

1. 2. 仪器设备与试剂

COM. TEC血细胞分离机（德国费森尤斯公司）和CoBE Spectra血细胞分离机（日本泰尔茂公司），均使用相应的配套管路。抗凝剂ACD-A(四川南格尔公司)

1. 3. 供者动员

移植前做ABO血型鉴定和供受者HLA配型。健康供者每日皮下注射重组人类粒细胞集落刺激因子，一般在外周血造血干细胞增长高峰的第4-5天开始采集。

1. 4. 采集方法

COM. TEC血细胞分离机选择Auto MNC采集程序，输入供者性别、身高、体重、外周血HCT、MNC等数据，程序将根据输入资料自动设置相关参数，也可以根据具体情况手动调整，每次循环血量8000-12000 mL,全血流速50-60 mL/min,采集前用0.9％生理盐水和抗凝剂预注管路，排出管道内气体同时检测机器所有蠕动泵、阀门和传感器是否正常工作。CoBE Spectra 血细胞分离机用WBC程序选择MNC程序，采集前输入供者的性别、身高、体重和外周血HCT，估算出供者的TBV,按照机器已设置参数操作运行，当系统形成红细胞/血浆界面后，手动调节血浆泵的流速使界面控制在一个恒定的位置，通过白细胞采集管从通路中吸收单个核细胞^[7]。依据比色卡颜色与采集管路进行比较，动态监测调整血浆泵流速来获得MNC量。全部供者采用16G针头做双肘静脉穿刺，采集过程中用5％葡萄糖500 mL加40 mL葡萄糖酸钙缓慢静滴预防枸橼酸盐中毒。

1. 5. 统计学处理

利用GraphPad PRISM 统计分析软件分析数据。

2. 结果

50名异体造血干细胞移植健康供者纳入研究，其中 COM. TEC和 CoBE Spectra 血细胞分离机分别采集25例。两组健康供者采集前血常规结果分析比较，采前WBC、RBC、PLT均无统计学意义（P＞0.05）（见表1）。两组采集产品相比较，COM. TEC 血细胞分离机采集产品中 RBC含量和红细胞压积（HCT）高于CoBE Spectra产品，具有统计学意义（P<0.05）。两组产品采集体积相比较，COM.TEC血细胞分离机采集产品体积小于CoBE Spectra产品，具极显著统计学差异（P<0.001）（见图1）。

表1：两种血细胞分离机采集前相关指标比较

*,P<0.05；***,P<0.001

图1. COM. TEC与 CoBE Spectra 血细胞分离机采集外周血造血干细胞效果比较。

3. 讨论

目前，造血干细胞移植技术的应用已经成血液病^[8，9]和实体瘤的主要治疗方法。通过血细胞分离机获得足够数量的造血干细胞是确保移植成功的先决条件和重要因素之一^[10]。本次比较了两种血细胞分离机的采集产品，结果显示两种机型采集的MNC细胞数、CD34+细胞数无统计学差异，采集的产品数量均能满足临床的需求；有研究认为CS-3000plus和COM.TEC两种机型采集MNC细胞数、CD34+细胞数亦无统计学意义^[5]。我们的研究显示，比较两种机器采集产品中RBC含量，提示COM. TEC血细胞分离机采集的产品中RBC的污染率高于CoBE Spectra 血细胞分离机；比较两种机型采集产品体积，结果提示：COM. TEC血细胞分离机采集的产品体积比CoBE Spectra血细胞分离机小（该组25例供者选用的是CoBE Spectra 血细胞分离机半自动采集程序（WBC程序的MNC程序）。

供者的红细胞污染率高，可能引起主要ABO血型不合的干细胞移植病例严重的急性溶血反应及延缓造血重建。据此本研究认为，对于主要ABO血型不合的供者建议使用CoBE Spectra 血细胞分离机；而采集产品体积小对于干细胞需要超低温冷冻保存的自体外周血造血干细胞采集者有明显优势，建议该类患者使用COM. TEC血细胞分离机，以减少容量体积，便于保存。

综上，在保证外周血造血干细胞采集数量质量的前提下，根据临床需求选择不同型号的血细胞分离机，将更好的保障临床造血干细胞移植的成功。

参考文献

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[2] 钱震，钱军，张永宁，等.造血干细胞移植治疗恶性血液病13例疗效观察。医学理论与实践，2014（15）：1964-1965

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[9] 郭晓，侯兰芬，宋丹，等.外周血造血干细胞移植治疗恶性血液病临床研究。河北医科大学学报，2010,31（1）：16-20

[10] 王蔚，黄晓军，王菊玲，等.两种血细胞分离机分离外周血造血干细胞效果比较。中国输血杂志，2005；18（01）：17-19