简介：摘要目的探讨微小RNA(miRNA)-1303通过靶向调控溶血磷脂酸受体3(LPAR3)的表达抑制肾癌786-O细胞增殖和迁移的机制。方法采用实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)检测肾癌细胞株(A498、ACHN、786-O、OS-RC-2)及正常肾小管上皮细胞HK-2中miR-1303的相对表达量。将miR-1303模拟物和阴性对照序列分别转染至miR-1303表达最低的肾癌细胞，分别作为miR-1303组和阴性对照组。qRT-PCR检测两组细胞miR-1303的相对表达量。MTT法和Transwell迁移实验分别检测细胞增殖能力和迁移能力。生物信息学软件RegRNA 2.0预测miR-1303的靶基因。双荧光素酶报告基因检测miR-1303与靶基因的结合。qRT-PCR和Western blotting法检测LPAR3的相对表达量。计量资料以均数±标准差(±s)表示，两组间比较采用t检验，多组间比较采用单因素方差分析。结果肾癌细胞株A498、ACHN、786-O、OS-RC-2和正常肾小管上皮细胞HK-2中miR-1303表达分别为0.51±0.04、0.79±0.02、0.21±0.04、0.55±0.07和1.00±0.05，肾癌细胞株中miR-1303表达均低于HK-2(P<0.05)，786-O细胞中的相对表达量最低(F＝29.50，P<0.01)。与阴性对照组相比，miR-1303组细胞miR-1303的表达明显增加[(1.00±0.01)比(7.98±0.88)，t＝7.95，P<0.01]。miR-1303组细胞吸光度值明显低于阴性对照组(P<0.05)。miR-1303组细胞迁移数明显低于阴性对照组(P<0.05)。miR-1303可与LPAR3 mRNA互补配对结合(P<0.01)。与阴性对照组相比，miR-1303组786-O细胞中LPAR3基因表达显著下降[(1.00±0.01)比(0.23±0.03)，t＝23.56，P<0.01]。结论miR-1303可能通过靶向抑制LPAR3的表达，抑制肾癌786-O细胞的增殖能力和迁移能力。

简介：摘要目的探讨大黄素甲醚通过调节miR-380-3p表达影响前列腺癌DU145细胞株的细胞周期和增殖的作用机制。方法采用50 μg/mL的大黄素甲醚处理前列腺癌DU145细胞，将其作为大黄素甲醚组；以不做任何处理的正常培养的DU145细胞作为对照组。流式细胞术检测DU145细胞的周期变化，MTT法检测DU145细胞的增殖变化，实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)检测DU145细胞中miR-380-3p的表达情况。生物信息学软件RNAhybrid预测miR-380-3p的靶基因。qRT-PCR和Western blotting法检测miR-380-3p靶基因的表达。计量资料以均数±标准差(±s)表示，组间比较采用t检验。结果与对照组相比，大黄素甲醚组DU145细胞在G0/G1期出现阻滞(P<0.01)，DU145细胞增殖能力被明显抑制(P<0.05)。对照组和大黄素甲醚组DU145细胞中的miR-380-3p相对表达量分别为8.36±1.42和1.08±0.39，大黄素甲醚可促进miR-380-3p的表达(t＝4.96，P<0.01)。miR-380-3p的功能性靶基因可能是UHRF1。大黄素甲醚组和对照组DU145细胞UHRF1 mRNA的相对表达量分别为0.23±0.06和1.04±0.15，与对照组相比，大黄素甲醚组DU145细胞中UHRF1基因表达降低(t＝4.55，P<0.01)。结论大黄素甲醚能抑制前列腺癌DU145细胞的增殖效应，诱导DU145细胞发生G0/G1期阻滞，这可能与其对miR-380-3p的调控密切相关。

