甘肃医学院 甘肃平凉 744099
摘要:目的:研究铁皮石斛枸杞西洋参配伍对小鼠免疫调节的影响。方法:按照卫生部《保健食品检验与评价技术规范》2003版评价标准,进行铁皮石斛枸杞西洋参配伍增强免疫力作用的动物功能实验研究。结果:与阴性对照组比较,中、高剂量组可增强小鼠DNFB诱导的小鼠迟发型变态反应,差异均有显著性(P<0.05);高剂量组可提高小鼠抗体生成细胞的能力和碳廓清能力(P<0.05);中、高剂量组可提高小鼠NK细胞活性,差异均有显著性(P<0.05)。结论:铁皮石斛枸杞西洋参配伍具有增强小鼠免疫力的作用。
关键词:铁皮石斛;枸杞;西洋参;免疫作用;小鼠
铁皮石斛(Dendrobium Candidum Wall .exLindl .) 为常用贵重药材, 它具有滋阴清热、 益胃生津、润肺止咳等功效[1]。枸杞是常用的传统中药,始载于《神农本草经》,被列为上品。书中谓之: “久服坚筋骨,轻身不老,耐寒暑”[2]。西洋参为五加科植物西洋参的干燥根,具有滋阴补气、宁神益智、清热生津的功效。现代研究表明,西洋参皂苷具有明显的提高免疫力的作用[3]。可将铁皮石斛与枸杞子、西洋参配伍,制成铁皮石斛枸杞西洋参配伍。本研究用整体动物试验探索铁皮石斛枸杞西洋参配伍对机体的免疫调节作用,探讨其可能的应用价值。
1材料与方法
1.1动物 健康SPF级ICR雄性小鼠,清洁级,体重 18~22g,由南京医科大学提供。
1.2 仪器与设备 电子精密天平、分析天平、HITACHI-7170A 型全自动生化分析仪、显微镜、E400显微镜系统、DXM1200F型摄像系统、722型可见分光光度计、XHF-1内切式匀浆器、离心机、酶标仪、96孔U型细胞培养板等。
1.3 受试物的配制 铁皮石斛枸杞西洋参(1∶2∶1) 提取物为20g铁皮石斛、40g枸杞子与20g西洋参于500ml蒸馏水煎煮浓缩而成,为实验室自制,为棕色膏状,于4℃冰箱备用,其有效成分为粗多糖和总皂苷。
1.4 分组、造模及给药
1.4.1 铁皮石斛枸杞西洋参配伍对小鼠免疫功能的影响 小鼠80只,分成两个组,一组进行进行迟发型变态反应、抗体生成细胞实验,另外一组进行碳廓清实验和NK细胞活性实验。大组再分成4个小组,为阴性对照组和低、中、高剂量组(分别灌胃铁皮石斛枸杞西洋参配伍0.35g/kg、0.70g/kg、2.10g/kg灌胃(相当于人体推荐摄入量的5、10、30倍)),阴性对照组以去离子水替代。连续灌胃30天后测定各指标。参考《保健食品检验与评价技术规范》(2003年版)中增强免疫力功能检验方法的判定标准,判定实验结果。
1.5统计学处理 实验数据以“x ”表示,用SPSS15.0软件,单因素ANVON进行各组间分析,LSD法进行组间两两比较。
2 结果与分析
2.1铁皮石斛枸杞西洋参配伍对小鼠体重的影响:小鼠的初始体重在各剂量组与与阴性对照组间比较,差异均无显著性(P>0.05).经口给予小鼠不同剂量的受试物30d后,小鼠的体重在各剂量组与阴性对照组间比较,差异均无显著性(P>0.05)。即该样品对小鼠体重无不良影响(表1)。
表1 铁皮石斛枸杞西洋参配伍对小鼠体重的影响(`x±SD,n=10)
体重(g) P值 体重(g) P值 |
阴性对照组 21.1±1.0 ---- 45.3±2.4 ---- 模型对照组 21.3±0.9 0.822 45.7±3.4 0.568 低剂量组 21.2±0.7 0.914 46.2±3.8 0.675 中剂量组 21.1±0.5 0.957 45.5±2.5 0.154 高剂量组 21.0±0.8 1.000 46.4±2.7 0.619 |
