简介：【摘要】目的：观察分析实时荧光定量PCR与细胞培养在流感病毒检测中的应用效果。方法：于2019年01月--2020年12月采集的2605例疑似流感样本作为课题对象，均进行实时荧光定量PCR检测、细胞培养检测。对比分析两种不同方法获得的阳性检出率。结果：细胞培养阳性检出率明显低于实时荧光定量PCR阳性检出率（p

简介：【摘要】目的 分析在细菌类微生物污染细胞培养液中使用聚合酶联反应快速检测的效果。方法 选取2020年1月-12月哈尔滨市某院三级医院内200个细胞株（被人为污染的海拉细胞系）进行本次研究，全用PCR快速检测，统计检测有效率。结果 统计后，共出现40个细胞株的扩增片段，检测有效率能达到20.00%，可凸显出PCR扩增的灵敏度。结论 使用PCR快速检测能较快速的分析细胞培养中出现污染的细菌类微生物情况，检测敏锐度和有效性明显，能为早期检测污染提供帮助，值得使用。

简介：

简介：摘要目的探讨4种肿瘤干细胞（CSC）标志物（EpCAM、CD133、CD90和CD24）在肝细胞癌（HCC）组织和外周血循环肿瘤细胞（CTC）中的表达及其在HCC患者预后判断中的价值。方法选取2013年10月至2014年9月共50例肝细胞癌患者的HCC组织和其中29例术前外周血样本，分别采用流式细胞术或qRT-PCR检测HCC组织或外周血CTC中EpCAM、CD133、CD90和CD24的表达，并对患者进行随访获取临床资料（包括肿瘤直径、肿瘤数量、卫星灶、血管浸润、肿瘤包膜完整性、Edmondson分期、BCLC分期和肝硬化等）以及生存时间，比较4种标志物在HCC组织和外周血CTC中的表达与患者生存时间的相关性。结果EpCAM、CD133、CD90和CD24在HCC组织中的表达阳性率分别为66%（33/50）、18%（9/50）、60%（30/50）和56%（28/50），在外周血CTC中的表达阳性率分别为55%（16/29）、38%（11/29）、31%（9/29）和59%（17/29）。HCC组织中CD90表达水平与肝硬化发生呈正相关（P<0.05），CD133表达与患者5年存活率呈负相关（P<0.05）。外周血CTC中EpCAM和CD24表达水平与患者Edmondson分期密切相关（P值均小于0.05）。HCC组织CD133阳性的患者生存时间低于CD133阴性的患者（P<0.05）；HCC组织或者CTC中EpCAM任一阳性的患者生存时间低于双阴性表达的患者（P<0.05）；而实验患者的外周血CTC中CD90单阳性的患者生存时间低于CD90双阴性/双阳性或HCC组织单阳性的患者（P<0.01）。结论根据4种CSC标志物在HCC组织和外周血CTC中的不同表达特征可组合判断患者的预后生存时间提供参考信息，其中HCC组织中CD133表达可作为患者预后判断的指标之一。组织样本和血液样本检测可提供多样化检测的需求。

简介：摘要目的检测肝细胞癌组织中GINS复合物4(GINS4)蛋白的表达，观察其对肝癌细胞侵袭、增殖能力的影响。方法选取河南大学人民医院2019年9月至2020年12月60例肝细胞癌患者术中收集肝细胞癌组织及对应癌旁组织标本分别作为观察组和对照组，采用实时荧光定量聚合酶链反应(RT-qPCR)和蛋白质印迹法(Western blot)检测GINS4在肝细胞癌组织中的表达，使用特异性短发卡RNA (shRNA)构建低表达的肝癌细胞稳定株，将其分为实验组(shRNA组)和对照组(NC组)；Transwell检测其对HepG2细胞的侵袭能力；集落形成实验和细胞计数试剂盒(CCK-8)检测其对HepG2细胞的增殖能力。组间比较采用配对样本t检验。结果RT-qPCR表明GINS4在肝细胞癌组织中表达量(2.89±0.11)高于癌旁组织表达量(1.34±0.15)，差异有统计学意义(t＝8.56，P<0.01)。Western blot显示在肝细胞癌组织中GINS4表达量高于癌旁组织的(1.54±0.76)倍，差异有统计学意义(t＝2.67，P<0.05)，shRNA转染HepG2细胞后，实验组GINS4表达量较对照组的表达量低(1.88±0.34)倍，差异有统计学意义(t＝7.43，P<0.05)；Transwell实验显示实验组穿孔细胞数目[(56.33±3.51)个/视野]低于对照组[(90.42±1.53)个/视野]，差异有统计学意义(t＝3.34，P<0.01)；集落形成实验显示实验组细胞集落数量[(83.33±7.37)个]低于对照组[(345.00±16.64)个]，差异有统计学意义(t＝15.28，P<0.01)；CCK-8实验显示在3 d的吸光度值实验组(1.43±0.11)低于对照组(2.15±0.15)，差异有统计学意义(t＝6.52，P<0.01)。结论在肝细胞癌组织中GINS4表达量高于癌旁组织，降低GINS4的表达能够显著抑制肝癌细胞侵袭及增殖能力。

