简介:真核细胞的房间的最惹人注目的形态特征是各种各样的围住膜的分隔空间的存在。包括细胞器和短暂运输中介,这些分隔空间不是静态的。更确切地说,蛋白质和膜的动态交换被需要维持细胞的动态平衡。膜动员的最戏剧的例子之一在macroautophagy的过程期间被看见。Macroautophagy是为长寿蛋白质和细胞器的降级的主要细胞的小径。响应环境暗示,例如饥饿或应力的另外的类型,房间生产唯一的膜结构,phagophore.Thephagophore扣押它形成一个双膜cytosolic泡的细胞质,anautophagosome。在结束之后,autophagosome与溶酶体熔化或在酵母的一个液泡,它交付水疗院放射激光与它的货物,和产生大分子一起毁坏内部autophagosome膜回来被释放进cytosol因为reuse.Autophagy因此是正在骑车过程,允许房间熬过滋养的限制的时期;然而,它有一个更宽的生理的角色,参予开发和老化,并且另外在对病原体侵略,癌症和某些neurodegenerative的保护疾病。在许多情况中,autophagy的角色通过autophagy相关的蛋白质的研究被识别,Atg6/Beclin1。这蛋白质是类脂化合物kinase建筑群的部分,并且最近的研究建议它在协调autophagy并且在反对apoptosis的细胞的死亡过程的thecytoprotective功能起一个中央作用。这里,我们总结我们Atg6/Beclin的当前的知识1在在细胞的不同模型有机体和它的唯一的功能。
简介:Brassinosteroids(BR)被transmembrane受体和戏察觉在植物生长和开发的重要角色,以及响应环境刺激的房间。transmembrane受体BRI1能直接绑在brassinolide(BL),并且BAK1与BRI1交往提高发信号的调停BRI1的BR。我们的以前的研究显示了那膜类固醇绑定蛋白质(MSBP1)1能在vitro绑在BL并且否定地涉及BR发信号。进一步阐明内在的机制,我们这里证明MSBP1明确地以一种BL独立的方式在vivo与BAK1的细胞外的领域交往。由MSBP1的增加的表示的压制的房间扩大和BR回答能被overexpressingBAK1或它的细胞内部的kinase领域恢复,建议MSBP1可以压制通过与BAK1交往发信号的BR。Subcellular本地化研究表明MSBP1和BAK1对血浆膜和endocytic泡局部性,MSBP1加速BAK1endocytosis,它导致由向内涵体转移BAK1的平衡发信号的压制的BR。确实,提高了MSBP1表示还原剂在在vivo的BRI1和BAK1之间的相互作用,表明那MSBP1在发信号的BR的早步充当一个否定因素小径。
简介:Changesinthedistributionof1P1-antigeninthedevelopingchickretinahavebeenexaminedbyindriectimmunofluorescencestainingtechniqueusingthenovelmonoclonalantibody(MAb)1P1.Expressionofthe1P1antigenwasfoundtoberegulatedinradialaswellasintangentialdimensionoftheretina,beingpreferentiallyorexclusivelylocatedintheinnerandouterplexiformlayersoftheneuralretinadependingonthestagesofdevelopment,Withtheonsetoftheformationoftheinnerplexiformlayer1P1antigenbecomesexpressedintheretina.Withprogressingdifferentiationoftheinnerplexiformlayer1P1immunofluorescencerevealed2subbandsatE9and6subandsatE18,Atpostnatalstages(afterP3)immunoreactivitywasreducedinaninside-outsidesequenceleadingtothecompleteabsenceofthe1P1antigeninadulthood.1P1antigenexpressionintheouterplexiformlayerwasalsosubjecttodevelopmentalregulation.Thespation-temporalpatternof1P1antigenexpressionwascorrelatedwiththetimecourseofhistologicaldifferentationofchickretina,namelythesynapserichplexiformlayers.Whetherthe1P1antigenwasfunctionallyinvolvedindendriteextensionandsynapseformationwasdiscussed.
