PCR技术在食品微生物检测中的作用分析

PCR技术在食品微生物检测中的作用分析

李丹,高玉生

山东同济测试科技股份有限公司 山东省烟台市264000

摘要：在食品微生物检测工作中采用聚合酶链式反应（PCR）技术时，应形成正确的技术应用认知，制定完善的技术方案，通过有效的措施提高食品微生物检测工作的效率，发挥现代化技术的作用，确保能及时发现食品微生物问题，并有效解决和应对，为保证食品质量、维护人们的身体健康和生命安全夯实基础。

关键词：PCR技术；食品微生物检测；作用

食品安全保障工作是关乎民生问题的重要工作内容。在食品安全事件频繁发生的背景下，全面完善食品检测工作方案，是提升食品安全工作效果的重要基础条件，同时是推动社会发展及进步的重要发展方向。将聚合酶链式反应（PCR）技术完善应用至食品微生物检测工作过程中，可以有效提升食品检测工作效果。

1PCR技术在具体应用中的测定方式

1.1常规PCR检测法

食品微生物的常用检测方式即常规PCR检测法，即将测定目标物质中的DNA模板及其反应产生的引物相混合。在检测中将一定量的聚合酶加入混合后的混合物中，就可制作基本检测样本。在后续检测中还需在特定反应条件与温度下开展培养反应活动。添加聚合酶的混合物在适合温度环境下受聚合酶作用影响，引领目标物质行电脑模板序列下扩增，模板DNA片段经多个周期后会持续进行复制与扩增。与此同时，在检测中，测定目标物上所具有的DNA能直接反映被检测食品在相应时间中形成的微生物数量与种类。以往检测方式即通过DNA复制与扩增能力将少量且潜在微生物群转至可观性较强的微生物群，达到检测食品微生物的目的。

1.2多重PCR技术

多重PCR技术在实际应用过程中和常规技术的应用原理相同，不同之处是在相同反应体系内设置一对或以上的特异类型引物，构建和各个引物特异性进行互补的模板，即可在相同反应管内扩增多条目标DNA片段。此技术不仅能保留常规技术的特异性和敏感性优势，还能简化检测工作的步骤、减少试剂的使用剂量、一次性同时扩增多种需要检测的微生物，因此在食品微生物检测期间采用多重PCR技术，能同时检测多种微生物基因，减少工作人员的工作量。但是，多重PCR技术在应用过程中存在不足之处，如扩增处理的效率较低、缺乏一定的敏感性。在扩增过程中需要摸索反应条件，可能会发生不同引物之间相互干扰的问题，因此需要结合具体情况探索多重PCR技术的应用措施和方法。例如，在食品中大肠菌群的检测过程中采用多重PCR技术，可利用点对点的方式设置固定性多聚dT尾捕捉探针，配合使用生物素进行扩增DNA标记处理，达到准确检测食品微生物的目的。

1.3RT-PCR技术

逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）技术的原理是提取食品组织，或提取食品细胞内的总RNA，将其中所存在的mRNA作为模板，利用dT或随机引物，借助逆转录酶将提取的物质转录成为cDNA，再将其作为模板实现PCR扩增的目的，明确目标检测基因的情况。在食品微生物检测过程中采用此技术能提升RNA检测的灵敏度，甚至能提升多个数量级，准确分析微量RNA样本。例如，在食品微生物检测的过程中可通过RT-PCR技术进行大肠杆菌噬菌体的检测分析，将F-RNA平板作为阳性结果数据值的依据，在SC噬菌体和F-RNA噬菌体混合液内，可准确、有效检测F-RNA噬菌体。

2PCR技术在食品微生物检测中的应用策略

2.1应用PCR技术检测大肠杆菌

大肠杆菌也称为大肠埃希氏菌，该病菌在一定条件下可引起多种动物与人发生尿道、胃肠道等多种局部组织器官感染。大肠杆菌属于寄居在动物肠道中的病菌，有一小部分受相应条件影响而引发疾病。与此同时，大肠杆菌的血清型会引发动物或人体肠道感染，多由特定的致病性毒素与菌毛抗原等感染引发。除典型的肠道感染，还会引发脑膜炎、关节炎、尿道感染以及败血型感染等疾病。当前人类广泛关注对食品中的大肠杆菌的快速准确检测，常用滤膜法、发酵法、平板计数法、ATP生物发光法、自动化仪器检测法等，由于大肠杆菌具有毒性且具有一致性，部分检测方式在准确率方面存在不足。在微生物检测中应用PCR技术则为检测大肠杆菌中的DNA双链，经PCR技术于免疫磁分离技术相结合使大肠杆菌的检测准确率得到大幅度提升，对保障食品安全有着重要现实意义。