简介：摘要我国原发性肝癌（肝癌）疾病负担严重，预后不理想。通过简便的方法对肝癌高危人群进行早期筛查，是实现早期诊断和早期治疗，提高肝癌生存率的关键。目前在肝癌的早期筛查方面，甲胎蛋白等血液学检查仍是主要手段，但是其灵敏度及特异度有限，存在高漏诊风险。近年来随着科学技术的不断发展，对传统检测方法的改进以及新兴标志物如甲基化DNA、微小RNA等的出现，为进一步提高早期肝癌筛查的灵敏度和特异度带来了希望。此专家共识总结了传统及新型血液学检查手段的研究进展，并提出了在肝癌早期筛查中应用的专家指导意见，旨在为肝癌早期筛查中血液学检查的应用提供依据，改善我国肝癌防控水平。

简介：摘要大面积创伤或难治性创面的临床治疗十分棘手，寻找合适的伤口敷料对伤口愈合十分重要。干细胞可分泌表达伤口愈合所必需的多种细胞因子，并能在三维(3D)支架材料中较长时间地生长增殖，维持其应有的结构和功能。将干细胞-3D支架复合物以湿润的敷料形式移植于皮肤创面，可显著提高干细胞移植效率，缩短伤口愈合时间，并能减轻瘢痕形成。干细胞-支架复合物或许可成为良好的伤口敷料。该文主要就伤口敷料的选择及干细胞-3D支架复合物作为伤口敷料的研究现状进行综述，旨在为干细胞-3D支架复合物的临床应用提供依据。

简介：摘要 随着高通量技术和生物信息学方法的快速发展，癌症标志物的发现和临床应用越发广泛。肝细胞癌是第三大死亡原因的全球癌症，在中国也是发病率最高的癌症。本研究采用生物信息学分析方法，将101例早期肝细胞癌患者蛋白质组学数据作为发现数据集，根据不同的预后特征将患者分成术后预后较好/较差的Ⅰ型/Ⅱ型。对发现集运用数据预处理、筛选差异蛋白、机器学习方法提取特征等方法，获得多蛋白标志物组合。在159例肝癌患者组成的独立验证集上，基于这些标志物组合进行K均值聚类分析，并通过一致性聚类方法确定

简介：摘要目的探讨中亚苦蒿硅胶柱分离组分（AEM-SC）对小鼠树突状细胞（DC）成熟及免疫功能的影响。方法制备中亚苦蒿大孔吸附树脂70%乙醇洗脱组分，经硅胶柱进一步分离得到洗脱组分AEM-SC，并对其多糖、总黄酮、三萜类含量进行测定。流式细胞术检测AEM-SC对DC表面分子表达水平、抗原吞噬能力及刺激同种异体T细胞增殖能力的影响；酶联免疫吸附测定（ELISA）法检测AEM-SC对DC细胞因子表达的影响。结果AEM-SC中多糖、黄酮类和萜类的含量分别为10.12%、5.70%和3.62%。体外功能实验结果显示，AEM-SC可明显降低脂多糖诱导的DC表面分子CD40、CD86和主要组织相容性复合体Ⅱ类（MHC-Ⅱ）的表达以及细胞因子白细胞介素-12p40（IL-12p40）、肿瘤坏死因子α（TNF-α）和IL-6的水平（均P<0.05），提高DC摄取抗原的能力（P<0.01），降低DC刺激小鼠脾脏CD4+ T与CD8+ T淋巴细胞增殖的能力（均P<0.001）。小鼠炎症模型实验中，AEM-SC可明显降低脂多糖诱导的小鼠体内DC表面分子CD40、CD86、CD80的表达（均P<0.001）以及血清中细胞因子TNF-α、IL-12p40的表达（均P<0.01）。结论AEM-SC在体外与体内实验中均表现出抑制DC成熟的能力，显示AEM-SC具有一定的免疫抑制作用。