简介:兼容丑恶纸巾的表面上的花粉萌芽是为植物授精的必要的步。这里,我们报导Arabidopsis变异的bcl1是由于花粉萌芽的失败不育的男性。我们证明bcl1异种等位基因不能被男配偶体播送,没有同型结合的bcl1异种被获得。花粉发育阶段的分析显示bcl1变化影响花粉萌芽然而并非花粉成熟。分子的分析证明花粉萌芽的失败被AtBECLIN1的混乱引起。AtBECLIN1在成熟花粉主要被表示并且与重要相同编码蛋白质到在酵母为autophagyandvacuolar蛋白质排序的过程(VPS)要求的Beclin1/Atg6/Vps30。我们也证明AtBECLIN1为正常被要求植物开发,和那与autophagy,VPS和glycosylphosphatidylinositolanchor系统有关的基因,被AtBECLIN1的缺乏影响。
简介:Arabidopsisthaliana嘘一deacetylase1(AtHD1或AtHDA19),酵母RPD3的一个相当或相同的事物,是在植物的许多生理、发展的过程的一个全球管理者。尽管有为在植物基因规定和开发的AtHD1的一个角色的基因证据,AtHD1的生物化学、细胞的性质糟糕被理解。这里,我们在vivo报导AtHD1的细胞的本地化模式并且嘘在vitro的一项deacetylase活动。绿荧光灯的蛋白质(GFP)的短暂、稳定的表示在洋葱房间标注了AtHD1并且分别地,在转基因的Arabidopsis的根,种子和叶子表明AtHD1在euchromatic区域大概在原子核是局部性的并且从核排除。AtHD1的本地化模式与涉及核形成和transgenes的silencing并且分别地重复了DNA元素的AtHD2和AtHDA6的那些不同。另外,一hist一deacetylase活动试金证明在细菌生产的recombinantAtHD1示威了一特定嘘在vitro的一项deacetylase活动。数据建议AtHD1是原子蛋白质并且拥有嘘为对植物生长和开发重要的全球transcriptional规定负责的一项deacetylase活动。
简介:TheyeastHAL1genewasintroducedintoArabidopsisthalianabyAgrobacteriumtumefaciens-mediatedtransformationwithvacuuminfiltrationunderthecontrolofCaMV35Spromoter.Thirty-threeindividualkanamycinresistantplantswereobtainedfrom75,000seeds.SouthernblottinganalysisindicatedthatHAL1genehadbeenintegratedintoallofthetransgenicplants'genomes.ThecopynumberofHAL1geneintransgenicplantswasmostly1to3bySouthernanalysis.Phenotypesoftransgenicplantshavenodifferenceswithwildtypeplants.Severalsamplesoftransformantswereself-pollinated,andprogeniesfromtransformedandnon-transformedplants(controls)wereevaluatedforsalttoleranceandgeneexpression.MeasurementofconcentrationsofintracellularK+andNa+showedthattransgeniclineswereabletoretainlessNa+thanthatofthecontrolundersaltstress.ResultsfromdifferenttestsindicatedtheexpressionofHAL1genepromotesahigherlevelofsalttoleranceinvivointhetransgenicArabidopsisplants.
