原发性肝癌靶向耐药潜在分子机制研究进展

原发性肝癌靶向耐药潜在分子机制研究进展

易晓雷，谢明，李旭辉，刘志鹏，景阵

长沙市中医医院（长沙市第八医院）肝胆胰•血管外科，湖南 长沙 410100

摘要：原发性肝癌是全球第六大恶性肿瘤类型，其致死率高、进展快、复发率高。当前丧失手术机会的患者靶向药物为其带来了曙光，然而其疗效尚不理想，应答率不高，同时存在靶向耐药，没达到用药效果，且带来不良反应。所以本篇总结国内外靶向耐药的研究进展文献，深入探讨靶向耐药的潜在分子机制。

关键词：原发性肝癌；靶向耐药；分子机制

原发性肝癌（primary hepatic carcinoma PHC）是全球第6大常见的癌症，导致癌症相关致死的第3大原因^[1-2]。目前，对于PHC早期患者可通过肝切除术达到根治、注射无水乙醇和射频消融来实现治愈。但是肝癌患者被诊断往往为晚期，很多患者错过了手术治疗机会，晚期肝癌患者通过靶向治疗、放化疗等手段来改善生活质量和延长生存时间^[3]。在我国5年生存率仅为10%左右^[4]。靶向药物作为晚期肝癌的一线用药，给肝癌患者带来一丝希望，但临床应用上，许多患者出现靶向耐药，其机制尚不明朗，故探索靶向治疗耐药的潜在分子机制尤为重要，下文便是总结国内外靶向治疗耐药的研究进展。

1.CSC（癌症干细胞）对肿瘤组织形成和生长及对药物的耐药

索拉非尼属于多激酶抑制剂，它发挥疗效是通过抑制Raf-1和VEGFR的受体酪氨酸激酶活性，由此干扰细胞信号转导通路，达到抑制癌细胞生成繁殖和血管生成，最后达到促进肿瘤细胞凋亡的效果^[5]。但是索拉非尼耐药性的产生，成为治疗晚期HCC患者的主要障碍。研究发现，CSC是肝癌细胞内的一种细胞亚群，其主要工作就是促进肿瘤组织形成和扩张及让化疗药物失效，达到先天性耐药，对CSC的研究发现，解开了传统放化疗不能根治杀死癌cell及易复发的原因^[6]。MAS等^[7]研究发现肝细胞癌的 CSC 细胞亚型有以 CD133+ 表型为特征，索拉非尼及其它靶向药物的刺激，会让CD133+ CSC快速激活一种酶-丝氨酸/苏氨酸激酶（Akt）；Akt通路与Bcl-2细胞生存途径来抵消细胞毒作用。在这个研究中，发现CD133+肝细胞癌可通过稳定EGFR/Akt 信号轴让CSC多样性，从而对索拉非尼产生耐药^[8]。

2.AFP激活PI3K／AKT信号与DNA损伤修复对肿瘤耐药的潜在影响

AFP（甲胎蛋白）在肝癌的诊断中具有很大的临床参考价值，在临床上，当患者血清中的AFP＞400ng/mL，高度怀疑是肝癌，接近75%的HCC患者在发病期间具有AFP基因高表达的特征^[9]；研究发现AFP具有刺激hcc增殖的功能，甲胎蛋白通过激活PI3K／AKT信号的功能，通过该分子机制通道诱导癌基因的表达，达到肿瘤的生长繁殖，AFP可以诱导肝癌细胞增殖，让肿瘤凋亡^[10-11]。梁大敏等发现DNA—PKcs是NHEJ修复通路中的不可或缺的部分，证明了癌细胞中DNA损伤修复与肿瘤耐药有关^[12]。