简介：【摘要】目的：评估五种肿瘤标志物联检在小细胞肺癌诊断中的价值。方法：选取我院120例患者，其中小细胞肺癌患者共60例纳入观察组，肺部良性疾病患者纳入对照组，共60例，均进行五种肿瘤标志物[癌胚抗原（carcinoembryonic antigen，CEA）、神经元特异性烯醇化酶（neuron-specific enolase，NSE）、细胞角蛋白19片段（Cytokeratin-19-fragment CYFRA21-1）、胃泌素释放肽前体（preproGRP）、人附睾蛋白4（HE4）]测定，进行对比分析。结果：观察组CEA、NSE、CYFRA21-1、preproGRP、HE4均高于对照组，差异具备统计学意义（P＜0.05）。结论：对于合并小细胞肺癌危险因素的患者接受多种血清肿瘤标志物的联合检测对于提高诊断的灵敏度和特异性有重要价值。

简介：摘要目的探讨夏枯草提取物对乳腺癌细胞增殖和凋亡的影响及可能机制。方法采用0.04、0.08、0.16、0.32 mg/ml浓度夏枯草提取物处理乳腺癌MCF-7细胞筛选后续实验浓度。根据处理方法将MCF-7细胞分成不同组别。细胞计数试剂盒8(CCK-8)检测细胞增殖抑制率；蛋白质印迹法检测裂解的半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3(cleaved-Caspase-3)、细胞周期蛋白D1(Cyclin D1)、血管内皮生长因子(VEGF)、磷酸化磷脂酰肌醇3激酶(p-PI3K)和磷酸化蛋白激酶B(p-Akt)蛋白表达；流式细胞仪检测细胞凋亡；实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测miR-195表达水平。两组间比较行t检验，多组间比较采用单因素方差分析，组间两两比较采用SNK检验。结果0.04、0.08、0.16和0.32 mg/ml浓度夏枯草提取物处理后细胞MCF-7增殖率显著低于NC组，差异有统计学意义[(92.11±9.21)%、(78.69±7.87)%、(51.37±5.14)%、(46.05±4.61)%，F＝89.060，P<0.05]。夏枯草提取物处理的MCF-7细胞中cleaved-Caspase-3表达水平(1.05±0.11比0.42±0.04)、细胞凋亡率[(25.22±2.53)%比(8.12±0.80)%]和miR-195表达(3.67±0.37比1.00±0.12)均高于NC组，差异有统计学意义(t＝16.147、19.333、20.593，P<0.05)。miR-195组miR-195表达(3.46±0.35比1.00±0.11)、cleaved-Caspase-3表达(0.96±0.10比0.43±0.04)和凋亡率[(22.36±2.24)%比(8.02±0.80)%]高于miR-NC组，Cyclin D1表达(0.35±0.04比0.92±0.09)和细胞增殖率[(45.27±3.53)%比(89.12±7.10)%]低于miR-NC组(P<0.05)，差异有统计学意义(t＝20.116、17.362、14.763、11.991、18.086，P<0.05)。夏枯草提取物组VEGF(0.40±0.04比0.92±0.09)、p-PI3K(0.32±0.04比0.76±0.08)和p-Akt表达水平(0.34±0.03比0.70±0.06)低于NC组，差异有统计学意义(t＝31.208、42.144，P<0.05)。结论夏枯草提取物通过上调miR-195抑制VEGF/PI3K/Akt信号通路抑制乳腺癌细胞增殖，促进细胞凋亡。

