简介:目的探讨microRNA-21在增生性瘢痕(Hypertrophicscars,HS)形成中的作用及机制,为生物学防治提供新靶点。方法收集临床患者正常皮肤及HS标本,组织学检测、组织胶原定量检测;免疫组化、Real-timePCR检测正常细胞外基质Col1A1、Col3A1、Fibronectin(FN)及α-SMA的表达;Real-timePCR检测microRNA-21mRNA表达水平;培养HS成纤维细胞,构建microRNA-21反义表达载体,并加入TGF-β诱导,Real-timePCR检测Col1A1、Col3A1及microRNA-21的表达。结果HS中胶原的含量及细胞外基质表达明显高于正常皮肤;HS组织中microRNA-21表达高于正常皮肤组织;TGF-β可增强HS成纤维细胞中microRNA-21的表达,而瘢痕成纤维细胞转染microRNA-21反义表达载体后可明显降低瘢痕相关基因的表达。结论皮肤创伤愈合后局部microRNA-21表达升高,促进了细胞外基质的合成,而TGF-β进一步加强了microRNA-21对瘢痕形成的促进作用,可能是导致HS形成的重要原因。
简介:目的探讨调控体外培养大鼠血管平滑肌中微小RNA-21(microRNA-21,miRNA-21)的表达水平对该类细胞迁移和侵袭能力的影响。方法0.1%Ⅱ型胶原酶消化分离血管平滑肌细胞并进行培养,用免疫组化染色法检测细胞胞浆内α-肌动蛋白的表达。试验分为6组:空白对照组(加DEPC水)、单纯转染试剂组(仅加lipofectamineTM2000)、阴性对照组(转染阴性对照序列)、上调miRNA-21组(转染miRNA-21拟似物)、下调miRNA-21组(转染miRNA-21阻遏物)、无关序列组(转染无关序列)。利用lipofectamineTM2000将miRNA-21转染到培养的血管平滑肌细胞中,采用real-timePCR分别检测各组细胞miRNA-21的表达水平。采用细胞划痕实验分别检测各组细胞体外迁移能力的变化和transwell侵袭小室模型分别检测各组细胞侵袭能力的变化。结果原代血管平滑肌细胞在相差显微镜下呈现‘谷和峰’的生长特点,胞浆内α-肌动蛋白染色阳性的细胞数占总细胞数的98%以上。与对照组相比,上调miRNA-21组的血管平滑肌细胞体外迁移和侵袭能力明显增强(P<0.05),下调miRNA-21组的血管平滑肌细胞体外迁移和侵袭能力明显降低(P<0.05)。结论miRNA-21可以促进血管平滑肌细胞迁移和侵袭。
简介:目的研究microRNA-21在胆管癌组织中的表达及其与上皮问质转化(EMT)和患者预后的关系。方法收集2005年1月至2010年1月安徽医科大学附属省立医院手术切除的4l例胆管癌标本及10例行胆管癌根治术患者的癌旁组织标本,分别采用原位杂交和免疫组织化学法检测microRNA-21以及EMT相关标志蛋白E-cadherin、N-cadherin的表达,并分析microRNA-21与EMT的关系以及microRNA.21的表达对临床预后评估的价值。计数资料采用X2检验,相关性分析用Spearman法,采用Kaplan.Meier法绘制生存曲线,生存分析采用Log-rank检验。结果胆管癌组织中microRNA-21的阳性表达率为63%,高于癌旁组织的30%,两者比较,差异有统计学意义(X2=0.324,P〈0.05);microRNA.21的表达与肿瘤细胞分化程度、有无淋巴结转移、有无神经和(或)脉管浸润密切相关(X2=6.365,0.552,11.896,P〈0.05),但与患者性别、年龄、肿瘤位置、病理类型无明显相关(X2=0.322,0.588,0.510,0.256,P〉0.05)。E-cadherin与N-cadherin的表达分别与有无淋巴结转移、有无神经和(或)脉管浸润相关(X2=4.630,5.512;6.600,7.152,P〈0.05),但与患者的性别、年龄、肿瘤位置、肿瘤细胞分化程度及病理类型无明显相关(X2=0.266,0.013,0.067,0.666,0.003;1.036,0.997,1.808,2.997,0.812,P〉0.05)。同一批胆管癌组织中microRNA-21表达与EMT相关标志蛋白E-cadherin、N-cadherin的表达具有相关性(r=0.373,0.614,P〈0.05)。术后生存分析结果显示:microRNA-21低表达者总体生存率及无瘤生存率均高于microRNA-21高表达者,两者比较,差异有统计学意义(X2=3.999,4.376,P〈0.05)。结论microRNA-21在胆管癌组织及转移淋巴结中高表达,可能通过诱导EMT的发生来促进胆管癌的浸润和转移;microRNA-21可以反映患者的预�
