简介：摘要目的研究结核分枝杆菌Rv0446c的抗原表位及其免疫原性，为结核病的免疫诊断技术及疫苗研发提供候选抗原及表位。方法利用生物信息学软件TE-predict和IEDB的T细胞表位预测软件对结核分枝杆菌抗原Rv0446c进行T细胞表位预测，用ELISPOT实验检测表位在2019年1月到2020年12月期间来自佛山市第四人民医院和福州肺科医院的结核病患者（50例）、肺部疾病患者（39例）及健康志愿者（55例）中的免疫反应性。将60只6周龄BALB/c小鼠随机分成10组，每组6只，分别采用PBS、血蓝蛋白（KLH）、高剂量结核分枝杆菌抗原Ag85B（50 μg/只）、低剂量Ag85B（20 μg/只）、高计量P120、低剂量P120、高计量P121、低剂量P121、高剂量P123、低剂量P123（P120、P121、P123高剂量为100 μg/只、低剂量为50 μg/只）多肽对其皮下免疫，每只小鼠免疫3次，每次间隔2周，末次免疫后4周，应用ELISA方法检测各组小鼠脾细胞产生的IFN-γ、IL-2、IL-4、IL-10细胞因子水平。结果预测的7条表位多肽中，ELISPOT试验筛选出4条阳性T细胞表位多肽P120、P121、P122、P123，在结核病患者中检测灵敏度和特异度分别为30.0%、18.0%、6.0%、22.0%和96.8%、98.9%、100%、96.8%。与对照PBS组和KLH组比较，P120多肽能刺激小鼠产生较高水平的IFN-γ、IL-4、IL-10，P121多肽刺激小鼠产生较高水平的IFN-γ和IL-4（均P<0.05），P123多肽刺激小鼠产生较高水平的IFN-γ（均P<0.05）。P120、P121、P123多肽刺激小鼠产生的IL-2的水平高于PBS组低于Ag85B-L组和Ag85B-H组（均P<0.05），但与KLH组差异无统计学意义（均P>0.05）。结论Rv0446c蛋白及其T细胞表位具有较好的免疫原性及免疫反应性，能刺激机体产生强烈的细胞免疫应答，可用于结核病的临床诊断技术研究和新型结核亚单位疫苗的构建。

简介：摘要目的探讨胸苷激酶1（TK1）、癌胚抗原（CEA）、糖类抗原（CA）19-9、CA15-3和CA72-4在结直肠肿瘤中的表达及临床意义。方法采用酶联免疫吸附测定（ELISA）法和电化学发光免疫分析（ECLIA）法分别测定了124例结直肠癌患者、52例结直肠癌前病变患者、154例结直肠良性病变患者、106例健康体检者的血清TK1水平和血清CEA、CA19-9、CA15-3、CA72-4的水平。分析结直肠癌患者血清TK1和其临床病理特征之间的关系。探讨TK1、CEA、CA19-9、CA15-3和CA72-4单独检测与联合检测对结直肠癌的诊断效能。结果结直肠癌患者的血清TK1表达水平与肿瘤分期、分化程度、淋巴结转移、远端转移及年龄相关（均P<0.05），但与患者性别无关（P>0.05）。在结直肠癌、癌前病变、良性病变和健康者中，血清TK1水平依次降低。TK1高表达的结直肠癌患者，其生存期更短。多标志物的联合检测的敏感性、特异性和准确率分别为93.5%、93.0%和93.1%。结论血清TK1有望成为结直肠癌诊断及预后预测的独立标志物。TK1、CEA、CA19-9、CA15-3和CA72-4的联合检测具有结直肠癌诊断的临床意义。

简介：摘要目的分析靶向乙型肝炎表面抗原(HBsAg)的嵌合抗原受体(CAR)-T细胞对表达HBsAg的肝癌细胞的杀伤作用。方法构建HBsAg-CAR基因，通过慢病毒载体将其转导入T细胞(健康捐献者的血液中获取)，制备HBsAg-CAR-T细胞。制备CD19-CAR-T细胞作为Mock组，未转导的T细胞为Untransduced组。上述三种效应细胞分别与肝癌细胞共同培养，检测三组细胞对肝癌细胞的杀伤作用及抗肿瘤细胞因子(肿瘤坏死因子-α、干扰素-γ、白细胞介素2等)释放水平。建立免疫缺陷NPG小鼠PLC/PRF/5肝癌皮下成瘤模型，随机分组，尾静脉注射HBsAg-CAR-T细胞(实验组，n＝5)或未转导的T细胞(对照组，n＝5)，注射后第15天测量肿瘤体积。结果体外培养过程中，HBsAg-CAR-T细胞具有较高的增殖能力及存活率，CAR的表达稳定。与表达HBsAg的肝癌细胞共培养后，HBsAg-CAR-T组释放的抗肿瘤细胞因子明显高于Mock组及Untransduced组，差异均有统计学意义(均P<0.05)；HBsAg-CAR-T组对HBsAg表达阳性的肝癌细胞的杀伤率明显高于Mock组及Untransduced组，差异均有统计学意义(均P<0.05)。实验组NPG小鼠肿瘤体积为(250.8±62.8)mm3，低于对照组小鼠肿瘤体积(757.5±102.6)mm3，差异有统计学意义(P<0.05)。结论HBsAg-CAR-T细胞能够特异性识别并杀伤HBsAg阳性肝癌细胞，并释放高水平的抗肿瘤细胞因子。

