简介：摘要目的观察并比较脐带间充质干细胞（MSC）及其条件培养基（MSC-CM）对脓毒症小鼠肠道菌群的调节作用。方法将28只6~8周龄雌性C57BL/6J小鼠随机分为假手术组（Sham组）、脓毒症模型组（CLP组）、脓毒症+MSC干预组（CLP+MSC组）、脓毒症+MSC-CM干预组（CLP+MSC-CM组），每组7只。通过盲肠结扎穿孔术（CLP）构建脓毒症小鼠模型；Sham组不进行盲肠结扎和穿孔，余操作同CLP组。CLP+MSC组和CLP+MSC-CM组术后6 h分别经腹腔注射0.2 mL 1×106 MSC和0.2 mL浓缩MSC-CM；Sham组和CLP组腹腔注射0.2 mL无菌磷酸盐缓冲液（PBS）。通过组织苏木素-伊红（HE）染色及结肠长度评估组织病理学改变，通过酶联免疫吸附试验（ELISA）检测血清炎症因子水平，通过流式细胞术检测腹腔巨噬细胞极化表型，通过16S rRNA测序分析肠道菌群。结果与Sham组比较，CLP组小鼠肺组织出现显著炎症病变，结肠长度明显缩短（cm：6.00±0.26比7.11±0.09），血清促炎因子白细胞介素-1β（IL-1β）水平显著升高（ng/L：432.70±17.68比353.70±17.01），腹腔巨噬细胞F4/80+比例显著升高〔（68.25±3.41）%比（50.84±4.98）%〕，抗炎型巨噬细胞F4/80+CD206+比例显著降低〔（45.25±6.75）%比（66.66±3.36）%〕，肠道菌群α多样性sobs指数显著降低（118.50±23.25比255.70±6.87），物种组成结构改变，与转录、次生代谢物生物合成及运输与代谢、糖类运输与代谢、信号转导功能相关的菌群的相对丰度显著降低（均P<0.05）。与CLP组比较，MSC和MSC-CM干预可不同程度地减轻小鼠肺组织和结肠组织病理损伤，延长结肠长度（cm：6.53±0.27、6.87±0.18比6.00±0.26），降低血清IL-1β的水平（ng/L：382.10±16.93、343.20±23.61比432.70±17.68），降低腹腔巨噬细胞F4/80+比例〔（47.65±3.93）%、（48.68±2.51）%比（68.25±3.41）%〕，增加腹腔抗炎型巨噬细胞F4/80+CD206+比例〔（52.73±5.02）%、（66.38±4.73）%比（45.25±6.75）%〕，上调肠道菌群α多样性sobs指数（182.50±16.35、214.00±31.18比118.50±23.25），且以MSC-CM组变化最显著（均P<0.05）。同时，MSC和MSC-CM干预可重塑肠道菌群的物种组成，并表现出相关菌群相对丰度升高的趋势。结论MSC和MSC-CM均可改善脓毒症小鼠组织炎症损伤，调节肠道菌群，且MSC-CM的干预效果优于MSC。