简介:Brassinosteroids(BR)是植物激素的一个主要的组调整植物生长和开发。BRI1,对质膜局部性的蛋白质,当BR受体和它被建议了,工作它的kinase活动在调整BR的植物生长和开发有一个必要角色。这里,我们报导隔离和bri1的新等位基因的分子的描述,bri1-301,哪个表演中等词法显型和减少的回答到在正常生长条件下面的BR。顺序分析从GG识别了二底的改变到,导致到在BRI1kinase领域的989I的989G的变换在。kinase活动的试管内试金证明bri1-301不向BRI1底层TTL和BAK1举办可检测的autophosphorylation活动或磷酸化活动。而且,我们的结果建议甚至与极其损害的kinase活动,bri1-301仍然在调整植物生长和开发保留部分功能,它提出BRI1kinase活动是否在高等植物为调停BR的生长和开发是必要的问题。
简介:Galα(1,3)Gal(galepitope)isacarbohydrateepitopeandsynthesizedinlargeamountbyα(1,3)galactosyltransferase[α(1,3)GT]enzymeonthecellsoflowermammaliananimalssuchaspigsandmice.Humanhasnogalepitopeduetotheinactivationofα(1,3)GTgenebutproducesalargeamountofantibodies(anti-Gal)whichrecognizeGalα(1,3)Galstructuresspecifically.Inthisstudy,areplicationdeficientrecombinantadenoviralvectorAd5sGTcontainingpigα(1,3)GTcDNAwasconstructedandcharacterized.Adenoviralvector-mediatedtransferofpigα(1,3)GTgeneintohumantumorcellssuchasmalignantmelanomaA375,stomachcancerSGC-7901,andlungcancerSPC-A-1wasreportedforthefirsttime.ResultsshowedthatGalepitopedidnotincreasethesensitivityofhumantumorcellstohumancomplement-mediatedlysis,althoughhumancomplementactivationandthebindingofhumanIgGandIgMnaturalantibodiestohumantumorcellswereenhancedsignificantlyafterAd5sGTtransduction.AppearanceofgalepitopeonthehumantumorcellschangedtheexpressionofcellsurfacecarbohydratesreactingwithUlexeuropaeusI(UEAI)lectins,Viciavillosaagglutinin(VVA),Arachishypogaeaagglutinin(PNA),andGlycinemaxagglutinin(SBA)todifferentdegrees.Inaddition,noeffectofgalepitopeonthegrowthinvitroofhumantumorcellswasobservedinMTTassay.
简介:SomerecentstudiesindicatedthatGABAergicsystemisinvolvedinmammalianspermacrosomereaction(AR),butdirestevidencepertainingtotheexpressionofgatlinmammalianspermisnotyetdemonstrated.Inthisstudy,weevaluatedthepresenceof67kDaGAT1proteinandmRNAinrattestisbyWesternblottingandreversetranscription-polymerasechainreaction.Meanwhile,immunohistochemicalandimmunofluorescentanalysesalsoidentifiedGAT1proteinontheelongatedspermatidandsperm.Theseresultsindicatedthatrattestisisanovelsiteofgatlexpression.FurtherstudiesshouldbetakentoexploretheroleofGAT1proteinonspermacrosomereaction.
简介:以便学习TGF-beta1的结构功能细节,重组体老鼠TGF-beta1的成熟形式在细菌被表示。TGF-beta1(氨基酸279-390)的112氨基酸的carboxyl终端部分的合成被一个可诱导的基因表示系统基于抗菌素T7RNA控制。这个系统允许重组体TGF-beta1的活跃、选择的合成。在减少条件下面在SDS-polyacrylamide胶化上决定的表示TGF-alpha1单体的分子量是大约13kD。连续净化洗与纯化步是足够的净化表示产品到同质的单个胶化过滤结合了。氨基终端的定序表明重组体蛋白质的N终端与出版数据相同。在西方的污点分析,重组体多肽对polyclonalTGF-beta1抗体显示出优秀antigenicity。在这研究表示的成熟重组体老鼠TGF-beta1提供一个有用工具因为未来详细说明了结构、功能的研究。
简介:Thereareabout17chromosomesinyeastSaccharomycescerevisiae.Amiddlesizedchromosome,chromosomeV,waschoseninthisworkforstudyingandconstructingthephysi-calmaps.ChromosomeVfromstrainA364awasisolatedbypulsed-fieldgradientgelelectrophoresis(PFGE).GelslicescontainingchromosomeVDNAweredigestedwithtworarecuttingenzymes,NotⅠandSfiⅠ,andthree6-Ntrecognizingenzymes,SmaⅠ,SstⅡandApaⅠ.Severalstrategies-partialorcompletedigestions,digestionwithdifferentsetsoftwoenzymes,andhybrid-izationwithclonedgeneticallymappedprobes(CAN1,URA3,CEN5,PRO3,CHO1,SUP19,RAD51,RAD3)——wereusedtoaligntherestrictionfragments.Thereare9,9,15,17,and20sitesforNotⅠ,SfiⅠ,SmaⅠ,SstⅡandApaⅠrespectivelyinthemapoftheA364achromosomeV.Itstotallengthwascalculatedtobe620Kb(Kilo-bases).Thedistributionsofthecuttingsitesforthesefiveenzymesthroughthewholechromosomearenotuniform.Acomp-arisonbetweenthephysicalmapandthegeneticmapwasalsomade.