简介：摘要目前戊型肝炎病毒(HEV)感染的实验室诊断方法是检测HEV抗体(HEV IgM/IgG)或HEV核酸(HEV RNA)。近年来，基于对HEV病毒体蛋白结构及免疫性的研究，发展了HEV抗原(HEV Ag)检测方法。本文就HEV Ag检测方法的建立、HEV Ag检测的意义及在HEV感染诊断中的应用进行综述。

简介：摘要目的探讨血浆SEPT9基因甲基化联合血清癌胚抗原（CEA）、糖类抗原724（CA724）检测在结直肠癌诊断中的临床应用价值。方法选取2018年5月至2021年10月陕西省宝鸡市中心医院和云南省新昆华医院收治的219例结直肠病变患者，包括病理诊断结直肠癌149例、结直肠息肉70例，选择同期体检健康者100名作为健康对照组。采用实时荧光定量聚合酶链反应（PCR）测定血浆SEPT9基因甲基化状态，电化学发光法测定血清CEA和CA724的水平。比较各组3项指标表达情况，采用受试者工作特征（ROC）曲线分析3项指标单独及联合诊断结直肠癌的效果。结果结直肠癌组SEPT9基因甲基化阳性率（74.50%，111/149）高于结直肠息肉组（22.86%，16/70）和健康对照组（1.00%，1/100），差异有统计学意义（P<0.001）；结直肠癌组CEA阳性率（46.98%，70/149）高于结直肠息肉组（40.00%，28/70）和健康对照组（3.00%，3/100），差异有统计学意义（P<0.001）；结直肠癌组CA724阳性率（38.93%，58/149）高于结直肠息肉组（32.86%，23/70）和健康对照组（2.00%，2/100），差异有统计学意义（P<0.001）。SEPT9基因甲基化、CEA和CA724单独诊断结直肠癌的ROC曲线下面积（AUC）分别为0.823（95% CI 0.753~0.891）、0.788（95% CI 0.725~0.852）、0.689（95% CI 0.624~0.754）。SEPT9基因甲基化诊断结直肠癌的最佳临界Ct值为36.5，灵敏度为90.30%，阳性预测值为84.68%，均高于CEA和CA724；CEA诊断结直肠癌的最佳临界值为8.80 ng/ml，特异度（77.50%）和阴性预测值（78.48%）均高于SEPT9基因甲基化和CA724；3项指标联合检测的临界值取3项指标单项最佳临界值时的灵敏度（97.66%）、阳性预测值（93.98%）、阴性预测值（81.25%）、AUC（0.846，95% CI 0.749~0.944）均较单项指标高。结论血浆SEPT9基因甲基化、血清CEA和CA724联合检测诊断结直肠癌，灵敏度和准确度高，三者可以优势互补，提高诊断效率，对于结直肠癌的诊断具有较高的临床价值。

简介：AbstractHepatitis D virus (HDV) infection causes the most severe form of viral hepatitis with rapid progression to cirrhosis, hepatic decompensation, and hepatocellular carcinoma. Although discovered > 40 years ago, little attention has been paid to this pathogen from both scientific and public communities. However, effectively combating hepatitis D requires advanced scientific knowledge and joint efforts from multi-stakeholders. In this review, we emphasized the recent advances in HDV virology, epidemiology, clinical feature, treatment, and prevention. We not only highlighted the remaining challenges but also the opportunities that can move the field forward.

