简介：摘要合同法113条但书的规定主要确定了违约损害赔偿责任中可得利益赔偿的限制，即可预见性规则的内容。在实践中，由于可预见规则的内容、判断标准并不明确，导致第113条但书适用率不高的缺陷，因此遭到了理论界与实务界的质疑。为此，本文认为对于第113条但书的理解与适用，应当对于可预见的内容进行明确，同时区分不同情形下确立可预见与否的标准，将可预见规则与完全赔偿原则和预期可得利益赔偿结合起来，进而确定损害赔偿的范围，提高可预见规则的适用性。

简介：摘要目的应用慢病毒介导的RNA干扰技术，有效沉默连接红色荧光蛋白mCherry与靶基因1型糖尿病易感基因Vβ13的表达，建立一种简便有效基因沉默的系统，并初步研究慢病毒感染T细胞的可能性。方法以Vβ13mRNA编码序列作为干扰靶点，以慢病毒质粒UTG作为载体，构建靶向Vβ13的shRNA表达质粒，构建携带Vβ13的mCherry红色荧光蛋白的质粒作为验证shRNA有效性的靶点，并转染293FT细胞。通过红色荧光的表达及RT-PCR和WesternBlot确定最佳沉默Vβ13序列后，将有效的UTG-Vβ13质粒与辅助质粒共转染293FT细胞，低温超高速离心，获取高滴度慢病毒。应用慢病毒感染大鼠T细胞，光镜观察T细胞被慢病毒感染的情况，流式细胞术检测T细胞的绿色荧光表达情况。结果成功构建Vβ13-shRNA慢病毒载体UTG-shRNA-Vβ13，RT-PCR及WesternBlot结果显示慢病毒感染的293FT细胞Vβ13mRNA及蛋白表达相对于对照组显著降低。构建的慢病毒可以成功感染T细胞。结论红色靶基因-绿色慢病毒系统具有简便的筛选性能；UTG慢病毒对神经干细胞具有较高感染效率。可作为一种良好的基因导人载体，实现慢病毒介导的RNA干扰在T细胞内的有效表达，并为T细胞过继性转移的相关研究提供技术支持。

简介：