简介：摘要目的构建靶向整合素αvβ3诊疗一体化放射性分子177Lu－伊文思蓝(EB)－精氨酸－甘氨酸－天冬氨酸(RGD)并探讨其用于非小细胞肺癌(NSCLC)－患者来源异种移植瘤(PDX)模型显像及治疗的效果。方法将RGD肽与白蛋白结合基团EB相连接，构建特异性靶向整合素αvβ3的EB－RGD，并经螯合剂1，4，7，10－四氮杂环十二烷－1，4，7，10－四乙酸(DOTA)偶联完成靶向分子177Lu标记。构建68只NSCLC－PDX模型鼠，取28只注射177Lu－EB－RGD或177Lu－RGD行microSPECT显像和生物分布研究；另行177Lu－EB－RGD放射靶向治疗实验：取PDX模型鼠40只，分为生理盐水组(A组)、18.5 MBq 177Lu－RGD组(B组)、18.5 MBq 177Lu－EB－RGD组(C组)、29.6 MBq 177Lu－EB－RGD组(D组)，每组10只，观察治疗后50 d内模型鼠肿瘤体积变化情况。2组间比较采用两独立样本t检验。结果177Lu－EB－RGD的标记率在95%以上，比活度为(55±14) GBq/μmol，其体外稳定性好，放化纯大于95%。注射177Lu－EB－RGD后4～96 h，NSCLC－PDX模型鼠肿瘤清晰可见，注射后4、24、72、96 h的肿瘤/肌肉摄取比值(T/M)分别为7.34±0.67、14.63±3.82、15.69±3.58及15.99±5.42；生物分布结果示177Lu－EB－RGD摄取[每克组织百分注射剂量率(%ID/g)]与SPECT显像结果一致，且4 h时的177Lu－EB－RGD在肿瘤中的摄取明显高于177Lu－RGD[(10.15±1.17)与(3.30±1.47) %ID/g；t＝18.60，P<0.05]。177Lu－EB－RGD治疗后，A组与B组模型鼠的肿瘤体积均快速增加；而C组与D组肿瘤体积呈持续降低趋势，在第28天时C组与D组肿瘤均已肉眼不可见，且在随后的监测时间内未见复发。结论177Lu－EB－RGD能靶向αvβ3阳性的NSCLC－PDX模型，显像效果好，对肿瘤生长有明显抑制作用，有望为晚期靶向治疗耐药或无效的肺癌患者提供新的治疗策略。

简介：摘要目的探讨基于靶向整合素αvβ3的放射性核素靶向治疗(TRT)联合基于程序性死亡受体蛋白配体1(PD－L1)的免疫治疗的抗肿瘤疗效及其潜在机制。方法制备可特异性靶向整合素αvβ3的分子探针177Lu－伊文思蓝(EB)－精氨酸－甘氨酸－天冬氨酸(RGD)，并测定其放射性比活度与放化纯。建立结肠癌MC38荷瘤鼠模型，进行生物分布及microSPECT显像研究。通过监测小鼠肿瘤体积和体质量变化来评估疗效与安全性(各组n＝9)；采用流式细胞术分析A组(对照组；生理盐水治疗)、B组(177Lu－EB－RGD单药治疗，18.5 MBq)、C组(PD－L1抗体单药治疗，10 mg/kg)和D组(联合治疗，18.5 MBq 177Lu－EB－RGD与10 mg/kg PD－L1)荷瘤鼠经治疗后肿瘤微环境(PD－L1＋免疫细胞、CD8＋T细胞和调节性T细胞)的改变(各组n＝3)。采用重复测量方差分析、两独立样本t检验分析数据。结果177Lu－EB－RGD放射性比活度为(55.85±14.00) GBq/μmol，放化纯大于95%。MicroSPECT显像中，177Lu－EB－RGD在荷瘤鼠肿瘤中清晰可见，且摄取率高、滞留时间长，注射后24 h肿瘤/肌肉比值达14.87±0.88，而在正常组织摄取及滞留较少；生物分布结果显示，注射后4 h 177Lu－EB－RGD较177Lu－RGD表现出明显增高的肿瘤摄取[(12.00±1.60)和(3.69±0.37)每克组织百分注射剂量率(%ID/g)；t＝8.63，P<0.01]。在治疗开始后第6天，A～D各组小鼠肿瘤体积差异有统计学意义(F＝7.32，P＝0.03)，在监测时间内，D组平均肿瘤体积最小，治疗效果最好，7/9的荷瘤鼠表现为完全缓解，且未出现肿瘤复发。流式细胞术结果显示，TRT可导致肿瘤微环境中PD－L1表达上调，B组与A组PD－L1＋免疫细胞数差异有统计学意义(CD45＋/PD－L1: 2.34%与0.95%，CD11b＋/PD－L1：2.41%与0.66%；t值：11.17和8.70，均P<0.01)，而免疫治疗及联合治疗使C、D组微环境中的CD8＋T细胞浸润较A组急剧增加(2.07%与0.26%，2.71%与0.26%；t值：4.10和6.03，均P<0.05)。结论TRT联合免疫治疗可协同增强抗肿瘤疗效，有望应用于可接受TRT的转移性肿瘤患者的治疗。