简介：摘要目的探讨微小RNA(miRNA)-6516-5p在肾癌细胞系中的表达及调控肾癌细胞增殖和迁移的分子机制。方法用实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)检测肾癌细胞系和正常近端肾小管上皮细胞系中miR-6516-5p的表达。用脂质体法分别将miR-6516-5p模拟物和无意义序列(NC)瞬时转染至miR-6516-5p表达最低的肾癌细胞，即miR-6516-5p组和NC组。qRT-PCR检测转染细胞miR-6516-5p的表达。CCK-8法和Transwell迁移实验检测转染细胞的增殖和迁移。生物信息学软件和双荧光素酶基因报告实验分别预测和验证miR-6516-5p对靶基因的调控。qRT-PCR和Western blotting法分别检测转染细胞中靶基因的表达。计量资料以均数±标准差(±s)表示，两组间比较采用t检验，多组间比较采用单因素方差分析。结果miR-6516-5p在肾癌细胞系中的表达均明显低于正常近端肾小管上皮细胞(P<0.01)，786-O细胞中miR-6516-5p的表达最低(F＝27.69，P<0.01)。NC组和miR-6516-5p组786-O细胞中miR-6516-5p的表达分别为1.01±0.08和9.91±1.16，与NC组比较，miR-6516-5p组786-O细胞中miR-6516-5p表达明显增加(t＝7.63，P<0.01)。上调miR-6516-5p能显著抑制786-O细胞的增殖(P<0.05)。NC组和miR-6516-5p组细胞迁移数分别为(85.65±8.77)个和(28.05±6.20)个，过表达miR-6516-5p可抑制786-O细胞的迁移(t＝5.36，P<0.01)。miR-6516-5p的靶基因可能是鸟氨酸脱羧酶1(ODC1)，miR-6516-5p能显著抑制野生型ODC1-3′UTR的荧光素酶活性(t＝9.83，P<0.01)。上调miR-6516-5p可降低786-O细胞中ODC1 mRNA和蛋白的表达(P<0.01)。结论miR-6516-5p在肾癌细胞系中表达降低，miR-6516-5p通过靶向ODC1抑制肾癌786-O细胞的增殖和迁移，miR-6516-5p可能成为肾癌潜在的分子靶点。

简介：摘要目的探究miR-769-3p在膀胱癌组织中的表达水平，通过下调膀胱癌J82细胞中miR-769-3p表达水平，观察沉默miR-769-3p对J82细胞迁移能力和细胞周期的影响。方法采用OncomiR数据库分析miR-769-3p在膀胱癌组织和癌旁组织中的表达差异。通过Lipofectamine 2000转染试剂转染J82细胞，分为si-miR-769-3p组(转染miR-769-3p小分子干扰片段)和对照组(转染无意义序列)。实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)检测转染后miR-769-3p相对表达水平。通过细胞划痕实验和流式细胞仪检测比较两组J82细胞迁移能力和细胞周期的差异性。采用生物信息学软件MicroRNAdb预测miR-769-3p的靶基因。双荧光素酶报告基因实验验证miR-769-3p与靶基因的互补结合。qRT-PCR和Western blotting分别检测miR-769-3p的靶基因表达水平。计量资料以均数±标准差(±s)表示，两组间比较采用t检验。结果与癌旁组织相比，miR-769-3p在膀胱癌组织中表达显著升高，差异具有统计学意义(P<0.01)。si-miR-769-3p组miR-769-3p相对表达水平(1.02±0.16)明显低于对照组(4.50±0.60)，差异具有统计学意义(P<0.01)。si-miR-769-3p组细胞迁移率[(26.67±3.98)%]明显低于对照组[(61.86±4.70)%]，差异具有统计学意义(P<0.01)。si-miR-769-3p组处于G0~G1期的细胞比例[(57.66±5.74)%]显著多于对照组[(31.26±3.24)%]，差异具有统计学意义(P<0.01)。双荧光素酶报告基因实验证实内皮素3(EDN3)是miR-769-3p的靶基因。对照组和si-miR-769-3p组J82细胞中EDN3 mRNA相对表达水平为1.99±0.66和6.98±0.76，与对照组比较，si-miR-769-3p组EDN3 mRNA相对表达水平明显高于对照组，差异具有统计学意义(P<0.01)。结论低表达miR-769-3p可以通过促进EDN3基因表达抑制膀胱癌J82细胞迁移能力，阻滞J82细胞周期。