简介：摘要膜性肾病是一种免疫性肾小球疾病。自发现中性内肽酶是膜性肾病的足细胞抗原以来，M型磷脂酶A2受体和1型血小板反应蛋白7A域等足细胞抗原的研究，对原发性膜性肾病的临床诊治产生了重要影响。近期，Exostosin 1和Exostosin 2、神经细胞黏附分子1、神经源性表皮生长因子样分子1、信号素3B和原钙黏蛋白7等新抗原的发现，成为膜性肾病精准诊治的潜在靶点。现就膜性肾病足细胞抗原特点、致病机制及临床意义进行综述。

简介：摘要肺癌目前全面进入免疫治疗新时代，但是单一的一种免疫疗法仍无法满足免疫微环境的复杂状况，不同免疫联合方案成为克服免疫耐药的有效手段。癌-睾丸抗原（CTA）是一种几乎只在恶性肿瘤中表达的特异性极高的肿瘤抗原，能够产生强大的抗肿瘤免疫反应，是新型免疫治疗中很有希望的靶点。文章就CTA在肺癌中的表达、功能和免疫治疗应用等方面的研究进展进行综述。

简介：摘要目的探讨波形蛋白(Vimentin)表达与血清癌胚抗原(CEA)水平、结肠癌特异性抗原-2(CCSA-2)含量对结直肠癌(CRC)患者预后的价值。方法2014年12月至2016年12月庆阳市人民医院收治的122例CRC患者，采用免疫组织化学法检测患者病理标本中Vimentin表达，化学发光免疫分析法测定血清CEA水平，酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测CCSA-2含量。所有患者均随访3～5年，分析其生存时间不超过3年的影响因素(性别、Vimentin表达、CEA水平等)；以受试者工作特征曲线(ROC曲线)评估CCSA-2对CRC预后的判断价值。组间比较采用χ2检验、t检验。结果Vimentin表达与肿瘤直径大小有关，Vimentin和血清CEA水平与病情复发或转移及3年死亡情况有关(P<0.05)。随访结果显示，3年生存率81.97%(100/122)。多因素Logistic回归分析显示，性别、Vimentin表达阳性、CEA阳性、Vimentin及CEA双阳性是影响CRC患者生存时间不超过3年的危险因素[95%可信区间(CI)：0.063～0.818、1.518～10.539、0.136～0.906、3.646～51.583，P<0.05]。22例3年内死亡的患者血清CCSA-2浓度显著高于生存者，ROC曲线显示，血清CCSA-2预测患者生存时间不超过3年的曲线下面积(AUC)为0.888，判断灵敏度、特异度分别为95.5%和87%。结论Vimentin表达、血清CEA水平均为CRC预后3年死亡的影响因素，联合血清CCSA-2含量的检测有助于判断CRC预后。

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简介：摘要目的比较人肝、肾ABO血型抗原表达的差异，探索ABO血型抗原在血型抗体介导排斥反应中的作用。方法ABO血型为A型和B型血的公民逝世后器官捐献供者各4例，O型血对照2例。获取供者肝脏和双肾后，留取肾动脉、肾静脉、肾组织、肝动脉、肝静脉、门静脉和肝组织标本，运用蛋白质印迹法(WB)和免疫组织化学法检测ABO血型抗原的含量和分布。结果WB检测结果显示，同一供者不同部位ABO血型抗原含量并不一致。在同一个体内，A型抗原在肾组织和门静脉含量最高，在肾动脉含量最低；B型抗原在肝静脉及肾组织含量最高，在肾动脉、肾静脉及肝组织含量最低。不同个体之间，同一部位血型抗原含量差别也较大。通过免疫组织化学法检测，进一步发现血型抗原在肝、肾组织和血管中的分布与WB结果基本一致。结论ABO血型抗原在不同血型、个体和器官之间均存在不同程度差异，这种差异也可能会影响ABO血型不相容器官移植的结局。

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简介：摘要目的探讨血清微小核糖核酸-34a(miR-34a)、癌抗原15-3(CA15-3)和癌抗原125(CA125)联合检测在乳腺癌复发转移监测中的价值。方法根据患者影像学及病理组织学检查将2016年1月至2020年12月武汉科技大学附属普仁医院诊治的96例女性乳腺癌患者分为复发转移组(39例)与未复发转移组(57例)，实时荧光定量反转录-聚合酶链反应(qRT-PCR)检测血清miR-34a相对表达量，酶联免疫吸附法检测血清CA15-3和CA125水平。采用受试者操作特征曲线(ROC)分析血清miR-34a、CA15-3和CA125及三者联合检测对乳腺癌患者术后复发转移监测的作用。计量数据比较采用t检验，计数资料比较采用χ2检验。结果复发转移组乳腺癌患者血清miR-34a相对表达量显著低于未复发转移组乳腺癌患者(miR-34a相对表达量0.41±0.04比0.97±0.06)，血清CA15-3和CA125水平显著高于未复发转移组乳腺癌患者[CA15-3为(79.62±3.77) U/ml比(14.89±2.14) U/ml，CA125为(152.56±13.77) U/ml比(19.32±2.13) U/ml]，差异均有统计学意义(t＝20.807、9.478、36.663，P值均<0.05)。血清miR-34a预测乳腺癌患者复发转移的敏感度为87.4%，特异性为69.5%；血清CA15-3预测乳腺癌患者复发转移的敏感度为89.1%，特异性为72.5%；血清CA125预测乳腺癌患者复发转移的敏感度为72.4%，特异性为82.7%。miR-34a、CA15-3和CA125三者联合检测敏感度为91.8%，特异性为89.1%。结论乳腺癌复发转移患者血清miR-34a表达显著降低，血清CA15-3和CA125水平显著升高，三者联合检测在乳腺癌复发转移监测中具有重要临床价值。

