简介：摘要肾上腺皮质肿瘤是一种罕见且有高度侵袭性的恶性内分泌肿瘤，由于早期诊断困难，多数患者确诊时已有远处转移，导致其临床疗效及预后较差。Wnt/β-catenin信号通路是一条高度保守的发育信号转导通路，在参与胚胎发育及组织稳态的过程中，涉及调节细胞增殖、分化、极性及凋亡。异常激活的信号通路在肿瘤的发生发展中发挥重要作用。本文主要就Wnt/β-catenin信号通路在肾上腺皮质肿瘤中的研究进展作一综述。

简介：摘要目的探讨miR-605-3p是否影响肺癌细胞A549的增殖和细胞活力。方法转染合成的miR-605-3p模拟物过表达miR-605-3p为过表达组，转染合成的miR-605-3p抑制剂敲低miR-605-3p为敲低组，通过CCK-8和MTT检测2组肺癌细胞A549的增殖水平和细胞活力。通过miRDB在线分析miR-605-3p潜在底物，并通过荧光素酶报告实验验证并分析潜在底物的作用。结果过表达组肺癌细胞A549的增殖水平和细胞活力较对照组均下降(t＝12.45、15.38，P值均<0.05)；敲低组肺癌细胞A549的增殖水平和细胞活力较对照组均上升(t＝11.54、8.45，P值均<0.05)。miR-605-3p靶向TRIB3的3′端非编码区(t＝17.32，P值均<0.05)。过表达TRIB3后，肺癌细胞A549的增殖水平和细胞活力均上升(t＝10.45、9.04，P值均<0.05)。敲低TRIB3后，肺癌细胞A549的增殖水平和细胞活力均下降(t＝8.43、17.43，P值均<0.05)。过表达miR-605-3p后，TRIB3的表达下降，β-catenin进入细胞核的量减少；敲低miR-605-3p后，TRIB3的表达上升，β-catenin进入细胞核的量增加。同时敲低miR-605-3p和TRIB3或miR-605-3p和β-catenin，发现肺癌细胞A549的增殖水平和细胞活力差异无统计学意义(t＝0.42、0.61，P值均>0.05)；过表达TRIB3的同时敲低β-catenin，发现肺癌细胞A549的增殖水平和细胞活力差异无统计学意义(t＝0.56、0.21，P值均>0.05)。结论miR-605-3p靶向TRIB3抑制β-catenin的入核水平，抑制肺癌细胞A549的增殖水平和细胞活力。

简介：摘要牙缺失是口腔临床最常见的先天性颅面发育异常疾病，由遗传因素或(和)环境因素导致。牙齿发育受多条信号通路调控，其相关基因发生变异可导致牙齿发育异常。其中，Wnt/β-catenin信号通路相关基因缺陷是造成先天性牙缺失的重要原因之一。本文就近年来导致牙缺失的Wnt/β-catenin信号通路关键基因的分子遗传学研究进行综述，以期进一步了解Wnt/β-catenin信号通路在牙齿发育中的作用，为先天性牙缺失遗传学病因研究提供新的方向。

简介：摘要目的探讨LYN对胃癌细胞迁移、侵袭等生物学行为的影响，并分析其对Wnt/β-catenin信号通路的调控机制。方法选取2017年10月—2018年5月承德医学院附属医院收治的胃癌患者的胃癌组织和癌旁组织样本，采用qRT-PCR检测在临床收集的胃癌和癌旁组织样本中的LYN表达水平。以胃癌AGS细胞为实验对象，利用脂质体Lipofectamine2000将shRNA-LYN转染至胃癌AGS细胞中作为实验组(sh-LYN组)，未转染细胞为对照组(NC组)。qRT-PCR检测转染前后AGS细胞中LYN mRNA表达情况。Transwell检测细胞的迁移和侵袭；TUNEL检测细胞凋亡；蛋白印迹分析(Western Blot)检测Wnt/β-catenin信号通路相关蛋白，对其调控机制进行研究。计量资料以均值±标准差(Mean±SD)表示，两组间比较采用独立样本t检验。P<0.05为差异具有统计学意义。结果LYN mRNA表达在胃癌组织中被显著上调(t＝11.04，P<0.001)；sh-LYN转染胃癌细胞可使LYN蛋白的表达量低于正常对照组(F＝961.26, P＝0.016)；转染后，sh-LYN组细胞的迁移、侵袭受到抑制(t＝3.437、4.450，P＝0.011、0.026)，转染后sh-LYN组细胞的凋亡率显著高于正常对照组(t＝6.482，P＝0.003)；Western Blot检测结果：相比于正常对照组，sh-LYN敲低LYN的表达之后，可显著降低Wnt3和β-catenin的表达。下游蛋白的检测发现LYN敲低后，EMT上皮标记E-钙黏蛋白(E-cadherin)的表达增加，EMT间充质标记N-钙黏蛋白(N-cadherin)，波形蛋白(vimentin)表达则下调，相关蛋白锌指蛋白1(Snail1)和锌指蛋白2(Snail2)表达也下调。结论敲低LYN可抑制胃癌细胞的迁移和侵袭，并诱导胃癌细胞凋亡，其过程与Wnt/β-catenin信号通路有关。