简介:目的通过对结直肠癌患者血清进行实时定量PCR检测,筛选出结直肠癌转移相关的miRNA。方法通过文献检索,筛选出11个结直肠癌转移相关的miRNA(miRs-31,335,206,141,126,200b,200c,21,Let7a,Let7b和Let7c),收集2007年7月至2013年4月北京友谊医院收治的术前留置血清的结直肠癌转移(IV期)病例共计108例,其中结直肠肝转移患者72例,其他脏器转移患者36例;并纳入2008年1月至2010年6月术前留置血清的局灶性结直肠癌(L-CRC)(I-III期)病例共计116例作为对照组进行研究。通过对两组患者血清样本进行实时定量PCR检测结果找出结直肠癌转移相关miRNA。结果筛选出11个转移相关的miRNA中的7个miRNA(miRs-31、141、126、21、Let7a、Let7b和Let7c)可以从血清中被检测到。与局灶性结直肠癌患者相比,miR-141,miR-126,Let-7a和miR-21在转移性结直肠癌患者的血清中表达具有显著性差异(P〈0.0001,P〈0.0001,P=0.0120和P〈0.0001),可以作为结直肠癌转移相关miRNA。结论7个转移相关MiRNAs:miRs-31、141、126、21、Let7a、Let7b和Let7c可以从结直肠癌患者血清中被检测到;miR-141,miR-126,Let-7a和miR-21可以作为结直肠癌转移相关miRNA。
简介:背景:骨骼肌占了人体总体质量的40%,然而许多骨骼肌损伤和疾病的机制问题尚未解决。MicroRNA-206(miR-206)是骨骼肌特异性miRNA,在骨骼肌的发育和再生中起着重要的作用。目的:总结分析microRNA-206在骨骼肌损伤和疾病中的研究现状。方法:以“miR-206,skeletalmuscle”为检索词,计算机检索1992至2014年PubMed数据库相关文献的全文,经过筛选最终对60篇miR-206在骨骼肌损伤和疾病中的相关研究进行分析讨论。结果与结论:MiR-206能调节神经肌肉损伤后神经肌肉接点的恢复。相关研究显示,控制miR-206水平可能成为治疗肌萎缩侧索硬化症等肌肉疾病的新方法。通过细胞培养发现miR-206能促进卫星细胞的分化,缺乏miR-206会导致卫星细胞延迟分化,在骨骼肌损伤中也发现miR-206能促进骨骼肌的再生。miR-206长期运动适应后水平下降,但当运动适应停训一段时间后,miR-206会恢复到原先的水平,而其机制还有待研究。
简介:[摘要]目的 探讨MicroRNA-101在尘肺成纤维细胞增殖和活化中的作用,为尘肺的二级预防提供新的策略和方法。方法 通过细胞及体外实验初步探讨MicroRNA-101在SiO2粉尘诱导肺纤维化中的调节作用。实时定量PCR实验检测细胞MicroRNA-101、Co1 I mRNA表达以及肺组织MicroRNA-101表达;WB实验检测细胞以及肺组织Co1 I蛋白表达。结果 MicroRNA-101在SiO2诱导的尘肺中表达下调,在SiO2诱导的尘肺的细胞模型中高表达MicroRNA-101,可减少Col I mRNA及蛋白表达水平,对SiO2诱导的肺纤维化有抑制作用。结论 在MRC-5中过表达MicroRNA-101可有效下调因TGF-β1刺激导致MRC-5合成过多的Col I,抑制过多细胞外基质成分合成,为尘肺的二级预防提供新的策略和方法。
简介:摘要目的根治癌症。方法从1998年至2014年通过17年针对多种癌症21例的治疗证实。结论针灸治疗癌症是治疗癌症的正确方法。
