细胞迁移诱导蛋白对胆囊癌GBC-SD细胞生物学功能的影响及其机制研究

(整期优先)网络出版时间:2022-12-13
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摘要目的探讨细胞迁移诱导蛋白(CEMIP)对胆囊癌细胞系GBC-SD生物学功能的影响及其可能机制。方法检测CEMIP在胆管上皮细胞HIBEC及胆囊癌细胞系NOZ、GBC-SD中的表达。取对数生长期的人胆囊癌细胞系GBC-SD作为空白对照组;转染无意义的小干扰RNA作为阴性对照组;将siCEMIP-1或siCEMIP-2转染至GBC-SD细胞中,分别作为siCEMIP-1组和siCEMIP-2组。蛋白质印迹法检测GBC-SD细胞中CEMIP、免疫球蛋白重链结合蛋白(Bip)、钙网蛋白(CRT)的表达量,CCK-8法检测GBC-SD细胞相对存活率。分别采用划痕实验、流式细胞术检测细胞划痕修复率及细胞凋亡率。Transwell小室实验检测细胞迁移、侵袭能力。选取12只5周龄BALB/c-nude小鼠分为对照组和实验组,每组6只,两组小鼠分别于右侧腋下(前肢)皮下注射GBC-SD细胞和沉默CEMIP的GBC-SD细胞,33 d后比较移植瘤体积和重量。结果与HIBEC细胞相比,GBC-SD[(0.750±0.034)比(0.120±0.002)]和NOZ[(0.690±0.013)比(0.120±0.002)]细胞中CEMIP蛋白相对表达量均增高,差异具有统计学意义(P<0.05)。与空白对照组及阴性对照组比较,siCEMIP-1组及siCEMIP-2组CEMIP、Bip及CRT的表达量、细胞相对存活率、细胞划痕修复率、细胞迁移及侵袭能力均下降,而细胞凋亡率增加,差异有统计意义(P<0.05)。与对照组相比,实验组小鼠的瘤体体积[(543.6±114.7)比(801.5±256.3)mm3]和瘤体重量[(0.453±0.093)比(0.728±0.278)g]均下降,差异有统计学意义(P<0.05)。结论CEMIP在胆囊癌细胞系GBC-SD及NOZ中高表达,沉默CEMIP基因表达可抑制胆囊癌细胞系GBC-SD增殖、划痕修复能力、迁移及侵袭能力,促进细胞凋亡,这可能与CEMIP抑制内质网分子伴侣Bip及CRT表达相关。