简介：摘要目的探讨丰富环境饲养促进脑缺血小鼠海马区突触重塑的作用机制。方法清洁级成年雄性小鼠(C57BL/6)60只，按随机数字表法选取16只设为假手术组，剩余44只接受永久性左侧大脑中动脉栓塞(pMCAO)手术。将造模成功的32只小鼠随机分为标准饲养组和丰富环境组，每组16只。术后3 d行丰富环境干预，假手术组和标准环境组置于标准环境鼠笼中饲养，丰富环境组置于丰富环境鼠笼中饲养，持续干预28 d；干预28 d后，采用透射电镜技术及蛋白免疫印迹检测技术，分别检测和观察分析3组小鼠海马CA3区的突触数量以及海马区Wnt7a、Dvl1、β-catenin、突触素、PSD-95蛋白表达水平的变化。结果与标准环境组相比，丰富环境组海马区突触素、PSD-95、Wnt7a、Dvl1、β-catenin的蛋白表达水平显著升高，与标准饲养组比较，差异均有统计学意义(P<0.05)。丰富环境组海马CA3区的突触数量亦明显高于标准饲养组(P<0.05)。结论丰富环境可以激活脑缺血小鼠海马区Wnt7a-β-catenin-Dvl1信号通路，从而促进脑缺血小鼠海马区突触重塑。

简介：摘要目的探讨GSK-3β/β-catenin对慢性睡眠剥夺致小鼠焦虑抑郁样行为的调控作用。方法选取48只10周龄C57BL/6J雄性小鼠按体质量随机分为4组：空白对照组、单纯抑制剂组(LiCl)、慢性睡眠剥夺组(CSD)和抑制剂+慢性睡眠剥夺干预组(LiCl+CSD)，每组n＝12。采用高架十字迷宫和强迫游泳实验对小鼠进行焦虑抑郁样行为学测试；HE染色观察小鼠大脑海马病理改变；Western blot检测海马组织β-catenin、GSK-3β和p-GSK-3β蛋白表达量。采用SPSS 22.0软件进行独立样本t检验和单因素方差分析。结果CSD组小鼠体质量[(26.53±0.76)g]增长低于对照组[(28.00±0.37)g](q＝4.119，P＝0.041)，LiCl+CSD组[(28.04±0.86)g]体质量较CSD组升高(q＝4.240，P＝0.036)。高架十字迷宫实验中，CSD组小鼠进入开放臂的次数比[(48.44±9.16)%]、开放臂停留时间占比[(16.47±10.42)%]均较对照组[(68.92±11.71)%，(42.93±15.89)%]显著下降(q＝4.660，P＝0.018；q＝4.346，P＝0.029)，LiCl+CSD组小鼠开放臂停留时间占比[(32.92±12.05)%]较CSD组显著升高(q＝2.432，P＝0.038)。强迫游泳实验中，CSD组小鼠漂浮不动时间百分比[(55.00±5.36)%]显著高于对照组[(39.95±2.87)%](P＝0.023)，LiCl+CSD组小鼠[(42.00±7.92)%]较CSD组有所下降(P＝0.040)。Western blot结果显示，与对照组比较，CSD组小鼠海马组织p-GSK-3β和β-catenin表达均显著降低(P＝0.040，P＝0.008)，GSK-3β表达显著升高(P<0.001)；与CSD组比较，CSD+LiCl组p-GSK-3β和β-catenin明显发生逆转(P＝0.034，P＝0.038)。结论GSK-3β/β-catenin信号通路可能参与调控CSD致小鼠焦虑抑郁样行为的发生。