简介：摘要目的探讨紫云英苷上调miRNA-513（miR-513）对前列腺癌细胞株C4-2B细胞增殖能力及细胞周期的影响。方法选取前列腺癌细胞株C4-2B，采用125 μg/L紫云英苷作用48 h者为紫云英苷组，未处理者为对照组。采用四甲基偶氮唑盐（MTT）法检测两组C4-2B细胞增殖能力，流式细胞术检测细胞周期。采用miRNAMap预测软件预测miR-513的靶基因为叉头框蛋白R2（FOXR2），并采用双荧光素酶报告基因实验进行验证。实时荧光定量聚合酶链反应（qRT-PCR）检测两组细胞miR-513和FOXR2 mRNA的相对表达水平，蛋白质印迹法检测两组细胞中FOXR2、细胞周期蛋白依赖性激酶7（CDK7）、β-actin和细胞周期蛋白H（cyclin H）的表达。结果与对照组比较，培养第2、3、4、5天紫云英苷组C4-2B细胞增殖活力均降低（均P<0.05）。对照组和紫云英苷组S期细胞比例分别为（48.1±3.2）%和（36.0±2.1）%，紫云英苷组S期细胞比例降低（t=3.12，P=0.021）；G2期细胞比例分别为（24.9±3.3）%和（11.8±2.4）%，紫云英苷组G2期细胞比例降低（t=3.18，P=0.019）。对照组和紫云英苷组C4-2B细胞中miR-513的相对表达水平分别为1.01±0.22和6.55±0.61，紫云英苷组C4-2B细胞中miR-513的相对表达水平升高（t=7.70，P<0.01）。双荧光素酶报告基因实验验证FOXR2为miR-513的靶基因。对照组和紫云英苷组C4-2B细胞中FOXR2 mRNA相对表达水平分别为1.04±0.14和0.19±0.06，差异有统计学意义（t=5.53，P=0.002），提示紫云英苷促进miR-513表达后，FOXR2 mRNA表达降低。紫云英苷组C4-2B细胞FOXR2、CDK7和cyclin H蛋白相对表达水平较对照组均降低。结论紫云英苷可能通过上调miR-513的表达，抑制前列腺癌C4-2B细胞增殖，诱导细胞周期停滞。

简介：摘要目的探讨下调环状RNA（circRNA）circ-BTG2与肾癌细胞增殖和迁移的相关性及其机制。方法脂质体转染阴性对照无义序列及circ-BTG2抑制剂至肾癌786-O细胞，命名为对照组和实验组。实时荧光定量聚合酶链反应（qRT-PCR）检测转染后细胞中circ-BTG2的表达。四甲基偶氮唑蓝（MTT）实验检测786-O细胞的活性。Transwell迁移实验检测786-O细胞的迁移情况。qRT-PCR和Western blotting检测Grb2协同结合蛋白2（Grb2-associated binding protein-2，GAB2）信使RNA（mRNA）的表达。结果对照组和实验组786-O细胞中circ-BTG2的表达分别为（1.70±0.20）和（0.44±0.09），实验组circ-BTG2表达被明显抑制（t＝5.69，P＜0.01）。与对照组相比，实验组786-O细胞增殖能力明显降低（P＜0.05）。对照组和实验组的迁移细胞数分别为（94.91±15.34）个和（25.48±6.60）个，实验组迁移细胞数明显减少（t＝4.16，P＜0.01）。对照组和实验组786-O细胞中GAB2 mRNA的表达分别为（2.86±0.24）和（1.27±0.18），实验组GAB2 mRNA表达被明显抑制（t＝5.25，P＜0.01）。与对照组相比，实验组GAB2蛋白表达降低。结论下调circ-BTG2通过调控癌基因GAB2表达抑制肾癌786-O细胞的增殖和迁移。

