药品检验中高效液相色谱技术的应用进展

药品检验中高效液相色谱技术的应用进展

林川

宁德市食品药品检验检测中心

摘要：作为一种新型色谱方法，高效液相色谱技术已成为药品检验的首选技术之一，被大量应用于药品检验领域。文章从高效液相色谱的研究进展入手，对药品检验中高效液相色谱的应用进行了综合论述，希望为药品检验领域高效液相色谱技术的有效应用提供新的思路。

关键词：药品检验；高效液相色谱技术；高效液相色谱－质谱法

前言：经过近50年的发展，液相色谱技术在诸多领域得到了广泛的应用。高效液相色谱技术作为现代重要检验手段在药品检验领域也发挥着日趋显著的功效。随着我国药品检验品种的增加以及药品检验标准的完善，作为药品检验主要用手段的高效液相色谱技术也得到了进一步发展。因此，从药品检验视角入手，探究高效液相色谱技术的应用进展非常必要。

1. 高效液相色谱技术的研究进展

高效液相色谱技术首次提出于1903年，提出者为俄国植物化学家茨维特，用于记录、描述彩色试验。近30年后，纸色谱、离子交换色谱、薄层色谱开始出现，为氨基酸分析仪、高压泵的应用奠定了基础。二十世纪六十年代中后期，液相色谱随着气相色谱理论的实践以及机械、电子技术的发展而不断完善，高效液相色谱技术开始正式出现。二十世纪七十年代中期，微处理器技术在液相色谱中的应用，促使仪器自动化水平、分析精度进一步提升，为高效液相色谱技术的广泛应用奠定了基础。

2. 药品检验中高效液相色谱技术的应用内容进展

1. 含量检测

在药品有效成分含量检测中应用高效液相色谱法，不仅具有操作便捷、方便简单、节省时间、节省体力的特点，而且可以获得可靠准确、高度专属、高度温度、重复性佳、适用范围广、回收率高的结果。比如，马文学就在阿司匹林检验中应用了高效液相色谱法（安捷伦液相色谱仪），得出，阿司匹林肠溶片峰值出现时间为1.964min，阿司匹林浓度在0.01~0.05mg/mL之间线性范围良好，重复性测定结果RSD为0.68%，平均回收率为101.80%^[1]。

2. 杂质检测

药品杂质始终是困扰全球药物生产的一大难题，不仅威胁着药品安全，而且对药品贸易造成了较大干扰。在我国，药品杂质也对药品出口造成了限制，而建立灵敏、准确、适用谱广的方法，可以把控药物杂质关卡，为药物生产安全提供支持。如可以利用柱前衍生化高效液相色谱法测定抗癌药物原料4-氯-3-（三氯甲基）苯异氰酸酯中的杂质CTF-脲{1,3-双[4-氯-3-（三氟甲基）苯基]脲}等。

3. 成分分析

成分分析是药品检验的重要组成部分，也是高效液相色谱在药品检验中的主要应用。在药品成分分析中应用高效液相色谱主要是在梯度洗脱的情况下，根据检测器中成分峰值出现时间，确定成分类型。如焦媛媛,田广林就以头风痛丸为对象，利用Water是 Symmetryshield C18柱，在甲醇-0.1%冰醋酸溶液作为流动性梯度洗脱的基础上，检测出了头风痛丸中洋川芎内酯I、瑟丹酸内酯、洋川芎内酯H、瑟丹酸内酯、异欧前胡素等几种成分以及其线性范围^[2]。

3. 药品检验中高效液相色谱技术的应用方法进展

1. 高效液相色谱-示差折光检测器法

示差折光检测器是一种通用型检测器，在甘油三酯、聚合物、高分子化合物等物质测定方面表现优良，而酯类、糖类是药品常用辅料，通过高效液相色谱与示差折光检测器联用，可以加快测定对象峰值出现速度、提高杂质峰与有效含量峰分离效果，并获得准确的结果。

2. 高效液相色谱-质谱法

由于高效液相色谱技术兼具高通量、快速、高灵敏度特征，与质谱联合应用时摒除了分流模块，在实际应用中经常与质谱分析技术联合应用，可以减弱离子源位置相互竞争化合物之间的离子抑制效用，提高代谢产物的离子化率。如郑慷,寻知庆,何霜等就在测定肌肉组织中噻嗪类利尿剂时利用了高效液相色谱-串联质谱法，得出在1~50μg/L范围内氢氯噻嗪、氯噻嗪、苄氟噻嗪、环戊噻嗪等噻嗪类利尿剂线性关系良好，且加标回收率在82.1~97.2%之间，相对标准偏差在3.8~9.0%之间^[3]。

3. 高效液相色谱-紫外检测器法

紫外检测器主要用于检测吸收波长一定且波长下响应值、浓度正相关的物质，醇类、酚类、酯类等药品均具有紫外吸收性质，为高效液相色谱与紫外检测器的联合应用提供了广泛空间。王雅连,魏理就利用高效液相色谱-紫外检测器法对替考拉宁浓度进行了检测，得出替考拉宁浓度在3.32106.30μg·m L-1范围内与替考拉宁峰面积线性关系良好，整个操作灵敏度较高，结果准确性较高，测定效果较佳^[4]。

总结：

综上所述，高效液相色谱技术主要出现于二十世纪六十年代，经过近半个世纪的发展，在检验领域特别是药品检验领域得到了广泛的应用。当前在药品检验领域，高效液相色谱技术主要用于含量检测、成分分析等，具有重复性佳、操作便捷、结果准确等优良特点。同时根据特殊检测需求，还可以将高效液相色谱与质谱、紫外线联用，获得更加精准、高效的检测结果。

参考文献：

1. 马文学.高效液相色谱法在阿司匹林检验中的应用及对不确定度标准的估算[J].中国标准化,2021(06):161-163.

2. 焦媛媛,田广林.头风痛丸中8种成分的HPLC法测定及其化学计量学综合评价[J].现代药物与临床,2021(09):1807-1811.

3. 郑慷,寻知庆,何霜,汪晨霞,郭燕华,吴楚森,黄金凤,郭新东.高效液相色谱-串联质谱法同时测定肌肉组织中6种噻嗪类利尿剂[J].肉类研究,2021(09):38-42.

4. 王雅连,魏理,黄珊珊,谢慧,喻鹏久.HPLC-UV法测定人血浆中替考拉宁的浓度[J].今日药学,2018(07):450-452.