简介：AbstractBackground:Histone deacetylase 4 (HDAC4) regulates chondrocyte hypertrophy and bone formation. The aim of the present study was to explore the effects of HDAC4 on Interleukin 1 beta (IL-1β)-induced chondrocyte extracellular matrix degradation and whether it is regulated through the WNT family member 3A (WNT3A)/β-catenin signaling pathway.Methods:Primary chondrocytes (CC) and human chondrosarcoma cells (SW1353 cells) were treated with IL-1β and the level of HDAC4 was assayed using Western blotting. Then, HDAC4 expression in the SW1353 cells was silenced using small interfering RNA to detect the effect of HDAC4 knockdown on the levels of matrix metalloproteinase 3 (MMP3) and MMP13 induced by IL-1β. After transfection with HDAC4 plasmids, the overexpression efficiency was examined using Real-time quantitative polymerase chain reaction (qRT-PCR) and the levels of MMP3 and MMP13 were assayed using Western blotting. After incubation with IL-1β, the translocation of β-catenin into the nucleus was observed using immunofluorescence staining in SW1353 cells to investigate the activation of the WNT3A/β-catenin signaling pathway. Finally, treatment with WNT3A and transfection with glycogen synthase kinase 3 beta (GSK3β) plasmids were assessed for their effects on HDAC4 levels using Western blotting.Results:IL-1β downregulated HDAC4 levels in chondrocytes and SW1353 cells. Furthermore, HDAC4 knockdown increased the levels of MMP3 and MMP13, which contributed to the degradation of the extracellular matrix. Overexpression of HDAC4 inhibited IL-1β-induced increases in MMP3 and MMP13. IL-1β upregulated the levels of WNT3A, and WNT3A reduced HDAC4 levels in SW1353 cells. GSK-3β rescued IL-1β-induced downregulation of HDAC4 in SW1353 cells.Conclusion:HDAC4 exerted an inhibitory effect on IL-1β-induced extracellular matrix degradation and was regulated partially by the WNT3A/β-catenin signaling pathway.

简介：摘要目的评价乌司他丁对幼鼠高氧急性肺损伤的影响及其与Wnt/β-连环素(β-catenin)信号通路的关系。方法清洁级健康雄性SD大鼠36只，14日龄，体重40～50 g，采用随机数字表法分为3组(n＝12)：对照组(C组)、高氧致急性肺损伤组(ALI组)和乌司他丁组(UTI组)。ALI组和UTI组采用吸入高浓度氧(氧浓度>90%)72 h的方法制备幼鼠高氧急性肺损伤模型，C组正常呼吸空气。模型制备成功后1 d时开始，UTI组每天同一时点腹腔注射乌司他丁50 000 U/kg，连续注射3 d；C组和ALI组于相同时点腹腔注射等容量生理盐水。于模型制备成功后4 d时处死大鼠取肺组织，确定湿重/干重(W/D)比值，光镜下观察病理学结果并行肺损伤评分，电镜下观察细胞超微结构，采用ELISA法检测IL-6、IL-1β和TNF-α含量，采用Western blot法检测磷酸化糖原合成激酶3β(p-GSK-3β)、Wnt3a和β-catenin的表达。结果与C组比较，ALI组和UTI组肺组织W/D比值和肺损伤评分升高，肺组织IL-6、IL-1β和TNF-α含量、p-GSK-3β、Wnt3a和β-catenin表达水平升高(P<0.05)；与ALI组比较，UTI组肺组织W/D比值和肺损伤评分降低，肺组织IL-6、IL-1β和TNF-α含量、p-GSK-3β、Wnt3a和β-catenin表达水平降低(P<0.05)。UTI组肺组织细胞超微结构损伤较ALI组减轻。结论乌司他丁减轻高氧致幼鼠急性肺损伤的机制与抑制Wnt/β-catenin信号通路激活，降低炎症反应有关。