2.2迟发型变态反应实验
由表2可知,DNFB诱导的小鼠DTH,各剂量组小鼠耳廓肿胀度均高于阴性对照组,中、高剂量组小鼠耳廓肿胀度与阴性对照组比较,差异有显著性(P<0.05)。提示铁皮石斛枸杞西洋参配伍具有增强DNFB诱导的小鼠迟发型变态反应作用。
表2迟发型变态反应实验结果
组别 | 动物数(只) | 剂量(g/kg) | 肿胀度(mm) |
阴性对照组 | 10 | - | 15.04±3.21 |
低剂量组 | 10 | 0.35 | 16.23±3.14 |
中剂量组 | 10 | 0.70 | 18.47±3.22 * |
高剂量组 | 10 | 2.10 | 18.56±4.05 * |
注:*与阴性对照组比较,P<0.05
2.3抗体生成细胞实验
由表3可知,抗体生成细胞检测,各实验组空斑数高于阴性对照组。高剂量组空斑数与阴性对照组比较,差异有显著性(P<0.05)。提示铁皮石斛枸杞西洋参配伍具有增强小鼠产生抗体细胞生产能力。
表3抗体生成细胞实验结果
组别 | 动物数(只) | 剂量(g/kg) | 空斑数(×103个脾细胞) |
阴性对照组 | 10 | - | 81.3±17.5 |
低剂量组 | 10 | 0.35 | 85.4±13.6 |
中剂量组 | 10 | 0.70 | 90.7±19.3 |
高剂量组 | 10 | 2.10 | 97.6±16.8 * |
注:*与阴性对照组比较,P<0.05
2.4碳廓清实验和NK细胞活性实验
由表4可知,小鼠碳廓清吞噬指数有一定的增加。与阴性对照组比较,高剂量组差异具有显著性(P<0.05)。小鼠NK细胞活性均有增加,中、高剂量组小鼠NK细胞活性与阴性对照组比较,差异均有显著性(P<0.05,P<0.01)。
表4 对小鼠碳廓清吞噬指数和NK细胞活性的影响(`x±S)
组别 | 动物(只) | 剂量(g/kg) | 吞噬指数(a) | NK细胞活性(%) |
阴性对照组 | 10 | - | 0.22±0.06 | 20.78±4.53 |
低剂量组 | 10 | 0.35 | 0.23±0.05 | 21.46±5.12 |
中剂量组 | 10 | 0.70 | 0.25±0.02 | 25.54±4.69* |
高剂量组 | 10 | 2.10 | 0.24±0.04* | 25.43±4.15* |
注:*与阴性对照组比较,P<0.05
3.讨论
本实验结果,小鼠的初始体重在各剂量组与阴性对照组比较,差异均无显著性(P>0.05);经口给予小鼠不同剂量的受试物30d后,小鼠的体重在各剂量组与阴性对照组比较,差异均无显著性(P>0.05)。与阴性对照组比较,中、高剂量组可增强小鼠DNFB诱导的小鼠迟发型变态反应,差异均有显著性(P<0.05);高剂量组可提高小鼠抗体生成细胞的能力和碳廓清能力(P<0.05);中、高剂量组可提高小鼠NK细胞活性,差异均有显著性(P<0.05)。按照卫生部《保健食品检验与评价技术规范》2003版评价标准评价,铁皮石斛枸杞西洋参配伍具有增强小鼠免疫力的作用。
参考文献:
[1]江苏新中医学院.中药大药典[M].上海:上海科学技术出版社, 1985:586.
[2]钱彦丛,宇文萍.枸杞子的化学成分及药理研究新进展[J].中医药学报,2000,28(4) : 33-35.
[3]王卫霞,王谦.人身皂苷的免疫调节作用及其应用[J].中华中医药杂志,2005,20(4) : 234.