简介：目的探讨大鼠胚胎神经干细胞（NSC）的体外培养和诱导分化的条件和特点。方法从孕14～16d的大鼠胚胎脑皮质中分离NSC，在表皮生长因子、碱性成纤维生长因子和B27联合作用下使其稳定增殖，并用10％的胎牛血清诱导其贴壁分化，应用免疫荧光染色方法行巢蛋白（Nestin）、神经元特异性烯醇化酶（NSE）、胶质纤维酸性蛋白（GFAP）、Gale-C免疫荧光染色，对NSC及其分化的细胞进行鉴定。结果体外培养的NSC增殖成神经干细胞球并传代，鉴定为Nestin染色阳性细胞，并可诱导分化为神经元细胞（NSE染色阳性细胞）、星形胶质细胞（GFAP染色阳性细胞）和少突胶质细胞（Gale-C染色阳性细胞）。结论采用无血清培养基中加入特定生长因子的培养技术，可培养出在体外稳定增殖并有多向分化潜能的大鼠胚胎NSC。

简介：目的体外培养并鉴定神经干细胞,为相关实验研究奠定基础.方法分离SD大鼠胎鼠的间脑,加入神经生长因子EGF和bFGF在神经干细胞条件培养基中克隆培养.用免疫细胞化学方法鉴定分离的神经干细胞.结果分离培养的细胞具有不断增殖的能力,表达神经巢蛋白(nestin),并能经过诱导分化为神经元和神经胶质细胞.结论成功建立了神经干细胞的分离培养方法,可用于进一步的实验研究.

简介：目的探讨糖皮质激素和生长激素释放激素(GHRH)对大鼠胚胎垂体生长激素(GH)细胞分化的作用.方法利用免疫组化、放射免疫分析、RT-PCR和免疫电镜等方法,研究糖皮质激素体外诱导GH细胞分化的最佳浓度、所需要的最短时间及GHRH在大鼠胚胎垂体细胞分化中的作用.结果在体外培养的大鼠胚胎垂体细胞中,地塞米松能提高GHmRNA的表达水平,增加GH细胞内分泌颗粒的积聚.当GHRH浓度达到1×10-7mol/L时,可以增强地塞米松对GH细胞的诱导分化作用.结论地塞米松能够促进GH细胞的体外分化,并具有一定的剂量依赖性.GHRH与地塞米松具有协同效应,共同促进GH细胞的分化与分泌.

简介：目的：为揭示对－壬基酚（p-NP)是否具有发育毒性及毒作用提供实验依据。方法：采用微团培养观察了不同浓度的对－壬基酚（p-NP)对体外培养的Wistar大鼠胚胎中脑细胞增殖和分化的影响。结果：p-NP对体外培养的Wistar大鼠胚胎中脑细胞的增殖和分化均有抑制作用。表现为染毒组神经细胞集落形成数量减少，细胞毒性试验吸光度值下降，并呈现出明显的剂量－反应关系，p-NP对中脑细胞的50％增殖抑制浓度（IP50）和50％分化抑制浓度（ID50）为27．35ug/ml和8．93ug/ml，结果：按照Renault等人推荐的体外致畸分类标准，p-NP属于阳性致畸物。