简介：摘要目的检测Wnt信号通路相关分子β-catenin、细胞周期蛋白D1(Cyclin D1)、Dickkopf-1(DKK1)在乳腺疾病组织中的表达差异，探讨其在乳腺癌病理辅助诊断中的应用价值。方法收集广州医科大学附属肿瘤医院2008年1月至2019年8月手术切除的乳腺组织标本90例，其中乳腺增生症30例、乳腺导管内癌30例、乳腺浸润性导管癌30例。免疫组织化学法检测β-catenin、Cyclin D1、DKK1在各组乳腺组织中的表达。利用Oncomine数据库和KM plotter数据库分析β-catenin、Cyclin D1、DKK1在乳腺癌与正常乳腺组织中的表达差异及其与乳腺癌生存预后的关系，并用以验证免疫组织化学结果。应用受试者工作特征(ROC)曲线评估各分子的病理辅助诊断效能。结果在乳腺增生症、乳腺导管内癌和乳腺浸润性导管癌中，β-catenin、Cyclin D1、DKK1的表达差异均有统计学意义(χ2＝7.766，P＝0.021；χ2＝24.133，P<0.001；χ2＝11.585，P＝0.003)。β-catenin在乳腺浸润性导管癌组中的表达显著高于乳腺导管内癌组和乳腺增生症组(Z＝-2.367，P＝0.018；Z＝-2.462，P＝0.014)；Cyclin D1在乳腺浸润性导管癌组和乳腺导管内癌组中的表达显著高于乳腺增生症组(Z＝-4.166，P<0.001；Z＝-4.174，P<0.001)；DKK1在乳腺浸润性导管癌组和乳腺导管内癌组中的表达显著高于乳腺增生症组(Z＝-3.090，P＝0.002；Z＝-2.923，P＝0.003)。生物信息学分析结果显示，与正常乳腺组织相比，β-catenin mRNA在乳腺浸润性癌组织中表达升高2.33倍(t＝15.242，P<0.001)，Cyclin D1 mRNA在乳腺导管内癌组织中表达升高6.64倍(t＝7.152，P＝0.006)；DKK1 mRNA在正常乳腺组织中表达较乳腺浸润性癌组织升高3.41倍，差异无统计学意义(t＝-13.193，P>0.999)；Cyclin D1高表达组乳腺癌患者中位生存期173.2个月，短于低表达组的228.9个月(P<0.001)；DKK1高表达组患者上四分位数生存期55.1个月，长于低表达组的40.4个月(P<0.001)。将乳腺浸润性导管癌与乳腺导管内癌合并为肿瘤组，以β-catenin和Cyclin D1的免疫组织化学评分之和减去DKK1的免疫组织化学评分作为联合评分方案1，以β-catenin和Cyclin D1的免疫组织化学评分之和作为联合评分方案2，ROC曲线分析结果显示，β-catenin、Cyclin D1、联合方案1和联合方案2病理辅助诊断乳腺癌的曲线下面积(AUC)分别为0.65(P＝0.080)、0.81(P<0.001)、0.70(P＝0.023)和0.78(P＝0.001)，其中Cyclin D1和联合方案2的AUC均≥0.7，具有良好的病理辅助诊断价值。结论Wnt信号通路相关分子Cyclin D1及Cyclin D1联合β-catenin检测对乳腺癌具有良好的病理辅助诊断价值。

简介：摘要目的探讨KLF11在胃癌组织中的表达及其对胃癌细胞BGC823增殖和凋亡的影响。方法收集60例胃癌组织及其对应的癌旁组织，用RT-PCR检测KLF11 mRNA表达，通过小分子RNA干扰抑制胃癌细胞BGC823中KLF11表达水平；MTT法检测细胞的活力；流式细胞仪检测细胞周期、凋亡率；采用Western blot检测细胞周期、凋亡相关指标蛋白和Wnt/β-catenin的改变；采用酶标仪检测Caspase3酶活性。结果KLF11 mRNA在胃癌组织相对表达水平较癌旁组织升高（t=11.38，P<0.05），其表达与肿瘤大小、浸润深度、淋巴结转移及TNM分期均有关（均P<0.05）；沉默KLF11表达后，胃癌BGC823细胞的增殖能力受抑制（F=19.56，P<0.05）；G0/G1期细胞数目增多［（41.40%±0.98%）比（66.53%±1.01%），F=32.69，P<0.05］，并且凋亡率升高［（41.44%±1.59%）比（15.42%±0.86%），F=35.35，P<0.05］；Bax、Cleaved Caspase3蛋白表达上升（F=23.33、33.63，均P<0.05），β-catenin、Bcl-2、CyclinD1、CyclinE蛋白表达降低（F=22.21、16.24、26.75、33.42，均P<0.05），Caspase3酶的活性增加（F=16.56，P<0.05）。结论KLF11在胃癌组织中呈高表达，下调其表达可抑制Wnt/β-catenin信号通路，抑制胃癌细胞增殖，诱导细胞凋亡。