简介:细胞内部的氧化还原作用动态平衡在决定肿瘤房间的敏感到导致药的apoptosis起一个关键作用。这里,我们调查了thioredoxin-1(TRX1)的角色,氧化还原作用规定的一个关键部件,在砷三氧化物(作为(2)O(3))导致的apoptosis。在HepG(2)房间的野类型的TRX1的在表示上导致了抑制当(2)O(3)导致了细胞色素c(cytoc),释放,caspase激活和apoptosis,并且由RNAi的TRX1表示的绒毛规定敏化HepG(2)房间到当(2)O(3)导致了apoptosis。有趣地,到重量的单位(32/35)的从Cys(32/35)的TRX1的活跃地点的变化从一个apoptotic保护者把这个分子变换成一个apoptotic倡导者。以理解这变换的机制,我们从老鼠肝使用了孤立的线粒体并且发现了野类型的TRX1能保护的那重组体从apoptotic的线粒体变化。相反,TRX1的变异的形式独自得到了线粒体相关的apoptotic变化,包括mitochondrial渗透转变毛孔(mPTP)洞,mitochondrial膜潜力的损失,和cyto从线粒体的c版本。这些apoptotic效果被cyclosporineA(CsA)禁止,显示指向到mPTP的那变异的TRX1。到由2,4-dinitrochlorobenzene(DNCB)的氧化形式体内的从它的减少的形式的TRX1的改变,TRXreductase的一个特定的禁止者,也敏化的HepG(2)房间到当(2)O(3)导致了apoptosis。这些数据建议TRX1由任何一个变化在由堵住cytoc版本调整apoptosis,并且在TRX1的激活起一个中央作用或活跃地点半胱氨酸的氧化可以敏化肿瘤房间到当(2)O(3)导致了apoptosis。
简介:NAC家庭基因编码涉及多样的生物过程的植物特定的抄写因素。在这研究,ArabidopsisNAC基因ATAF1被发现被干旱导致,高咸度,abscisic酸(骆驼毛的织物),甲基jasmonate,机械伤害,并且Botrytiscinerea感染。ATAF1的重要正式就职在受到干旱或高咸度的骆驼毛的织物缺乏的变异的aba2被发现,揭示表示的骆驼毛的织物无关的机制。ArabidopsisATAF1-overexpression线显示了许多改变的显型,包括侏儒症和短主要的根。而且,在vivo,实验显示ATAF1是真正的管理者modulating植物对许多不能生活的压力和necrotrophic病原体感染的回答。在Arabidopsis的ATAF1的Overexpression增加了植物敏感到骆驼毛的织物,盐,和氧化压力。特别,ATAF1overexpression种,然而并非异种排队显示出的显著地提高的植物忍耐到干旱。另外,ATAF1overexpression提高了植物危险性到necrotrophic病原体B。cinerea,但是没改变P的无毒害或剧毒的紧张引起的疾病症状。syringaepv西红柿DC3000。转基因的植物overexpressingATAF1对氧化应力过分敏感,建议反应的氧中介可能与响应病原体和不能生活的压力的调停ATAF1的发信号有关。
简介:尽管许多进步在理解花的机关身份怎么在花的发展期间是坚定的被取得了,更少花的机关怎么在晚花的发展阶段被详细描述被知道。这里,我们描述新奇花的异种,起皱的花瓣和stamens1(wps1),它在花瓣和雄蕊的发展显示出缺点。基因分析显示那wps1异种相应于在染色体3的长手臂的一个单个后退的地点。在wps1异种的花的机关的早发展在野类型类似于那,并且异种的malfunction在晚发展的阶段开始,显示花瓣和雄蕊的外观上的一个缺点。在成熟的花,在异种的花瓣和雄蕊细丝被起皱或合拢,并且在花瓣和雄蕊细丝的L1层下面的细胞的形态学是反常的。花的机关身份基因的表达式模式没与野类型的相比在wps1异种被影响,这被发现,与所有花的机关的未改变的开发一致。而且,在花瓣的不同类型的表皮的房间的身份被维持。组织学的分析证明在wps1花,所有花瓣不规则地被合拢,并且在花瓣有系的结构,当内部房间的形状和安排畸形、未组织起来时。把结果基于这些,我们建议Wps1下游地行动到班B花的机关身份基因,并且工作在迟了的花期间调制细胞的区别发展阶段。