简介：摘要目的研究lncRNA FGD5-AS1对肾癌细胞增殖、侵袭的影响及分子机制。方法2020年7月至2021年2月，采用实时荧光定量聚合酶链式反应（qRT-PCR）检测FGD5-AS1在肾癌细胞中的表达。以表达最高的肾癌细胞为对象，分别转染小干扰siRNA-FGD5-AS1质粒（实验组）和阴性对照质粒（对照组）。qRT-PCR检测FGD5-AS1和细胞因子信号转导抑制因子6（suppressor of cytokine signaling 6，SOCS6）mRNA的表达。Western blotting检测SOCS6和NF-κB信号通路蛋白表达。二苯基溴化四氮唑蓝（MTT）实验和Transwell侵袭实验检测细胞增殖和侵袭。结果肾癌细胞株中FGD5-AS1表达均高于近端肾小管细胞（P＜0.01），FGD5-AS1在ACHN细胞中表达最多（P＜0.01）。对照组和实验组FGD5-AS1表达分别为（1.01±0.09）和（0.20±0.03），差异有统计学意义（t=8.46，P＜0.01）；SOCS6 mRNA的表达分别为（0.33±0.05）和（1.02±0.13），差异有统计学意义（t=5.05，P＜0.01）。与对照组相比，实验组SOCS6蛋白表达增加，NF-κB信号通路蛋白表达均明显降低，实验组ACHN细胞增殖能力降低（均P＜0.05）。对照组和实验组的侵袭细胞数分别为（80.49±10.50）个和（32.29±8.03）个，差异有统计学意义（t=3.65，P＜0.05）。结论FGD5-AS1在肾癌细胞株中表达增加，下调FGD5-AS1表达可通过正向调控SOCS6基因表达抑制肾癌细胞的增殖和侵袭。

简介：摘要目的观察长链非编码RNA(lncRNA)PEBP1P2在肾细胞癌组织中的表达及对肾细胞癌细胞增殖和迁移的影响。方法采用实时定量聚合酶链反应(qPCR)检测51例肾细胞癌组织及肾细胞癌细胞株中PEBP1P2的表达。以PEBP1P2表达最低的A498细胞为转染对象，设转染PEBP1P2质粒的细胞为PEBP1P2组，转染阴性对照质粒的细胞为NC组。qPCR检测两组细胞PEBP1P2的表达。MTT法和Transwell迁移实验检测肾细胞癌细胞的增殖能力和迁移能力。qPCR和Western blotting法分别检测半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶招募域家族分子10(CARD10)基因及NF-κB通路蛋白的表达。计量资料以均数±标准差(Mean±SD)表示，组间比较采用LSD-t检验。结果肾细胞癌组织中PEBP1P2的表达低于癌旁组织(t＝4.89，P<0.01)。肾细胞癌细胞中PEBP1P2的表达低于正常肾小管上皮细胞(P<0.01)。PEBP1P2组和NC组A498细胞中PEBP1P2表达分别为(11.01±1.26)和(1.06±0.19)，PEBP1P2组明显高于NC组(t＝7.81，P<0.01)。过表达PEBP1P2可显著抑制肾细胞癌细胞的增殖能力(P<0.05)和迁移能力(t＝3.65，P<0.05)。过表达PEBP1P2可显著抑制肾细胞癌A498细胞中CARD10基因的表达(t＝6.83，P<0.01)，抑制NF-κB信号通路蛋白的转导。结论PEBP1P2在肾细胞癌组织表达明显降低，过表达PEBP1P2可显著抑制肾细胞癌A498细胞的增殖和迁移能力，其分子机制可能是PEBP1P2通过下调CARD10基因表达抑制NF-κB信号通路转导。