简介：摘要食管癌是我国常见恶性肿瘤之一，2015年食管癌发病率和死亡率分别为17.87/10万和13.68/10万，位列我国发病和死因顺位的第6位和第4位。食管鳞状细胞癌是我国食管癌的主要病理类型，占全部新发病例的86.3%。食管鳞状细胞癌病因尚未明确，危险因素众多，尚无可大规模推广应用的分子标志物。文章对食管鳞状细胞癌的主要危险因素和有潜在筛查应用价值生物标志物的研究进展进行了总结，以期为食管鳞状细胞癌的病因探索和筛查技术完善提供科学依据。

简介：摘要食管癌是我国常见恶性肿瘤之一，2015年食管癌发病率和死亡率分别为17.87/10万和13.68/10万，位列我国发病和死因顺位的第6位和第4位。食管鳞状细胞癌是我国食管癌的主要病理类型，占全部新发病例的86.3%。食管鳞状细胞癌病因尚未明确，危险因素众多，尚无可大规模推广应用的分子标志物。文章对食管鳞状细胞癌的主要危险因素和有潜在筛查应用价值生物标志物的研究进展进行了总结，以期为食管鳞状细胞癌的病因探索和筛查技术完善提供科学依据。

简介：摘要：文章主要是分析了Vero 细胞无血清培养基的组成，在此基础上讲解了Vero细胞无血清细胞培养基的发展，望可以为有关人员提供到一定的参考和帮助。

简介：摘要目的探讨克尔斯滕大鼠肉瘤病毒致癌基因同源物(KRAS)突变亚型对非小细胞肺癌细胞程序性细胞死亡配体1(PD-L1)和2(PD-L2)的表达影响。方法纳入2018年1月至2021年1月甘肃省肿瘤医院收治的KRAS阳性非小细胞肺癌患者95例，通过测序检测KRAS基因组序列，通过实时荧光定量聚合酶链反应(PCR)和免疫印迹检测PD-L1和PD-L2的表达。使用成簇的规则间隔的短回文重复基因编辑(CRISPR/CAS9)技术构建KRAS缺失型A549细胞，在敲除株中过表达KRAS野生型和突变型，检测其对PD-L1和PD-L2的表达影响。将KRAS野生型和突变型过表达的KRAS敲除人肺泡上皮细胞549(A549)细胞株与树突状细胞和细胞因子诱导的杀伤细胞(DC-CIK)，通过流式细胞术检测群集行列式蛋白3阳性(CD3+)细胞的凋亡水平。使用t检验比较连续变量。使用Mann-Whitney检验分析KRAS突变型患者PD-L1和PD-L2。Chi-square检验分析非小细胞肺癌患者KRAS突变型和KRAS野生型的临床特征。结果纳入KRAS阳性非小细胞肺癌患者95例，KRAS野生型31例、KRAS突变型64例；其中KRAS第12位甘氨酸突变为天冬氨酸(G12D)13例、突变为缬氨酸(G12V)12例、突变为半胱氨酸(G12C)25例、突变为丙氨酸(G12A)14例。KRAS突变型患者PD-L1和PD-L2的mRNA表达水平(1.062比1.834，U＝38；1.062比1.668，U＝70；1.062比1.544，U＝111；1.062比1.479，U＝89，P<0.05；1.067比1.798，U＝68；1.067比1.595，U＝86；1.067比1.527，U＝171；1.067比1.680，U＝34，P<0.05)和蛋白表达水平均高于KRAS野生型患者，差异有统计学意义。在KRAS敲除A549细胞株中，相较于KRAS野生型，KRAS突变型更能够促进PD-1配体PD-L1和PD-L2的表达同时，将KRAS-G12D，KRAS-G12V，KRAS-G12C，KRAS-G12A质粒混合在一起作为RAS野生型(KRAS-MT)与KRAS突变型(KRAS-WT)分别转染KRAS敲除A549细胞株，KRAS-MT依旧可以促进PD-1配体PD-L1和PD-L2的表达。在KRAS敲除A549细胞株中过表达KRAS-MT与KRAS-WT后，KRAS突变亚型不能激活细胞外信号调节激酶(ERK)通路，但是可以激活丝氨酸-苏氨酸蛋白激酶(AKT)通路。AKT抑制剂处理后，KRAS-MT与KRAS-WT转染KRAS敲除A549细胞株的PD-L1和PD-L2的表达差异无统计学意义。将转染了KRAS-MT或KRAS-WT的KRAS KO A549细胞株与DC-CIK以1∶1的比例共培养，随后检测DC-CIK细胞的凋亡水平，发现KRAS-MT能够显著增加DC-CIK细胞中CD3+细胞亚群的凋亡(F＝12.5，P<0.05)，差异有统计学意义。结论KRAS突变亚型能够显著增强非小细胞肺癌细胞PD-1配体PD-L1和PD-L2的表达，并且能够促进免疫细胞DC-CIK细胞中CD3+细胞亚群的凋亡。