简介:GABAtransporter1(GAT1)takesimportantrolesinmultiplephysiologicalprocessesthroughtheuptakeandreleaseofGABA,buttheregulationofGAT1geneexpressionindifferenttissuesisrarelyknown.Toaddressthequestion,first,5'RapidamplificationofcDNAend(RACE)wasusedtodetermineGAT1transcriptionalstartingsitesinneonatalmousecerebralcortexandintestine,adultmousebrainandadultrattestis.Theproductsof5'RACEwereconfirmedbyDNAsequencing.WefoundthatthetranscriptofGAT1inneonatalmousecerebralcortexandadultmousebrainstartsatthesamesite(insideofexon1),whileinmouseintestine,GAT1startstranscriptioninintron1,andinrattestis,thetranscriptofGAT1hasanadditionaluntranslationexontothe5'direction.
简介:流行性感冒的所有已知的子类型A病毒在野水鸟被维持,这些病毒的自然水库。流行性感冒A病毒被孤立从许多有改变病态和死亡率的动物种类。更重要地,流行性感冒A病毒与潜在地致命的结果在人引起呼吸疾病。在人的本地或全球的爆发被过量住院和死亡典型地描绘。在1997,H5N1子类型的高度病原的鸟的流行性感冒病毒在传给人的香港出现了,导致由鸟的流行性感冒病毒感染的人的死亡的首先记录的盒子。在越南,印度尼西亚,和泰国在家禽在2003年7月开始的新爆发,和高度病原的鸟的H5N1流行性感冒病毒后来在整个亚洲并且进欧洲和非洲传播了。这些病毒继续与高死亡率感染人并且引起隐约可见的世界范围的担心流行。而且,H5N1病毒爆发在整个亚洲在家禽工业上有破坏效果。因为H5N1病毒爆发看起来从南部的中国发源,我们这里在中国检验H5N1流行性感冒病毒,与他们的生物性质上的一个重音。
简介:在谷物的含纤维的根系统包括首先偶然根(艺术),它在营养素和水举起起重要作用。关于位于AR开发下面的分子的机制的当前的知识仍然是有限的。我们这里报导四米饭(OryzasativaL.)的隔离异种从不同基因背景,所有哪个在AR是有缺点的形成。这些异种展出了侧面的根(LR)和gravitropism的部分损失的减少的数字。也显示的异种提高了敏感到N-1-naphthylphthalamic酸,极的植物生长素运输的一个禁止者(轻拍),显示变化影响了植物生长素运输。用四异种之一的位置的克隆表明它被一个guanine核苷酸交换因素的loss-of-function为ADP-ribosylation因素(OsGNOM1)引起。转基因的植物显示出的promoter::GUS的RT-PCR和分析那OsGNOM1在ARprimordia,脉管的纸巾,LR,根尖端,叶子,花药和词根静脉被表示,与类似于植物生长素的一个分发模式。另外,OsPIN2,OsPIN5b和OsPIN9的表情在异种被改变。一起拿,这些调查结果显示OsGNOM1通过调整影响艺术的形成轻拍。