简介：摘要目的研究转录激活因子6（ATF6）与需肌醇酶1-X-框结合蛋白1（IRE1-XBP1）在氧糖剥夺/复氧（OGD/R）损伤小鼠海马神经元（HT22）细胞中的交互作用。方法复制OGD/R损伤HT22细胞模型，观察OGD/R后不同时间点（0、3、6、12、24 h）内质网应激（ERS）、细胞活性和凋亡的变化。将对数生长期的HT22细胞分为空白对照组、对照+ATF6激动剂AA147组、对照+IRE1抑制剂4μ8c组、OGD/R模型组、OGD/R+AA147组、OGD/R+4μ8c组（AA147组和4μ8c组于全程添加10 μmol/L AA147或16 μmol/L 4μ8c）。采用蛋白质免疫印迹试验（Western blotting）检测各组HT22细胞ERS相关蛋白〔葡萄糖调节蛋白78（GRP78）、磷酸化需肌醇酶1（p-IRE1）、磷酸化真核细胞翻译起始因子2α（p-eIF2α）〕以及凋亡相关蛋白Bcl-2、Bax、天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶3（caspase-3）、活化caspase-3的表达；采用实时荧光定量聚合酶链反应（RT-qPCR）检测ERS相关基因以及ATF6〔同型半胱氨酸内质网应激泛素样结构域1（Herpud1）、蛋白二硫键异构酶家族成员4（Pdia4）、Lin-12样抑制子/增强子（Sel1L）〕和剪接型X-框结合蛋白1〔XBP1s，包括DnaJ热休克蛋白成员B9（Erdj4）、Sec24相关基因家族成员D（Sec24d）、信号受体序列3（Ssr3）〕介导的转录反应相关基因的mRNA表达；采用细胞增殖与毒性检测试剂盒（CCK-8）检测细胞活性；采用免疫荧光法检测活化caspase-3表达。结果与空白对照组比较，ERS相关蛋白p-IRE1和p-eIF2α的蛋白表达量分别在OGD/R 12 h、OGD/R 3 h升高（p-IRE1/β-actin：2.09±0.10比1.00±0.00，p-eIF2α/β-actin：1.39±0.11比1.00±0.00，均P<0.01），ERS相关基因ATF6、XBP1s、非剪接型X-框结合蛋白1（XBP1u）、转录激活因子4（ATF4）、CCAAT/增强子结合蛋白同源蛋白（CHOP）的mRNA表达量在OGD/R后不同时间点也明显升高，表明ERS在OGD/R作用的HT22细胞中被激活。与OGD/R模型组比较，OGD/R+AA147组p-IRE1蛋白表达量无改变，但XBP1s和XBP1u的mRNA表达量明显下降〔XBP1s（2-ΔΔCt）：0.76（0.71，0.92）比1.13（1.03，1.29），XBP1u（2-ΔΔCt）：0.29±0.05比0.52±0.04，均P<0.01〕，而XBP1s介导的转录反应相关基因表达量无明显改变。与OGD/R模型组比较，在使用4μ8c后短链ATF6（sATF6）和GRP78的蛋白表达量无明显改变，ATF6介导的转录反应相关基因的mRNA也无明显改变。提示ATF6的激活能抑制XBP1s和XBP1u的mRNA表达，但ATF6与XBP1s介导的转录反应无交互作用。与空白对照组比较，HT22细胞活性在OGD/R 3 h时显著降低〔（44.64±5.12）%比（99.13±5.76）%，P<0.01〕，凋亡相关蛋白Bax/Bcl-2比值和活化caspase-3/caspase-3比值分别在OGD/R 3 h和OGD/R 0 h显著升高（Bax/Bcl-2比值：6.15±1.65比1.00±0.00，活化caspase-3/caspase-3比值：17.48±2.75比1.00±0.00，均P<0.01），表明凋亡在OGD/R作用的HT22细胞中被激活。与OGD/R模型组比较，OGD/R+AA147组细胞活性显著下降〔（36.52±17.78）%比（69.90±9.43）%，P<0.01〕，Bax/Bcl-2比值和活化caspase-3/caspase-3比值明显升高（Bax/Bcl-2比值：2.06±0.31比1.10±0.25，活化caspase-3/caspase-3比值：3.35±0.59比0.55±0.09，均P<0.01）。结论在OGD/R损伤HT22细胞中，ATF6和XBP1s介导的转录反应无明显交互作用，但AA147激活的ATF6能抑制XBP1s和XBP1u的mRNA表达并促进应激HT22细胞中死亡的发生。

简介：摘要心搏骤停（CA）及心肺复苏（CPR）后的缺血/再灌注（I/R）过程是导致包括心功能障碍和脑损伤在内的心搏骤停后综合征（PCAS）的重要原因。内质网中蛋白质平衡失调即内质网应激（ERS）是I/R损伤诱导的病理变化之一。未折叠蛋白反应（UPR）是细胞在ERS下触发的适应性反应。调控UPR的各分支从而缓解ERS以促进细胞存活是极具前景的治疗I/R损伤的方式。其中UPR的活化转录因子6（ATF6）信号通路的激活能通过促进内质网内蛋白平衡恢复及减少氧自由基等方式保护多种组织免受I/R损伤。本文围绕ATF6的结构和功能及其在心脏和脑I/R损伤中的作用和潜在治疗靶点等进行综述，以期为探索PCAS的有效治疗方式提供新思路。

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简介：摘要目的比较窒息与电刺激两种方法诱发心搏骤停大鼠模型脑损伤的严重程度。方法将42只健康成年雄性SD大鼠按随机数字表法分为假手术组（n＝6）、窒息组（n＝18）和电刺激组（n＝18）。各组大鼠均给予气管插管机械通气并经股动静脉置管监测血压和补液。窒息组夹闭气管导管致大鼠心搏骤停，电刺激组经食道电刺激诱发大鼠心搏骤停，均于4 min后开始心肺复苏（CPR）；假手术组大鼠仅麻醉后气管插管及经股动静脉置管，不诱发心搏骤停。观察模型大鼠72 h存活情况，并绘制Kaplan-Meier生存曲线。分别于复苏后24 h和72 h测定大鼠神经功能缺损评分（NDS）；取下腔静脉血，采用酶联免疫吸附试验（ELISA）测定血清脑损伤相关指标神经元特异性烯醇化酶（NSE）和钙结合蛋白S100B的水平；取脑组织，苏木素-伊红（HE）染色后光镜下观察大脑海马CA1区病理学改变。结果窒息组和电刺激组均成功诱发出心搏骤停，CPR后自主循环恢复（ROSC）率分别为94.4%（17/18）和88.9%（16/18）。Kaplan-Meier生存曲线分析显示，窒息组大鼠72 h累积存活率与电刺激组比较差异无统计学意义（Log-Rank检验：χ2＝0.040，P＝0.841）。复苏后24 h窒息组和电刺激组大鼠NDS均显著高于假手术组（分：37.50±4.26、32.17±4.02比8.33±2.33，均P<0.01）；复苏后72 h两个模型组NDS评分有下降趋势，以电刺激组下降更为显著，与窒息组比较差异有统计学意义（分：14.00±2.89比26.33±4.84，P<0.05）。ELISA结果显示，复苏后24 h窒息组和电刺激组大鼠血清NSE水平均较假手术组明显升高（μg/L：1.02±0.07、1.02±0.02比0.87±0.02，均P<0.05）。复苏后72 h窒息组血清NSE水平仍明显高于假手术组，差异有统计学意义（μg/L：1.03±0.05比0.87±0.02，P<0.01）；而电刺激组血清NSE水平已恢复至接近正常水平，与假手术组相比差异无统计学意义（μg/L：0.96±0.04比0.87±0.02，P>0.05）。各组大鼠复苏后各时间点S100B水平比较差异均无统计学意义。光镜下显示，与假手术组相比，复苏后24 h两个模型组大鼠海马CA1区均无明显神经元损伤；72 h时两组有部分神经元损伤，以窒息组较电刺激组更严重。结论窒息法和电刺激法诱发心搏骤停并成功复苏后的大鼠均有一定程度的脑损伤，以窒息法诱发的心搏骤停后脑损伤较电刺激法更严重。

