不同分子检测方法在肺结核诊断中的应用评估

不同分子检测方法在肺结核诊断中的应用评估

王璐 王爱华 宋璐

丹阳市人民医院  江苏 镇江 212300

【摘要】目的 分析不同分子检测方法在肺结核诊断中的应用效果。方法 选取2021年10月-2022年10月本院收治的155例疑似肺结核患者，所有患者均采用痰涂片、Xpert MTB/RIF及快速培养进行检测，对比诊断效果。结果 在155例疑似肺结核患者中，103例检测阳性，52例检测阴性，其中Xpert MTB/RIF诊断效能最高，敏感度、特异度、准确度分别为84.47%，73.08%，80.65%。结论 在肺结核诊断中，Xpert MTB/RIF检测技术的准确度最高，可作为肺结核诊断中的参考依据。

【关键词】外周血结核感染T细胞斑点试验；实时荧光核酸恒温扩增检测技术；血清结核抗体；肺结核诊断；效果

肺结核是一种广泛存在于临床上的常见疾病，其发病机理异常复杂，受多种诱因影响，并且存在一定的传染性，因此被视为一种全球性疾病。在我国，结核病的负担相对较重[1]，2019年新增结核病例达到了83.3万人，结核病发生率为每10万人中有58例。肺结核作为一种高度传染性的传染病，早期诊断和早期治疗是有效防治结核病的重要环节。近年来，分子水平的检测技术不断进步，在2017年的新一版《结核病诊断标准》中，将分子水平的检测结果纳入了病原学的范畴中。本文对不同分子检测方法在肺结核诊断中的应用效果进行了分析与探讨，汇总内容如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料

选取2021年10月-2022年10月本院收治的155例疑似肺结核患者，男女比例为78：77，年龄41-78岁，平均年龄（60.12±3.58）岁，临床资料对比，差异无统计学意义（P＞0.05）。

纳入标准：①出现咳痰、咯血、胸痛、乏力、低热等症状，或无特异性症状；②均接受痰涂片、Xpert MTB/RIF及快速培养检测；③患者对本研究内容知情同意，并自愿签署知情同意书。排除标准：①合并恶性肿瘤；②合并精神或认知障碍；③艾滋病感染史；④免疫抑制剂治疗史。

1.2 方法

所有疑似患者均采用痰涂片、SAT及快速培养进行检测，痰涂片方法为：采用萋－尼氏抗酸染色法。操作方法以试剂盒说明书和《痰涂片镜检质量保证手册》为依据；快速培养法为：使用N－乙酰－L－半胱氨酸氢氧化钠，对痰液标本进行去污处理，然后使用pH6.8的磷酸缓冲液，对处理好的痰液标本进行洗涤，吸取0.5ml加入MGIT培养管（含有营养添加剂和杂菌抑制剂）中，使用分枝杆菌培养检测仪进行检测。根据《结核病诊断实验室检验规程》，经抗酸染色涂片法，确认阳性标本，并使用PNB、TCH鉴别培养基进行分枝杆菌菌种初步鉴定。如果上述鉴别方法显示无分枝杆菌生长，则为牛结核分枝杆菌，如果显示有分枝杆菌生长，则为非结核分枝杆菌菌群。如果PNB培养基无分枝杆菌生长，而TCH培养基有分枝杆菌生长，则为结核分枝杆菌；Xpert MTB/RIF检测法为：处理液与痰液标本进行1∶2比例混合后，放置在涡旋振荡器上涡旋0.5min，温育15min后震荡0.5min，并再次温育5min直至标本液化完全。将混合液加入检测匣，放置于GeneXpert检测仪中检测。

1.3 观察指标

（1）比较不同检测方法临床诊断结果。包括痰涂片、Xpert MTB/RIF和快速培养；（2）比较不同检测方法诊断效能。

1.4 统计学分析

以SPSS 22.0软件对比数据。以临床确诊结果为标准，通过比较敏感度、特异度、准确度，来评价三种检测方法对肺结核的诊断效果。P<0．05表示差异有统计学意义。

2 结果

2.1 不同检测方法临床诊断结果比较

在155例疑似肺结核患者中，103例检测阳性，52例检测阴性，见表1。

表 1 不同检测方法临床诊断结果比较

2.2 不同检测方法诊断效能比较

 Xpert MTB/RIF诊断效能最高，敏感度、特异度、准确度分别为84.47%，73.08%，80.65%，见表2。

表2 不同检测方法诊断效能比较( % )

3 讨论

肺结核是临床上常见的疾病，但目前对其诊断方法仍然存在挑战。现有的诊断方法阳性率低，容易发生漏诊和误诊，因此迫切需要开发一种新的、有效的早期诊断手段。这样的新手段对于提高患者的生活质量具有重要意义。

尽管痰涂片法操作简便、费用低廉，但它仍然是一种有效的检验方法，在早期诊断肺结核患者时发挥着重要的作用。然而，需要注意的是，这种检测方法对细菌含量有较高的要求，因此受感染史、治疗史等因素的影响，其检出率可能会下降。另外，痰涂片法也无法将结核和非结核病例进行区分

[2]。

传统的“金标准”诊断方法是依靠结核分枝杆菌的培养，这种方法具有较高的特异性。然而，由于培养时间较长且只能在活菌环境中生存，这种方法难以实现快速诊断。

Xpert MTB/RIF技术是一种新兴的分子标记技术，近年来得到了广泛的发展，已被证明在肺结核的诊断中具有高度的价值。与传统的荧光定量PCR方法相比，Xpert MTB/RIF技术在准确性、安全性和时效等方面具有显著的优势。该技术使用5条探针对检测区域进行全面覆盖，内部参考设计可确保结果的准确可靠。此外[3]，Xpert MTB/RIF技术还采用一次性反应盒，独立且自成体系，避免了操作过程中的污染和环境因素对实验结果的干扰，并最大程度地减少了气溶胶的产生。整个诊断过程仅需2小时即可完成。由于肺结核的临床症状存在较大的个体差异，利用Xpert MTB/RIF技术的精确、有效和快捷特点，有望实现对肺结核的早期诊断。

此外，由于肺结核患者的临床症状与肺结核患者不同，因此无法仅凭肺部疾病的非特异性临床症状进行确诊[4]。与肺结核相关的检测指标具有不同的诊断效率，因此要准确判断肺结核的诊断价值，就需要综合各种检测指标，以更好地确定肺结核的诊断价值。

综上所述，在肺结核诊断中，T-SPOT.TB的准确度最高，可作为肺结核诊断的参考依据。

【参考文献】

[1]彭利君,刘立宾,王静,方婷婷,蔡龙. 3种分子检测方法对肺结核的诊断价值比较[J]. 临床检验杂志,2022,40(08):571-575.

[2]王娟娟,施旭东,吴梅香,陈凯. 不同分子检测方法在肺结核诊断中的应用评估[J]. 临床检验杂志,2022,40(05):368-370.

[3]谭守勇. 分子生物学检测在肺结核病精准诊断中的应用[J]. 广东医学,2021,42(04):373-376.

[4]李雪莲,穆晶,车南颖,高孟秋. 分子病理检测在涂阴复治肺结核诊断中的应用[J]. 诊断病理学杂志,2020,27(08):589-592.