简介：摘要目的探讨口腔鳞状细胞癌（oral squamous cell carcinoma，OSCC）的代谢紊乱特征，并发现和鉴定OSCC的生物标志物，为其早期诊断提供新思路。方法本研究共纳入2019年8月至2020年1月就诊于郑州大学第一附属医院口腔颌面外科的76例OSCC患者和体检科的70名健康受试者，按照随机数表法按2∶1的比例将所有受试者分为测试组和验证组，测试组共96例受试者，其中OSCC患者51例，健康受试者45名；验证组共50例受试者，其中OSCC患者25例，健康受试者25名。收集所有受试者的血液样本及临床资料，基于超高效液相色谱-四极杆/静电场轨道阱高分辨质谱技术建立血清样本非靶向代谢组学分析方法，进一步结合主成分分析、偏正交最小二乘法判别分析和t检验分析发现并鉴定测试组中OSCC患者和健康受试者之间的差异代谢物，并对得到的差异代谢物进行代谢通路分析。二元Logistic回归分析和受试者工作特征曲线分析用以进一步筛选和确定OSCC的生物标志物，构建OSCC诊断模型，用验证组检验诊断模型的诊断效能。结果对比分析测试组中OSCC患者和健康受试者的血清样本后得到21种内源性差异代谢物，代谢通路分析提示OSCC患者存在脂质代谢和氨基酸代谢紊乱（P<0.05）。本研究构建了由溶血磷脂酰胆碱（lysophosphatidylcholine，LysoPC）（16∶0/0∶0）、LysoPC［18∶1（9Z）/0∶0］、牛磺酸和D-谷氨酸组成的诊断模型（曲线下面积为0.998，95%CI为0.994~0.999，P<0.05）。结论OSCC患者体内发生了明显的脂质和氨基酸代谢紊乱，代谢组学手段是建立OSCC诊断模型的有效方法。

简介：摘要最新研究数据显示，肝癌患者死亡人数位居恶性肿瘤第3位，全球肝癌早发现、早诊断和早治疗的情形严峻，如何实现肝癌的早期诊断具有重要的临床意义。目前临床上常用甲胎蛋白、甲胎蛋白-L3和脱-γ-羧基凝血酶原检测肝细胞癌，然而其灵敏度无法满足早期肝癌患者的诊断需求；随着分子生物学技术的发展，血清寡糖链检测、醛酮还原酶家族1成员B10、微小RNAs、循环肿瘤细胞和DNA甲基化等新型血清生物学标志物等检测指标为肝细胞癌患者的早期筛查和诊断提供了新的选择。

简介：【摘要】目的：探究晚期非小细胞肺癌靶向治疗时应用血清肿瘤标志物预测疗效的意义。方法：2020.1-2021.5，对该阶段在本院进行靶向治疗的晚期非小细胞肺癌患者进行回顾性分析，抽取其中20例部分缓解、20例稳定病情与20例病情进展患者进行分析，患者治疗前、治疗3周期后均抽取血样检测血清肿瘤标志物，获取患者的检查报告，对比检测结果。结果：部分缓解患者治疗后的五项肿瘤标志物低于治疗前（P＜0.05），部分缓解患者治疗后的五项肿瘤标志物低于病情稳定及疾病进展患者（P＜0.05）。结论：通过检测晚期非小细胞肺癌患者的血清肿瘤标志物水平，结合标志物水平变化可预测患者的靶向治疗效果。

简介：摘要：本文综述了人参的药理作用、临床应用以及服用人参的宜忌特点，为人参相关研究提供理论基础。

简介：无