简介：摘要目的探讨长链非编码RNA(LncRNA)HOTAIR对肾母细胞瘤细胞增殖、凋亡与耐药性的影响及分子机制。方法收集2015—2019年于郑州大学附属儿童医院手术治疗的32例肾母细胞瘤患儿的肾母细胞瘤组织和癌旁正常组织，采用实时荧光定量聚合酶链反应检测肾母细胞瘤组织和癌旁组织中HOTAIR的表达，CCK-8法检测细胞的增殖能力，流式细胞术和TUNEL染色检测细胞凋亡水平，Western blot检测细胞中Wnt/β-catenin信号通路相关蛋白的表达，CCK-8检测转染后经过不同浓度顺铂处理下的细胞增殖抑制情况。结果HOTAIR在肾母细胞瘤组织中的表达水平为2.02±0.18，高于癌旁组织(0.61±0.04，P<0.05)。si-HOTAIR组细胞中Wnt、β-catenin、Cyclin D1、c-myc蛋白的表达水平分别为0.54±0.05、0.41±0.05、0.25±0.03和0.56±0.06，均低于对照组(分别为0.89±0.08、0.94±0.10、0.72±0.06和1.10±0.11)和si-RNA组(分别为1.06±0.11、0.92±0.08、0.66±0.07和1.25±0.11，均P<0.05)。转染24、48和72 h后，si-HOTAIR组细胞的吸光度值分别为0.31±0.02、0.37±0.04和0.69±0.07，均低于对照组(分别为0.49±0.05、0.78±0.08和1.22±0.14)和si-RNA组(分别为0.57±0.06、0.68±0.07和0.94±0.09，均P<0.05)。si-HOTAIR组细胞的凋亡率为(13.81±1.25)%，高于对照组[(6.54±0.72)%]和si-RNA组[(4.35±0.40)%，均P<0.05]；si-HOTAIR组细胞的TUNEL阳性细胞率为(35.14±3.50)%，高于对照组[(20.16±2.18)%]和si-RNA组[(21.09±2.35)%，均P<0.05]。si-HOTAIR组细胞的半数抑制浓度为(62.48±5.97)μmol/L，均低于对照组[(88.27±9.05)μmol/L]和si-RNA组[(92.50±9.11)μmol/L，均P<0.05]。结论抑制LncRNA HOTAIR的表达可抑制肾母细胞瘤细胞的增殖活性，促进细胞凋亡，降低细胞对顺铂的耐药性，其机制可能与抑制Wnt/β-catenin信号通路的激活有关。

简介：摘要目的初步探讨在培养的骨髓间充质干细胞(BMSCs)层面，晚期糖基化终末产物(AGEs)对BMSCs成骨分化中β-catenin、碱性磷酸酶(ALP)的影响，以及甲状旁腺激素(PTH)的干预及其机制。方法取第三代BMSCs，检测AGEs对其增殖的影响。将BMSCs分为对照组、AGEs组、Wnt3a组、AGEs+Wnt3a组；对照组、AGEs组、AGEs+晚期糖基化终末产物受体(RAGE)抗体组；对照组、AGEs组、AGEs+PTH组；对照组、PTH组、PTH+Dickkopf相关蛋白1(DKK1)组，应用Western-blot法检测β-catenin、ALP蛋白的表达。结果BMSCs的增殖可以被AGEs抑制。0.2 g/L AGEs干预BMSCs 7 d，AGEs抑制β-catenin、ALP蛋白表达有统计学差异；给予Wnt通路促进剂Wnt3a后，AGEs作用被抑制，β-catenin、ALP蛋白表达较AGEs组增加；加入10 mg/L RAGE中和抗体共培养，与AGEs组相比，β-catenin、ALP蛋白表达增高。加入PTH后可以逆转AGEs的负性成骨作用，β-catenin、ALP蛋白表达增高；加入Wnt通路阻滞剂DKK1共培养，β-catenin、ALP蛋白表达较PTH组增加。结论AGEs-RAGE通过Wnt/β-catenin信号通路抑制大鼠BMSCs ALP蛋白表达；PTH逆转AGEs对β-catenin、ALP的负性作用。

简介：摘要目的探讨甲状腺功能亢进症（简称甲亢）患者外周血单个核细胞微小RNA（miR）-206表达水平与Wnt/β-连环蛋白（β-catenin）通路中Wnt-1和β-catenin表达水平的相关性。方法采用前瞻性设计，选择2018年1月至2020年6月武威市人民医院收治的甲亢患者79例作为观察组，另选择2019年1月至2020年9月武威市人民医院健康体检者70例作为对照组。观察组使用抗甲状腺药物治疗，于治疗期口服他巴唑10~20 mg/d；血清甲状腺激素正常后减量，维持他巴唑5~10 mg/d，持续治疗12个月。采用实时荧光定量PCR（qRT-PCR）检测观察组治疗前后以及对照组外周血单个核细胞miR-206，Wnt-1、β-catenin mRNA表达水平。结果观察组治疗前外周血单个核细胞miR-206表达水平低于对照组（0.28 ± 0.07比0.79 ± 0.15），Wnt-1和β-catenin mRNA表达水平均高于对照组（6.75 ± 1.39比2.23 ± 0.65，5.83 ± 1.24比3.21 ± 0.86，P均< 0.05）。观察组治疗后外周血单个核细胞miR-206表达水平（0.54 ± 0.13）高于治疗前，Wnt-1和β-catenin mRNA表达水平（3.62 ± 1.08、4.34 ± 1.16）均低于治疗前（P均< 0.05）。甲亢患者外周血单个核细胞miR-206表达水平与Wnt-1、β-catenin mRNA表达水平均呈负相关（r = - 0.763、- 0.798，P均< 0.05）。结论甲亢患者外周血单个核细胞miR-206低表达，而Wnt-1和β-catenin mRNA高表达，miR-206表达水平与Wnt-1、β-catenin mRNA表达水平均呈负相关。