简介：摘要我国进展期胃癌占多数，治疗效果仍不容乐观。由于胃周血供来源多、需要多处血管根部处理，解剖分离层次多、范围广，淋巴引清扫区域多、操作复杂，消化道重建选择多样，传统2D腹腔镜胃癌根治手术难度大、学习曲线长。随着3D腹腔镜在普外科手术的推广和普及，其立体纵深的全新手术视野，解剖层次更加清晰，操作更加精准，给术者带来全新体验。3D腹腔镜应用于胃癌根治，可以明显缩短术者的学习曲线，尤其在胃癌根治手术中立体脉络化淋巴结清扫、膜解剖指导下的网膜囊切除、完全腹腔镜下消化道重建更显其优势。

简介：摘要嵌合抗原受体T （CAR-T）细胞是经基因工程修饰后表达靶向肿瘤细胞CAR分子的T细胞。CAR-T细胞治疗在血液肿瘤治疗中展现了显著的疗效而备受关注，是一种新的肿瘤免疫疗法。目前，CAR-T细胞治疗在实体瘤治疗中还面临着很大的挑战。而且，在临床应用的过程中仍会出现一些不良反应，如细胞因子释放综合征、神经毒性、归巢障碍、溶瘤综合征及脱靶效应等。本文就CAR-T疗法的基本原理及临床应用与不良反应展开做一综述。

简介：摘要目的对9种流感病毒抗原快速检测试剂盒(rapid influenza virus diagnostic tests，RIDTs)的灵敏度进行评价。方法季节性流感毒株收集后，通过TCID50(组织细胞半数感染量)和病毒核酸序列测定分别确定病毒滴度及型别；流感毒株进行系列稀释后，使用流感病毒抗原快速检测试剂盒进行检测，以评价不同试剂的灵敏度。结果不同试剂对同一株病毒的检出灵敏度差异最大为32倍稀释度(>101 TCID50/ml)；同一种试剂对不同型别、亚型/系流感病毒的检出灵敏度不同。结论市场上的RIDTs灵敏度存在差别；使用多株不同流感型别、不同亚型/系的流感病毒将有助于对RIDTs产品质量进行全面评价和控制。

简介：摘要目的探讨乙型肝炎表面抗原(hepatitis B surface antigen，HBsAg)和乙型肝炎e抗原(hepatitis B e antigen，HBeAg)双阳性的乙型肝炎病毒(hepatitis B virus，HBV)携带产妇采用母乳喂养对其所生婴儿HBV感染率的影响。方法采用前瞻性队列研究方法，纳入2016年2月至2018年5月在浙江大学医学院附属妇产科医院进行产前检查及分娩的HBsAg和HBeAg双阳性携带HBV产妇及其所生的婴儿各323例，将其分为母乳喂养组和人工喂养组。采用化学发光免疫分析法和聚合酶链反应-荧光探针法，分别检测两组婴儿在出生<24 h及7月龄时的血清HBV标志物和HBV DNA的阳性率。统计学方法采用χ2检验。结果最终纳入297例患者，其中母乳喂养组149例，人工喂养组148例。母乳喂养组与人工喂养组婴儿在出生<24 h及7月龄时的HBsAg、抗-HBs、HBeAg、HBV DNA>100 IU/mL的阳性率比较，差异均无统计学意义(均P>0.05)。母乳喂养组出生<24 h新生儿抗-HBs阳性率为58.39%(87/149)，低于7月龄时的95.97%(143/149)；母乳喂养组出生<24 h新生儿HBeAg阳性率为65.10%(97/149)，高于7月龄时的13.42%(20/149)；差异均有统计学意义(χ2＝59.75、40.49，均P<0.01)。母乳喂养组出生<24 h新生儿的HBsAg和HBV DNA>100 IU/mL阳性率分别为2.01%(3/149)和2.68%(4/149)，其7月龄时的HBsAg和HBV DNA>100 IU/mL阳性率分别为2.68%(4/149)和2.68%(4/149)，两个时间点比较差异均无统计学意义(均P>0.05)。人工喂养组出生<24 h新生儿抗-HBs阳性率为47.97%(71/148)，低于7月龄时的95.94%(142/148)；人工喂养组出生<24 h新生儿HBeAg阳性率为55.41%(82/148)，高于7月龄时的19.59%(29/148)；差异均有统计学意义(χ2＝85.37、39.84，均P<0.01)。人工喂养组出生<24 h新生儿的HBsAg和HBV DNA>100 IU/mL阳性率分别为4.73%(7/148)和1.35%(2/148)，其7月龄时的HBsAg和HBV DNA>100 IU/mL阳性率分别为1.35%(2/148)和1.35%(2/148)，两个时间点比较差异均无统计学意义(均P>0.05)。结论母乳喂养不是增加HBsAg和HBeAg双阳性HBV携带产妇垂直传播风险的决定性因素，建议这类产妇在正规预防的前提下进行母乳喂养。

