简介:摘要目的探讨缓激肽(BK)促进非小细胞肺癌(NSCLC)放疗耐受的作用机制。方法实时定量反转录聚合酶链反应(RT-qPCR)检测细胞株中信使RNA(mRNA)的表达;瞬时转染技术在细胞株中转染小干扰RNA(siRNA);蛋白质印迹法(Western blot)检测细胞中Snail的表达;噻唑蓝(MTT)实验检测放疗后细胞存活情况;彗星实验检测放疗后细胞DNA修复能力变化。组间比较采用t检验。结果BK在耐放射人肺癌细胞株中的表达显著高于亲代细胞(A549R26比A549:58.582±3.986比1.000±0.249,t=14.418,P<0.01;H157R24比H157:23.979±0.791比1.000±0.101,t=28.817,P<0.01)。在放疗4 h后亲代细胞中BK即明显升高(A549:6.530±0.603比1.000±0.214,t=8.642,P<0.01;H157:1.384±0.031比1.000±0.125,t=2.982,P<0.05)。用BK处理肺癌亲代细胞株后,神经内分泌标志物NSE(A549:1.551±0.071比1.000±0.027,t=7.254,P<0.01;H157:1.343±0.064比1.000±0.037,t=4.640,P<0.01)、表达上升,而用BK的拮抗剂处理肺癌耐放射细胞株后,NSE(A549R26:0.703±0.036比1.000±0.045,t=5.154,P<0.01;H157R24:0.780±0.017比1.000±0.046,t=4.486,P<0.05)表达下降。亲代细胞在过表达BK后,细胞放射后的存活率增加,DNA修复能力增强;而耐放射细胞在抑制BK表达后,这些耐放射特性减弱。Snail在耐放射细胞中表达高于亲代细胞(A549R26比A549:5.223±0.216比1.000±0.061,t=18.815,P<0.01;H157R24比H157:3.698±0.360比1.000±0.057,t=7.402,P<0.01)。BK处理亲代细胞后,Snail的蛋白表达升高;用BK拮抗剂处理耐放射细胞后,Snail蛋白表达下降。抑制肺癌耐放射细胞的Snail表达后,细胞的耐放射特性减弱。结论BK通过激活Snail通路促进NSCLC的放疗耐受。
简介:目的:观察现代中药蛇床子素(osthole,OST)对多囊卵巢大鼠卵巢功能紊乱及卵巢组织过氧化物酶体增殖物激活受体γ(PPARγ)蛋白表达的调节作用。方法:36只SD大鼠随机分为模型组、OST组和对照组三组,模型组、OST组采用16周持续光照诱导雌性SD大鼠表现多囊卵巢(polycysticovary,PCO)状态,OST组从14周开始连续3周OST腹腔注射。16周末比较各组每日阴道涂片,卵巢病理改变;称取卵巢、子宫质量,并检测血清雌二醇(estradiol,E_2)、睾酮(testosterone,T)水平及卵巢PPARγ蛋白表达水平。结果:模型组大鼠卵巢周期消失,卵巢多囊样增大,T水平升高,卵巢PPARγ蛋白表达下降;OST组卵巢发情周期增加,血清E2水平提高,卵巢增大被抑制,同时卵巢PPARγ蛋白表达水平增加,但对血清T水平无明显影响。结论:OST可能通过提高卵巢PPARγ蛋白表达水平发挥改善卵巢周期紊乱的作用,可以作为多囊卵巢综合征(polycysticovarysyndrome,PCOS)标准化中药治疗的选择。
简介:摘要目的探讨姜黄素对脓毒症小鼠急性肺损伤的保护作用及机制。方法取120只清洁级BALB/c雄性小鼠随机(随机数字法)分成8组,即假手术组、脓毒症组、姜黄素对照组、姜黄素干预组、阴性病毒-脓毒症组、阴性病毒-姜黄素干预组、线粒体融合蛋白(Mfn2)干扰-脓毒症组、Mfn2干扰-姜黄素干预组,每组15只。脓毒症组及姜黄素干预组通过盲肠结扎穿孔术(cecal ligation and puncture, CLP)造模,姜黄素干预组及姜黄素对照组予姜黄素200 mg/(kg·d)灌胃1周,阴性病毒-脓毒症组及阴性病毒-姜黄素干预组通过尾静脉注射阴性腺相关病毒来建立,Mfn2干扰-脓毒症组及Mfn2干扰-姜黄素干预组通过尾静脉注射携带Mfn2干扰序列的腺相关病毒建立模型,各组均于24 h后处死小鼠。通过肺湿干比和病理学检查反映肺损伤程度,ELISA法检测肺泡灌洗液的炎症因子TNF-α和IL-6,Western blot检测细胞凋亡的关键分子caspase-3的活化,并通过TUNEL检测细胞凋亡。采用SPSS 22.0软件进行统计分析,计数资料比较采用χ2检验,计量资料组间比较采用单因素方差分析。结果与假手术组比较,脓毒症组小鼠肺组织湿干重比显著增加(71.11±3.78 vs 31.11±5.61, P=0.002);与假手术组相比,脓毒症组织病理评分明显增加(P=0.006),炎症因子TNF-α(P=0.001)和IL-6(P=0.012)显著增高,肺组织细胞凋亡及凋亡相关蛋白caspase-3 cleaved表达同样明显增加(P=0.001)。与脓毒症组比较,姜黄素干预组小鼠肺组织湿干重比明显降低(32.84±6.15 vs 71.11±3.78, P=0.004),组织病理评分显著降低(P=0.004),炎症因子TNF-α(P=0.013)和IL-6(P=0.003)均明显降低,肺组织细胞凋亡及凋亡相关蛋白caspase-3 cleaved表达同样显著减少(P=0.012)。在下调Mfn2后,Mfn2干扰-姜黄素干预组与Mfn2干扰-脓毒症组相比,小鼠肺组织干湿重比无明显降低,组织病理评分也无显著降低,炎症因子TNF-α和IL-6均无明显降低,肺组织细胞凋亡及凋亡相关蛋白caspase-3 cleaved表达无显著减少。结论姜黄素可能通过上调线粒体融合蛋白2的表达减轻脓毒症急性肺损伤。