简介：摘要目的探讨长链非编码RNA(lncRNA)AC068768.1对肾癌细胞周期和增殖能力的影响及分子机制。方法采用实时定量聚合酶链反应(qPCR)检测AC068768.1在肾癌细胞系中的表达情况。以AC068768.1表达最低的OS-RC-2细胞为转染对象，设转染阴性对照质粒的OS-RC-2为对照组，转染AC068768.1质粒为AC068768.1组。qPCR检测转染OS-RC-2细胞中AC068768.1的表达。通过流式细胞术和四甲基偶氮唑蓝比色(MTT)增殖实验检测AC068768.1对OS-RC-2细胞周期和增殖能力的影响。生物信息学方法预测AC068768.1可能结合的微小RNA(miRNA)。qPCR检测miRNA及下游基因mRNA的表达，Western blotting法检测下游基因蛋白的表达。计量资料以均数±标准差(Mean±SD)表示，组间比较采用独立样本t检验，多组间比较采用单因素方差分析。结果与正常肾小管上皮细胞相比，AC068768.1在肾癌细胞系中的表达显著降低，差异明显具有统计学意义(P<0.01)。AC068768.1组OS-RC-2细胞AC068768.1的表达显著高于对照组，差异明显具有统计学意义(P<0.01)。上调AC068768.1表达可抑制肾癌细胞周期(P<0.05)和增殖能力(P<0.05)。miR-21-5p可能是AC068768.1的功能性靶基因。上调AC068768.1可明显抑制miR-21-5p表达(P<0.01)，促进金属蛋白酶组织抑制因子3(TIMP3)基因表达(P<0.01)。结论AC068768.1通过调节miR-21-5p表达，促进TIMP3基因表达，进而抑制肾癌OS-RC-2细胞周期和增殖能力。

简介：摘要目的探讨长链非编码RNA(lncRNA)MTUS2-AS2在膀胱癌组织中的表达及其对膀胱癌细胞增殖和侵袭的影响。方法荧光实时定量PCR(qRT-PCR)检测63例膀胱癌组织和癌旁组织、膀胱癌细胞系(BIU-87、J82、T24、5637)和正常膀胱上皮细胞系SV-HUC-1中的MTUS2-AS2表达。以MTUS2-AS2表达最低的J82细胞进行研究，分为对照组(转染载有无意义序列的对照质粒)和实验组(转染载有MTUS2-AS2表达序列的质粒)。qRT-PCR检测转染效率。MTS法和Transwell侵袭实验检测J82细胞的增殖和侵袭能力。qRT-PCR检测J82细胞中趋化素样因子超家族成员5(CMTM5)mRNA的表达，Western blot检测两组细胞中CMTM5、PI3K-AKT信号通路蛋白的表达。结果膀胱癌组织MTUS2-AS2的表达低于癌旁组织(P<0.01)，膀胱癌细胞系MTUS2-AS2的表达明显低于正常膀胱上皮细胞(P<0.05)，J82细胞中MTUS2-AS2的表达最少(P<0.01)。与对照组相比，实验组J82细胞中MTUS2-AS2的表达明显增加(P<0.01)。与对照组相比，实验组J82细胞增殖活力明显降低(P<0.05)，细胞侵袭能力明显降低(P<0.01)。与对照组相比，实验组J82细胞中CMTM5 mRNA和蛋白表达增加(P<0.01)，PI3K-AKT信号通路蛋白表达降低(P<0.05)。结论MTUS2-AS2在膀胱癌组织和细胞系中呈低表达，MTUS2-AS2可通过上调CMTM5基因的表达，抑制J82细胞的增殖和侵袭能力。