简介：摘要目的评估D-二聚体、糖类抗原199（CA199）和胰岛素样生长因子结合蛋白2（IGFBP2）对可切除胰腺癌患者术后监测和生存期预测的价值。方法收集秦皇岛市第一医院2010年5月至2014年1月收治的可手术切除的119例胰腺癌患者资料。采用胶乳增强免疫比浊法测定患者术前、术后疾病稳定及疾病进展时D-二聚体水平，电化学发光法测定CA199水平，酶联免疫吸附试验测定血清IGFBP2水平。以30名健康体检者和40例胰腺浆液性囊腺瘤患者为对照。分析胰腺癌患者术前D-二聚体、CA199、IGFBP2水平与临床病理特征及生存期间的关系。结果胰腺癌患者术前D-二聚体、CA199、IGFBP2均高于两对照组（均P<0.01）。与术后疾病稳定期相比，胰腺癌患者疾病进展后血清D-二聚体、CA199和IGFBP2水平均升高[1 496.0 ng/ml（590.0 ng/ml，2 280.4 ng/ml）比578.1 ng/ml（381.7 ng/ml，671.5 ng/ml），207.0 U/ml（54.5 U/ml，736.5 U/ml）比31.9 U/ml（14.1 U/ml，44.0 U/ml），（435±107）ng/ml比（249±83）ng/ml，均P<0.01]。各临床病理因素分层胰腺癌患者间术前D-二聚体水平升高者比例的差异均无统计学意义（均P>0.05）；淋巴结转移患者中CA199和IGFBP2水平升高者比例均高于淋巴结未转移患者（均P<0.05），其他因素与二者表达水平是否升高均无关（均P>0.05）。术前D-二聚体水平升高胰腺癌患者无进展生存（PFS）时间和总生存（OS）时间均短于D-二聚体水平正常者[（10.6±1.2）个月比（20.4±2.4）个月，（18.9±1.9）个月比（29.2±2.6）个月，均P<0.01]。当CA199以37 U/ml为分界值时，术前CA199水平与胰腺癌患者生存无相关性（均P>0.05）；当分界值分别为253.8 U/ml（入组时CA199中位数）和1 000 U/ml时，CA199水平升高者的PFS时间和OS时间均短于CA199水平正常者[253.8 U/ml：（11.5±1.5）个月比（21.0±2.6）个月，（19.9±2.1）个月比（29.0±2.7）个月，均P<0.01；1 000 U/ml：（8.9±1.9）个月比（19.1±1.9）个月，（15.5±2.3）个月比（28.0±2.0）个月，均P<0.01]。当IGFBP2以339.1 ng/ml为分界值时，术前IGFBP2水平升高胰腺癌患者PFS时间和OS时间均短于IGFBP2水平正常者[（10.8±1.1）个月比（21.1±2.6）个月，（18.9±1.8）个月比（30.3±2.8）个月，均P<0.01]。Cox多因素分析结果显示，术前D-二聚体、IGFBP2水平是胰腺癌患者PFS和OS的独立影响因素（D-二聚体：HR=0.561，95% CI 0.336~0.936，P=0.027；HR=0.515，95% CI 0.303~0.874，P=0.014；IGFBP2：HR=0.430，95% CI 0.253~0.731，P=0.002；HR=0.361，95% CI 0.202~0.644，P=0.001）。结论对于可切除胰腺癌患者，D-二聚体、CA199和IGFBP2可用于术后病情监测，术前D-二聚体和IGFBP2可用于生存期预测。