3.microRNA与肝癌靶向耐药的潜在关系

microRNA（miRNA）是22个核苷酸的非编码单链RNA分子。研究证实miRNA能精准调节细胞凋亡，所以这么多年来，microRNA与肝癌的研究一直没停止过，在研究中发现，miRNA 分子存在所有人的血浆及血清，在生理状态或病理状态，其数量与种类有明显区别^[13]。Hcc的进展，miRNA发挥关键作用，参与了肝癌细胞的生成、转化、远处侵袭及自然凋亡过程，miR-520e是microRNA的家族成员之一，其通过对人体内的 NIK/NF-kB /P-ERK1/2分子信号通路进行干扰，让肝癌细胞增殖受到抑制^[14]。可以推测到靶向耐药潜在分子机制可能与microRNA调节NIK/NF-kB /P-ERK1/2分子信号通路的失调有关，由于靶向耐药的分子机制在此深入研究的不多，需要更多的研究进一步探索。

4.HepG2细胞凋亡的分子机制与多药耐药的观察

HepG2是人肝癌细胞株，被广泛用于肝癌的研究。戴春岭等的研究证明ZNF300基因通过上调P-gp的表达，从而促进HepG2（肝癌细胞株）/VCR（长春新碱）的耐药性^[15]。许多基因调节肿瘤的生成与生长，如ERK和NF-κB，不仅抑制肿瘤细胞凋亡，还可上调P-gp 的表达，在肝癌MDR（多药耐药）的产生过程中发挥关键作用^[16-17]。在Met与索拉非尼的联合应用被证实，Met（二甲双胍）可以增强索拉非尼诱导人肝癌HepG2细胞凋亡^[18]。提示了Met可以增强索拉非尼诱导肝癌细胞凋亡的分子机制可能与活化AMPK相关。相关的细胞凋亡因子及基因如erbB2/neu、 NF-κB、c-myc、bcl-2、c-Jun、c-myc等都参与肝癌细胞的耐药

^[19]。

5.内质网应激诱导肝癌耐药的分子机制观察

内质网（简称ER）是细胞器，真核细胞中蛋白质生成、加工与分泌都与其相关。内质网本身有强大的内稳态机制，但不可避免的还有很多因素可导致ER功能失调，从而导致内质网应激（ER stress）。内质网应激时可导致未折叠蛋白质或错误折叠蛋白的累积，这种想象称为未折叠蛋白反应（UPR），ER应激是细胞为适应外界变化出现的代偿性保护应答。一旦ER功能长时间紊乱，机体内细胞会启动凋亡程序，让细胞死亡^[20]。UPR诱导剂GRP78g干预后的肝癌细胞中P-gp转录被激活，表达增加，使药物敏感性增加。ER的稳态环境与MDR的分子机制的关系还需进一步深入研究。

6.乙型肝炎病毒对靶向药物的潜在影响

HCC患者携带乙肝病毒往往容易产生耐药。乙肝病毒感染的肝癌患者导致药物敏感性差，容易出现耐药，可能与乙肝病毒中某种蛋白有关。Liu Y等研究证明与HBV X基因编码蛋白存在关联。HBX编码蛋白是一种功能蛋白，它可加速肝炎向肝癌发展。肝癌细胞系HepG2中过表达这类功能蛋白，最终让细胞产生多药耐药，凋亡不仅会减少许多；而且核因子kb活性也会得到增强^[21]。

7.小结

综上所述，肝癌耐药的产生潜在因素可能与Akt 信号轴、PI3K／AKT信号激活、DNA损伤修复、microRNA精准调节细胞凋亡失调、HIF-1α的表达上调、HBV X基因编码蛋白、ER功能紊乱、基因erbB2/neu、 NF-κB、c-myc、bcl-2、c-Jun、c-myc调控有关。所以肝癌耐药是多基因、多分子信息通道、多因素综合作用的复杂过程，靶向药物应用面世时间不长，取得了不错的成果，相关研究也如火如荼的进行；但是靶向药物耐药的分子机制尚未有权威统一的标准出来，希望更多的研究者一起深入研究靶向耐药的分子机制，提高肝癌靶向治疗效果。

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第一作者：易晓雷（1968—），男，硕士研究生导师，主任医师，研究方向：肝胆胰方向。邮箱账号1264346038@qq.com.13875952934

湖南省卫计委课题项目:甲基莲心碱逆转人肝癌细胞索拉非尼耐药及其对PI3K-AKT通路的影响，B20180799.