简介：摘要目的探讨长链非编码RNA(LncRNA)HOTAIR对肾母细胞瘤细胞增殖、凋亡与耐药性的影响及分子机制。方法收集2015—2019年于郑州大学附属儿童医院手术治疗的32例肾母细胞瘤患儿的肾母细胞瘤组织和癌旁正常组织，采用实时荧光定量聚合酶链反应检测肾母细胞瘤组织和癌旁组织中HOTAIR的表达，CCK-8法检测细胞的增殖能力，流式细胞术和TUNEL染色检测细胞凋亡水平，Western blot检测细胞中Wnt/β-catenin信号通路相关蛋白的表达，CCK-8检测转染后经过不同浓度顺铂处理下的细胞增殖抑制情况。结果HOTAIR在肾母细胞瘤组织中的表达水平为2.02±0.18，高于癌旁组织(0.61±0.04，P<0.05)。si-HOTAIR组细胞中Wnt、β-catenin、Cyclin D1、c-myc蛋白的表达水平分别为0.54±0.05、0.41±0.05、0.25±0.03和0.56±0.06，均低于对照组(分别为0.89±0.08、0.94±0.10、0.72±0.06和1.10±0.11)和si-RNA组(分别为1.06±0.11、0.92±0.08、0.66±0.07和1.25±0.11，均P<0.05)。转染24、48和72 h后，si-HOTAIR组细胞的吸光度值分别为0.31±0.02、0.37±0.04和0.69±0.07，均低于对照组(分别为0.49±0.05、0.78±0.08和1.22±0.14)和si-RNA组(分别为0.57±0.06、0.68±0.07和0.94±0.09，均P<0.05)。si-HOTAIR组细胞的凋亡率为(13.81±1.25)%，高于对照组[(6.54±0.72)%]和si-RNA组[(4.35±0.40)%，均P<0.05]；si-HOTAIR组细胞的TUNEL阳性细胞率为(35.14±3.50)%，高于对照组[(20.16±2.18)%]和si-RNA组[(21.09±2.35)%，均P<0.05]。si-HOTAIR组细胞的半数抑制浓度为(62.48±5.97)μmol/L，均低于对照组[(88.27±9.05)μmol/L]和si-RNA组[(92.50±9.11)μmol/L，均P<0.05]。结论抑制LncRNA HOTAIR的表达可抑制肾母细胞瘤细胞的增殖活性，促进细胞凋亡，降低细胞对顺铂的耐药性，其机制可能与抑制Wnt/β-catenin信号通路的激活有关。

