水栀子不同炮制方法栀子苷的含量研究

水栀子不同炮制方法栀子苷的含量研究

李霄 ,许娜娜 

山东协和学院  山东济南  250200

摘要：将水栀子通过五种不同的炮制方法进行栀子苷的含量对比，并比较五种炮制品的栀子苷含量。使在临床应用方面更加方便，其药用资源利用更加充分。方法 把水栀子通过炒黄、炒焦、制碳、姜制、甘草水制的方法进行炮制。采用HPLC测定，流动相为乙腈-水（15:85），测定水栀子炮制后栀子苷的含量差异。并进行对比。结果 在炮制工艺中，栀子苷的含量随加工温度和加工时间的延长而下降。且姜制和甘草水制的炮制品都有降低栀子苷造成的肝肾毒性。结论 由于水栀子与栀子化学成分分布相似，但含量差别较大。且水栀子栀子苷的含量较大。所以可以通过提取的方法来进行栀子苷的提取，以达到资源的利用。栀子苷中都含有肝肾毒性，可以通过炮制的方法来降低此毒性。

关键词：水栀子；含量对比；栀子苷

栀子 Gardeniae Fructus 为茜草科（Rubiaceae）植物栀子 Gardenia jasminoides Eills 的干燥成熟果实，主产于湖北、江西等长江以南的地区。其有效成分主要为栀子苷。栀子是我国传统的药食两用的中药，内服具有泻火除烦、清热利湿、凉血止血的功效，外用生品粉末与黄酒调成糊状可消肿止痛。栀子又名木丹、鲜支、越桃、支子、枝子等。目前现在的栀子加工有：炒、酒炙、生姜等。炒栀子、焦栀子、炭栀子是清炒的方法。目前《中国药典》所载的栀子炮类产品有：煎栀子、焦栀子、但在临床上栀子碳和姜栀子也在大量使用。所以经过不同炮制方法其炮制的药品的有效成分的含量也不一样，临床应用也将不同。

1 实验过程与方法

1.1 实验方法

供试溶液的制备：

取样品0.1克，精确称重，然后加25 ml的甲醇，进行20 min的超声波，冷却后称重，用甲醇补充。取10 ml的过滤液，加入50 ml量瓶中，加入甲醇至刻度，并摇晃均匀放凉后再进行称量。

对照品溶液的制备：

精密称取栀子苷对照品 5 mg，置于25 ml量瓶中，用甲醇定容至刻度，摇匀，得对照品储备液，从储备液中取10 ml 至 50 ml 量瓶中，用甲醇定容，摇匀，得42.4 μg·ml-1 对照品溶液。

测定法用吸液器将两组样品分别抽吸10 ul，分别注入高相液相色谱中进行检测。             

精密度试验：

在相同的色谱条件下，以10微升溶液为基准，进行6次取样，得出各峰间 RSD值。 0.43%、0.84%、0.14%、0.13%、0.53%、0.27%、0.31%，符合规定，由此可以看出，这台设备的精度很高。

稳定性考察：

取同一供试品溶液分别于在0、2、4、8 h 进样，每次 5 μl，测量其峰位，RSD为 1.35%。结果表明，样品8小时后，样品得到了较好的稳定。

重复性试验：

将栀子原料粉0.2g左右，精密称量6份，按上述中制备供试品溶液，在相同的色谱条件下分别进行试验测定。

色谱条件：

其中色谱柱为 Venusil MPC18（250 mm×4.6 mm，5 μm）；流动相为乙腈-水（15:85），梯度洗脱：0-18min，8%-15%乙腈；18-25 min，15%-25%乙腈[11]；25-40min，25%-35%乙腈；40-55 min，35%-65%乙腈；柱温 20 ℃；体积流量0.8 mL/min；检测波长为 230、320、450 nm；进样量为10 μL。

1.2线性关系考察

按上述的色谱条件进行测定，进样量为10 μL。将样品的峰值积点值作为纵轴（Y）和进样质量的浓度作为横轴（X)，绘制出标准曲线并进行线性回归，取栀子苷对照品溶液（42μg·ml-1）分别自动进样 5、10、15、20、25、30μl，测定峰面积。以（Y）峰面积  为纵坐标，以（X（μg））栀子苷对照品溶液进样量为横坐标，画出了标准的曲线，得到了如下的回归方程：

Y = 25.29X + 5.423，R2 = 0.999。在0.213-1.271μg区间中，其栀子苷呈良好的线性关系。

1.3 统计学方法

实验数据用平均±标准差(SD)表示。用GraphPadPrism 9.0进行分析。p<值为0.05，或者<0.01时认为有显著性差异。

2 实验结果

2.1.栀子苷的含量测定　　

将以上供试品样品（栀子和水栀子的原料）各5μl，记录栀子苷的峰面积，用标准曲线方法测定其含量。在此色谱峰图中可以看出栀子苷是水栀子中含量最多的化学成分。在药理学中栀子苷是清热解毒的主要成分。所以可以表明水栀子中栀子苷具有相关的药效，我们可以通过提取的方法来得到栀子苷。

2.2 各类炮制品栀子苷的对比

发现随着温度的升高栀子苷的含量逐渐下降栀子苷含量：炒黄＞炒焦＞制碳，其中姜制和甘草水制条件下文火炮制的栀子苷含量下降最为明显，所以栀子苷中含肝肾毒性最少的为姜制和甘草水制的水栀子炮制品。

3 讨论

栀子属中药，其作用是降火除烦，清热利尿，凉血解毒，可用于热病，失眠，黄疸，淋病，目赤，咽痛，吐血，衄血，血痢，尿血；热毒疮疡，口干舌燥，扭伤肿疼。栀子金花丸、茵栀黄颗粒等市面上常用的药物都是以栀子为主要原料。现代医学的研究显示：栀子具有抗炎、抗氧化、利胆、利尿、抗癌、解毒等功效；具有镇痛、抗辐射、降血脂等诸多功效。

栀子苷是栀子中含有的最大的一种环烯醚萜苷类，具有保肝、利胆和消炎作用。关的研究结果显示，环烯醚萜类可以应用于工业化。此外，还有一些其它的一些植物如牛膝、肉苁蓉和青牛胆草等。采用 HPLC方法对其进行分析，结果表明：在焙烧过程中，栀子苷的含量会随烘焙温度的提高而降低；在不同的条件下，不同的温度、不同的温度会对栀子苷有着不同程度的影响。在炮制过程中姜制和甘草水制都具有降低栀子苷，减少栀子中肝肾毒性，所以在生活中姜制和甘草水制的栀子炮制品可以相互替换。

［参考文献］

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[4]吕辰子,张晓燕,王勃.栀子炮制的现代研究进展[J].药物评价研究.2019,(06):210-214.

作者简介：许娜娜，女，汉族，山东省济南市，1995年4月，硕士，讲师，中药药理学。

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