2.2针对沙门氏菌的检测

沙门氏菌作为寄居在人及动物肠道内的细菌，通常以消化道感染模式为主，在动物性食品中存在比较广泛，同时部分植物性食品也可能会间接受到沙门氏菌的污染。针对食品微生物检测工作中沙门氏菌的检测，要根据沙门氏菌的实际特点进行分析，继而利用科学高效的检测手段保证检测效果。PCR技术的完善应用对于沙门氏菌检测工作效果有着极强的促进作用。对以往的沙门氏菌检测情况进行分析，其危害性较大，同时检测工作存在一定难点。由于沙门氏菌在具体检测过程中容易受到食品加工等多方面因素的影响，导致具体检测工作无法准确探究出食品中沙门氏菌的具体含量。将PCR技术完善应用至沙门氏菌检测过程中，具备十分全面的优势特点，可以根据不同的沙门氏菌血清型以及具体情况准确检验，对于检测工作效果和效率的提升有着显著作用。与此同时，通过PCR技术完善食品微生物沙门氏菌的检测工作，可以针对传统检测技术手段中无法企及的检测情况进行细致化分析和探究。因此，借助PCR技术完善食品微生物检测工作，可以进一步提升沙门氏菌检测效果，全面强化检测工作的准确性。

2.3针对金黄色葡萄球菌的检测

金黄色葡萄球菌多存在于速冻类食品中，会引起人体的多种感染，对于人体身体健康存在着较大的威胁。针对金黄色葡萄球菌的检测工作，主要是将其内部编码进行全面分析，继而通过RNA技术手段全面探索食品中的金黄色葡萄球菌相关数据。在现代技术和检测模式不断完善的过程中，PCR食品微生物检测手段逐渐完善。可以全面突破传统单一化的检测模式，运用科学且高效的PCR食品微生物检测方法改善传统免疫检测模式。PCR检测技术手段的完善，对于食品类生物安全检测工作效果的提升有着较强的推动性作用。因此，将PCR食品微生物检测技术运用至食品微生物金黄色葡萄球菌的检测工作中，对于食品检测工作效率和工作质量的提高有着较强促进作用。

2.4针对非致病菌的检测

食品微生物检测工作不仅要针对食品中常见的致病菌群进行全面分析和探究，更要对非致病类菌群进行深度检测，其中乳酸菌检测工作便是非致病菌检测的重点探索方向。乳酸菌作为十分常见的菌群种类，与人体有着较大的共生关系，是促进肠道微生态菌群平衡的重要基础。针对食品微生物检测工作中的乳酸菌进行全面分析和探究，是非常重要的检测方向。乳酸菌作为非致病菌的类型之一，可以在食品真空环境下生存，同时其生长繁殖速度较快，会造成食品腐败，出现食品安全问题。充分借助PCR技术，完善食品微生物中的非致病菌群检测工作方案，可以针对乳酸菌的繁殖进行具体化分析。根据食品微生物检测情况进行分析，很多食品会随着时间发酵，其中乳酸菌产出率逐渐增长。而PCR技术的合理应用，可以提升检测工作质量，进一步探索食品检测中非致病菌增长情况。

3结语

综上所述，食品微生物检测的过程中PCR技术具有一定应用价值和应用意义，能提升检测工作效率。因此在实际检测工作中需结合不同类型的PCR技术特点和情况，有针对性地进行食品微生物的检测检验，提升PCR技术的应用效果，确保能精准、全面、快速、及时检测食品内的微生物，为有效维护食品质量安全提供帮助。

参考文献

[1]姬晓月.PCR技术及其在食品微生物检测中的应用[J].现代食品，2021（21）：108-110.

[2]许竞思.浅析PCR技术及其在食品微生物检测中的应用[J].现代食品，2021（19）：146-149.