简介:摘要MicroRNA(miRNA)是一类由内源基因编码的长度约为20~24个核苷酸的非编码单链RNA分子,它们在大多数多细胞生物中参与转录后阶段的基因表达调控。有些microRNA在某些细胞或组织类型中呈现特异性高表达,microRNA-142(miR-142)就是其中一种。目前的一些研究显示,miR-142在胚胎发育、机体内环境稳态调节和某些疾病的致病机制过程中是许多生物反应和信号转导的关键调控因子1。本文就将简单介绍microRNA-142的生物学作用和其在各种疾病中的研究现状。
简介:摘要目的检测在青年人群的动脉粥样硬化患者中microRNA的差异性表达谱。方法随机选择健康查体的青年人60例,经动脉超声检查分出动脉粥样硬化组及非动脉粥样硬化组,每组各30人。运用荧光定量PCR法检测这60名患者的microRNA的表达,绘制动脉粥样硬化患者的microRNA表达谱;进一步分析microRNA与动脉粥样硬化的相关性。结果(1)在青年动脉粥样硬化人群,可以看到microRNA126、microRNA221、microRNA33、microRNA155、microRNA181b、microRNA222、microRNA21均有差异性表达。(2)和正常人相比,动脉粥样硬化人群中,microRNA126、microRNA221、microRNA33、microRNA155、microRNA181b下降;microRNA222、microRNA21明显升高,差异有明显的统计学意义(P<0.05)。结论(1)在青年动脉粥样硬化及非动脉粥样硬化患者中,明显存在部分microRNA的差异表达;(2)microRNA21、microRNA33、microRNA126、microRNA221、microRNA222、microRNA155、microRNA181b在青年动脉粥样硬化患者中存在差异表达。
简介:【摘要】目的 检测在青年人群的动脉粥样硬化患者中 microRNA 的差异性表达谱。方法 随机选择健康查体的青年人 60 例,经动脉超声检查分出动脉粥样硬化组及非动脉粥样硬化组,每组各 30 人。运用荧光定量 PCR 法检测这 60 名患者的 microRNA 的表达,绘制动脉粥样硬化患者的 microRNA 表达谱;进一步分析 microRNA 与动脉粥样硬化的相关性。结果 ( 1 )在青年动脉粥样硬化人群,可以看到 microRNA126 、 microRNA221 、 microRNA33 、 microRNA155 、 microRNA181b 、 microRNA222 、 microRNA21 均有差异性表达。( 2 )和正常人相比,动脉粥样硬化人群中, microRNA126 、 microRNA221 、 microRNA33 、 microRNA155 、 microRNA181b 下降; microRNA222 、 microRNA21 明显升高,差异有明显的统计学意义 (P<0.05) 。结论 ( 1 )在青年动脉粥样硬化及非动脉粥样硬化患者中,明显存在部分 microRNA 的差异表达;( 2 ) microRNA21 、 microRNA33 、 microRNA126 、 microRNA221 、 microRNA222 、 microRNA155 、 microRNA181b 在青年动脉粥样硬化患者中存在差异表达。
简介:摘要目的明确血小板miR-223在伴糖尿病(DM)的缺血性脑卒中(IS)患者中的表达情况及在血小板(PLT)活化中的作用。方法通过病例对照研究,收集三组病例组病例(单纯DM7例、不伴DM的IS组6例、伴DM的IS组6例)及性别年龄相匹配的正常对照组8例,空腹抽取静脉血,分离和收集PLT;运用流式细胞术测定各组标本PLT活化率,比较各组间PLT活化率差别;提取血小板RNA,实时荧光定量PCR测定各组PLTmiR-223表达量,分别比较各组PLTmiR-223表达是否存在差异。结果与正常对照组相比,三个病例组PLT活化率均明显增高,具有统计学意义(P<0.05);与正常对照组相比较,伴DM的IS组和单纯DM组中PLTmiR-223表达均明显下调,具有统计学意义(P<0.05);结论高糖可能通过下调miR-223的表达,进而上调PLT活化相关靶基因表达,从而促进动脉粥样硬化及动脉血栓形成,增加IS的发病风险。