简介：摘要目的探讨长链非编码RNA(lncRNA)COX10-AS1在肾癌组织和细胞系中的表达及其对肾癌细胞增殖和迁移的影响。方法荧光实时定量PCR(qRT-PCR)检测经病理确诊为肾癌组织和癌旁组织的手术标本、肾癌细胞系(786-O、CaKi-1、A498、ACHN)和正常肾小管上皮细胞系(HK-2)中COX10-AS1的表达。以表达最低的ACHN细胞为研究对象，分为对照组和实验组，对照组细胞转染载有无意义序列的阴性对照质粒，实验组细胞转染载有COX10-AS1表达序列的质粒。qRT-PCR检测两组细胞中COX10-AS1的表达水平，MTS法和细胞划痕实验检测ACHN细胞的增殖和迁移能力。qRT-PCR检测两组细胞中MFN2 mRNA的表达水平，免疫印迹法(Western blotting)检测两组细胞中MFN2、Ras-NF-κB信号通路蛋白的表达情况。计量资料以均数±标准差(Mean±SD)表示，两组间比较采用t检验，多组间比较采用单因素方差分析。结果肾癌组织COX10-AS1表达明显低于癌旁组织(P<0.01)，肾癌细胞系COX10-AS1表达明显低于肾小管上皮细胞(P<0.05)，ACHN细胞中COX10-AS1的表达最低(P<0.01)，上述差异均具有统计学意义。与对照组细胞相比，实验组ACHN细胞中COX10-AS1的表达明显增加，差异具有统计学意义(P<0.01)。与对照组细胞相比，实验组ACHN细胞增殖活力明显降低，细胞迁移能力明显降低，差异均具有统计学意义(P<0.01)。与对照组细胞相比，实验组ACHN细胞中MFN2 mRNA的表达明显增加(P<0.01)，MFN2蛋白表达明显增加(P<0.01)，Ras-NF-κB信号通路蛋白表达明显降低(P<0.05)，上述差异均具有统计学意义。结论COX10-AS1在肾癌组织和细胞系中表达降低，COX10-AS1可能通过促进MFN2基因的表达，抑制ACHN细胞的增殖和迁移能力。

简介：摘要目的探讨长链非编码RNA AL117378.1对膀胱癌细胞增殖和侵袭的影响。方法选取2016年8月—2017年12月鄂东医疗集团黄石市中心医院收治的14例膀胱癌患者的肿瘤组织及癌旁组织，采用实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)检测14例膀胱癌组织及对应的癌旁组织、膀胱癌细胞株(5637、J82、T24、BIU-87)及对应的人膀胱正常上皮细胞(SV-HUC-1)中AL117378.1的表达水平。以表达水平最低的膀胱癌细胞株为对象分别转染阴性对照质粒(对照组)和载有AL117378.1的质粒(实验组)。qRT-PCR检测转染后细胞中AL117378.1和非受体型蛋白质酪氨酸磷酸酶9(PTPN9) mRNA的表达水平。Western blotting检测PTPN9、上皮性钙黏附蛋白(E-cadherin)、α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、细胞周期蛋白依懒性激酶4(CDK4)和细胞周期蛋白A2(Cyclin A2)蛋白的表达水平。四甲基偶氮唑蓝(MTT)实验和Transwell侵袭实验分别检测两组细胞的增殖能力和侵袭能力。计量资料以均数±标准差(Mean±SD)表示，组间比较采用两独立样本t检验。结果膀胱癌组织中AL117378.1的表达低于癌旁组织(P<0.01)。膀胱癌细胞株中AL117378.1的表达均低于人膀胱正常上皮细胞(P<0.01)，其中AL117378.1在J82细胞中的表达水平最低(P<0.01)。对照组和实验组J82细胞中AL117378.1的相对表达量分别为1.02±0.11和7.96±1.06，差异具有统计学意义(t＝6.51，P<0.01)；PTPN9 mRNA的相对表达量分别为1.01±0.08和4.99±0.50，差异具有统计学意义(t＝7.84，P<0.01)。Western blotting实验结果显示，PTPN9和E-cadherin蛋白表达升高，α-SMA、CDK4和Cyclin A2蛋白表达降低。MTT实验结果显示，转染AL117378.1的细胞增殖能力明显下降(P<0.05)。Transwell侵袭实验结果显示，对照组和实验组的侵袭细胞数分别为(97.96±13.71)个和(38.02±7.51)个，差异具有统计学意义(t＝3.84，P<0.01)。结论AL117378.1在膀胱癌组织和细胞株(5637、J82、T24、BIU-87)中表达均明显减少，AL117378.1可通过正向调控PTPN9基因的表达明显抑制膀胱癌细胞的增殖和侵袭。