简介：摘要目的研究探讨miR-9是否在调控糖原合成酶激酶（GSK）-3β表达，影响Wnt/β-catenin通路活性和OA发病中起作用。方法采集50例我院接受OA全膝关节置换术的患者软骨组织和外伤性截肢后的正常软骨组织，比较miR-9、GSK-3β的表达。双荧光素酶基因报告试验验证miR-9与GSK-3β之间是否存在靶向调控关系。建立OA大鼠模型，ELISA法检测关节腔液中Hyp含量，试剂盒检测caspase-3活性，检测软骨组织中miR-9、GSK-3β的表达差异。将OA模型大鼠分成3组：假手术组（Sham组）、OA+antagomiR-NC组、OA+antagomiR-9组，EILSA检测关节腔液中Hyp含量，试剂盒检测caspase-3活性，流式检测细胞软骨组织中细胞凋亡，qRT-PCR和蛋白质印迹法检测miR-9、GSK-3β、β-catenin、COL2A1的表达量。2组间比较采用独立样本t检验，多组间比较采用单因素方差分析，再以Bonferroni法进行2组间的比较。结果miR-9表达量对照组为（1.09±0.25），OA组为（2.86±0.25）（t=24.30，P<0.01）。GSK-3β mRNA表达量对照组为（0.99±0.11），OA组为（0.53±0.10）（t=15.40，P<0.01），miR-9与GSK-3β之间存在靶向调控作用关系。大鼠软骨组织中miR-9的表达量Sham组为（1.00±0.21），OA组为（2.61±0.36）（t=9.462，P<0.01）。大鼠软骨组织中GSK-3β mRNA的表达量Sham组为（1.00±0.18），OA组为（0.52±0.09）（t=5.842，P<0.01）。大鼠关节腔液中Hyp含量Sham组为（10±3） ng/ml，OA组为（50±8） ng/ml（t=11.015，P<0.01）。大鼠软骨组织中caspase-3活性Sham组为（1.00±0.19），OA组为（2.43±0.36）（t=8.605，P<0.01）。大鼠软骨组织中miR-9的表达量OA+antagomiR-NC组为（2.86±0.31），OA+antagomiR-9组为（1.67±0.19）（F=105.2，P<0.01）。大鼠软骨组织中GSK-3β mRNA的表达量OA+antagomiR-NC组为（0.41±0.09），OA+antagomiR-9组为（0.81±0.09）（F=49.32，P<0.01）。大鼠关节腔液中Hyp含量OA+antagomiR-NC组为（52.3±6.8） ng/ml，OA+antagomiR-9组为（30.3±3.4） ng/ml （F=119.7，P<0.01）。大鼠软骨组织中caspase-3活性OA+antagomiR-NC组为（2.22±0.23），OA+antagomiR-NC组为（1.43±0.14）（F=72.55，P<0.01）。与OA+antagomiR-NC组相比，OA+miR-antagomiR-9组大鼠软骨组织中β-catenin、GSK-3β、COL2A1蛋白的表达升高，细胞凋亡减少。结论miR-9的表达升高在降低GSK-3β表达，增强Wnt/β-catenin通路活性，促进软骨基质降解、破坏和OA发病中起作用，抑制miR-9表达则可起到减轻OA的保护作用。

简介：摘要目的探讨慢性肾衰竭（chronic renal failure，CRF）幼鼠胫骨生长板软骨细胞Wnt/β-catenin信号通路对生长板发育的影响。方法雄性4周龄SD幼鼠40只，被随机分为对照组（蒸馏水灌胃，n=20）和CRF组（腺嘌呤150 mg·kg-1·d-1灌胃，n=20），连续灌胃6周后处死全部幼鼠，比较两组幼鼠胫骨长度。micro-CT扫描仪测量胫骨近端生长板宽度，组织切片番红固绿染色检测胫骨生长板宽度。提取幼鼠胫骨生长板软骨细胞进行体外培养至第3代，免疫组织化学染色法检测软骨细胞Ⅱ型胶原（Collagen Ⅱ）、基质金属蛋白酶13（matrix metalloproteinase-13，MMP-13）及β联蛋白（β-catenin）的表达。Western印迹法检测软骨细胞CollagenⅡ、MMP-13、β-catenin蛋白表达水平。结果与对照组相比，CRF组幼鼠胫骨长度较短[（27.32±5.81）mm比（35.43±3.61）mm，t=5.226，P<0.001]，生长板宽度较窄[（0.72±0.22）mm比（1.13±0.27）mm，t=5.096，P<0.001]。软骨组织番红固绿染色结果显示，CRF组幼鼠生长板相对宽度较对照组窄（t=6.744，P<0.001）。免疫组化及Western印迹结果示，与对照组比较，CRF组软骨细胞CollagenⅡ蛋白表达减少（t=8.212，P<0.001），MMP-13（t=13.091，P<0.001）和β-catenin（t=7.534，P<0.001）蛋白表达增多。结论CRF幼鼠胫骨生长板软骨细胞Wnt/β-catenin通路相关蛋白呈高表达状态，是软骨细胞加速退变分化、生长板出现闭合趋势的原因之一。