简介：摘要目的比较右美托咪定与咪达唑仑对接受无创机械通气的重型新型冠状病毒肺炎（简称新冠肺炎）患者的治疗作用及安全性。方法回顾2020年1月23日至2月15日武汉大学人民医院重症医学科人员前往武汉市金银潭医院支援期间收治的进行无创机械通气的重型新冠肺炎患者的临床资料。收集患者镇静前及镇静1、12、24 h时的Ramsay镇静评分、平均动脉压（MAP）、心率（HR）、呼吸频率（RR）、动脉血氧分压（PaO2），夜间睡眠时间，以及发生过度镇静、舌后坠、腹胀、误吸、心动过缓、24 h转有创机械通气等不良反应的情况。按照镇静药物使用不同将患者分别纳入对照组（未使用镇静药物）、右美托咪定组和咪达唑仑组，比较3组间各指标的变化差异。结果14例患者应用右美托咪定，负荷量1 μg/kg 10 min，以0.2～0.7 μg·kg-1·h-1维持；9例患者应用咪达唑仑，负荷量0.05 mg/kg 2 min，以0.02～0.10 mg·kg-1·h-1维持；12例患者由于先前医院条件限制或拒绝而未使用镇静药物。右美托咪定组和咪达唑仑组镇静后Ramsay评分均维持在2～3分，各时间点Ramsay评分明显高于对照组，而右美托咪定组与咪达唑仑组间差异无统计学意义。右美托咪定和咪达唑仑镇静治疗后MAP逐渐下降，镇静1 h即显著低于镇静前，且镇静24 h均显著低于对照组〔mmHg（1 mmHg＝0.133 kPa）：109.7±11.5、107.1±12.3比121.1±13.3，均P<0.05〕。镇静治疗后HR逐渐下降，镇静12 h即显著低于镇静前，且右美托咪定组镇静12 h后HR显著低于对照组（次/min：12 h为84.0±13.9比92.8±15.4，24 h为81.0±16.7比92.6±12.7，均P<0.05）。3组治疗后PaO2均逐渐升高，RR逐渐下降；右美托咪定组和咪达唑仑组镇静12 h PaO2即显著高于对照组〔cmH2O（1 cmH2O＝0.098 kPa）：79.0±6.5、79.0±8.9比70.0±7.8，均P<0.05〕，镇静1 h起RR即显著低于对照组（次/min：34.0±3.9、33.8±4.6比39.0±3.6，均P<0.05）。右美托咪定组与咪达唑仑组间各时间点MAP、HR、PaO2、RR比较差异均无统计学意义。右美托咪定组和咪达唑仑组睡眠时间较对照组明显延长（h：4.9±1.9、5.8±2.4比3.0±1.8，均P<0.05），但镇静两组间差异无统计学意义（P>0.05）。3组均有不良事件发生，咪达唑仑组过度镇静伴舌后坠、腹胀2例，其中伴误吸1例，因顽固性低氧血症、意识障碍插管各1例；右美托咪定组发生心动过缓2例，因顽固性低氧血症插管1例；对照组因顽固性低氧血症插管4例。结论无创机械通气是重型新冠肺炎患者重要的呼吸支持技术，合理镇静可以增加无创机械通气效率。右美托咪定镇静相比咪达唑仑更为安全有效，不良事件少，但应注意监测HR及血压。

简介：摘要1例63岁女性患者因左腹疼痛半年入住武汉大学人民医院消化内科。体格检查示左下腹轻压痛，无反跳痛，墨菲征阴性。腹部影像学和CT小肠造影检查均提示空肠炎性病变，给予IBD诊断性治疗后症状未缓解。行小肠镜检查后活组织病理学结果显示为空肠血吸虫病。患者接受抗血吸虫、保护肠黏膜等对症治疗后腹痛症状缓解。