简介：摘要目的探讨丝氨酸蛋白酶抑制剂E2(SERPINE2)在食管鳞癌细胞迁移和侵袭中的作用及相关分子机制。方法运用TCGA(http：//gepia.cancer-pku.cn/detail.php和http：//ualcan.path.uab.edu/index.html)数据库对SERPINE2在食管癌中的表达进行分析。采用定量逆转录聚合酶链反应(qRT-PCR)法检测正常食管上皮细胞NE2、食管鳞癌细胞KYSE30和KYSE150中SERPINE2 mRNA的表达。在KYSE30细胞中转染SERPINE2敲降或过表达质粒，以qRT-PCR法检测表达效果。采用体外迁移侵袭实验分析SERPINE2与食管鳞癌细胞迁移和侵袭的关系。采用免疫荧光、qRT-PCR和Western blot等实验检测SERPINE2与β-catenin和靶基因c-Myc、cyclin D1和CD44表达的相关性。结果数据库中182例和95例食管癌和食管鳞癌组织样本中，SERPINE2 mRNA在食管癌和食管鳞癌组织中表达均增高(P<0.05)；SERPINE2在食管鳞癌KYSE30和KYSE150细胞中均呈高水平表达(P<0.01)。对照组细胞的迁移和侵袭数分别为(212.66±24.11)个/视野和(136.00±14.42)个/视野，SERPINE2敲降组1细胞的迁移和侵袭数分别为(88.33±9.71)个/视野和(77.00±9.53)个/视野，SERPINE2敲降组2细胞的迁移和侵袭数分别为(66.00±8.00)个/视野和(45.66±3.78)个/视野，与对照组相比，差异均有统计学意义(均P<0.01)。对照组细胞的迁移和侵袭数分别为(250.00±30.00)个/视野和(203.33±15.27)个/视野，SERPINE2过表达组细胞的迁移和侵袭数分别为(383.33±35.11)个/视野和(246.66±25.16)个/视野，与对照组比较，差异均有统计学意义(均P<0.01)。SERPINE2过表达组细胞中β-catenin表达上调，p-β-catenin表达下调，β-catenin转录活性增强，c-Myc、cyclin D1和CD44 mRNA表达上调。在对照组和SERPINE2过表达组细胞培养基中分别加入iCRT14后，对照组和SERPINE2过表达组细胞的迁移数分别为(200.00±36.05)个/视野和(258.33±22.54)个/视野，侵袭数分别为(160.00±17.32)个/视野和(188.33±25.65)个/视野，与未加入iCRT14组比较，差异均有统计学意义(均P<0.01)。结论SERPINE2在食管鳞癌细胞中表达增高，通过激活β-catenin在促进食管鳞癌细胞迁移和侵袭中发挥重要的作用。

简介：摘要目的探讨丝氨酸蛋白酶抑制剂E2(SERPINE2)在食管鳞癌细胞迁移和侵袭中的作用及相关分子机制。方法运用TCGA(http：//gepia.cancer-pku.cn/detail.php和http：//ualcan.path.uab.edu/index.html)数据库对SERPINE2在食管癌中的表达进行分析。采用定量逆转录聚合酶链反应(qRT-PCR)法检测正常食管上皮细胞NE2、食管鳞癌细胞KYSE30和KYSE150中SERPINE2 mRNA的表达。在KYSE30细胞中转染SERPINE2敲降或过表达质粒，以qRT-PCR法检测表达效果。采用体外迁移侵袭实验分析SERPINE2与食管鳞癌细胞迁移和侵袭的关系。采用免疫荧光、qRT-PCR和Western blot等实验检测SERPINE2与β-catenin和靶基因c-Myc、cyclin D1和CD44表达的相关性。结果数据库中182例和95例食管癌和食管鳞癌组织样本中，SERPINE2 mRNA在食管癌和食管鳞癌组织中表达均增高(P<0.05)；SERPINE2在食管鳞癌KYSE30和KYSE150细胞中均呈高水平表达(P<0.01)。对照组细胞的迁移和侵袭数分别为(212.66±24.11)个/视野和(136.00±14.42)个/视野，SERPINE2敲降组1细胞的迁移和侵袭数分别为(88.33±9.71)个/视野和(77.00±9.53)个/视野，SERPINE2敲降组2细胞的迁移和侵袭数分别为(66.00±8.00)个/视野和(45.66±3.78)个/视野，与对照组相比，差异均有统计学意义(均P<0.01)。对照组细胞的迁移和侵袭数分别为(250.00±30.00)个/视野和(203.33±15.27)个/视野，SERPINE2过表达组细胞的迁移和侵袭数分别为(383.33±35.11)个/视野和(246.66±25.16)个/视野，与对照组比较，差异均有统计学意义(均P<0.01)。SERPINE2过表达组细胞中β-catenin表达上调，p-β-catenin表达下调，β-catenin转录活性增强，c-Myc、cyclin D1和CD44 mRNA表达上调。在对照组和SERPINE2过表达组细胞培养基中分别加入iCRT14后，对照组和SERPINE2过表达组细胞的迁移数分别为(200.00±36.05)个/视野和(258.33±22.54)个/视野，侵袭数分别为(160.00±17.32)个/视野和(188.33±25.65)个/视野，与未加入iCRT14组比较，差异均有统计学意义(均P<0.01)。结论SERPINE2在食管鳞癌细胞中表达增高，通过激活β-catenin在促进食管鳞癌细胞迁移和侵袭中发挥重要的作用。