简介：经口染毒大鼠检测妊娠动物接触吡草醚原药后引起致畸的可能性,初步评价吡草醚原药致畸危害程度。依据《GB15670-1995农药登记毒理学试验方法》,选用的大鼠按雄、雌2：1比例同笼交配,次日清晨阴道涂片检查雌鼠,发现精子即确定为受孕第0天,设低、中、高三个剂量组（18.56、92.80、464.00mg·（kg·d）-1）、一个阴性对照组和一个阳性对照组。在雌鼠受孕第6～15天灌胃给予受试物,连续共10天,在妊娠第19.5天,处死孕鼠检查胚胎发育情况。高剂量组和阳性对照组大鼠孕期体重增重值降低,差异有显著性（p〈0.05）,中、高剂量组和阳性对照组大鼠吸收胎率与阴性对照组比较差异有显著性（p〈0.05）,中、高剂量组和阳性对照组胎鼠重量与阴性对照组比较,差异有显著性（p〈0.01）,阳性对照组胎鼠外观畸形明显,与阴性对照组比较差异有显著性（p〈0.01）,各剂量组胎鼠外观畸形与阴性对照组比较,差异均无显著性（p〉0.05）,中、高剂量组组和阳性对照组胎鼠骨骼及内脏畸形例数明显增多,差异有显著性（p〈0.01）。实验结果表明吡草醚原药中、高剂量组可明显影响雌鼠体重增长及其胚胎的发育。

简介：目的建立增强型绿色荧光蛋白（EGFP）基因修饰大鼠胚胎中脑神经干细胞。方法以质粒pEGFPNl转染培养第三代的大鼠胚胎中脑神经干细胞（mNSCs），经G418筛选后，分别进行nestin免疫细胞化学鉴定和诱导分化后ρ-Ⅲ-／ubulin、GFAP、CNPase免疫细胞化学鉴定。结果EGFP在基因转染12h后开始表达，24h后明显增加，48h达到高峰，经G418筛选1月后有阳性克隆形成，EGFP基因修饰不影响大鼠胚胎mNSCs的增殖与分化。结论成功建立EGFP基因修饰大鼠胚胎mNSCs，为进一步开展帕金森病的细胞移植治疗研究奠定基础。

简介：目的探讨人胚胎脑细胞在脑梗死灶内的分化、整合状况和神经细胞移植治疗脑梗死的可能性.方法将正常人胚胎脑细胞和胶质细胞混合培养后,移植到免疫抑制的11只肾性高血压大鼠的大脑皮质梗死灶内,并与未移植的5只脑梗死大鼠作对照.8周后取大鼠脑组织做免疫组化检查.结果移植了人胚胎脑细胞存活的10只大鼠中,6只有移植物生长.移植物内有新生血管,细胞有分层排列趋势.免疫组化染色证实,移植物内有细胞分化,并存在大量神经元和星形胶质细胞.神经元的树突和轴突汇集成束,整合到宿主脑内.结论培养的人胚胎脑细胞能在免疫抑制大鼠的脑梗死灶内生长、分化和整合,提示神经细胞移植有望成为临床治疗脑梗死的突破性方法.

简介：目的探讨胚胎期铅暴露对子代大鼠摄食、排便行为的影响及可能机制。方法采用SpragueDawley大鼠孕期自由饮用0.1%（低剂量铅暴露组）和0.2%醋酸铅（高剂量铅暴露组）溶液的方法建立胚胎期铅暴露模型,并设空白对照组。将各组母鼠娩出的雄性仔鼠纳入研究,各组分别取10只仔鼠观察其在摄食、排便、胃排空、小肠推进及胃黏膜病理性炎性反应等方面的变化特点;各组分别取8只仔鼠,应用电镜技术、免疫组化等方法从空肠微绒毛及细胞连接超微结构变化,以及摄食中枢胆囊收缩素-8（CCK-8）、胃动素（MTL）的表达等方面揭示胚胎期铅暴露仔鼠胃肠动力异常的可能机制。结果与对照组比较,高、低剂量铅暴露组仔鼠每日摄食量下降,粪便含水量增加,粪粒质量减少,小肠推进速度增加（P〈0.05）;高剂量铅暴露组仔鼠胃排空能力较对照组下降（P〈0.05）。与对照组比较,胚胎期铅暴露仔鼠胃黏膜出现明显的病理炎性改变（P〈0.05）;空肠微绒毛减少、长度短缩及上皮间桥粒数目减少、致密斑间隙扩大（P〈0.05）;摄食中枢MTL、CCK-8表达增加（P〈0.05）;上述改变的程度与铅暴露剂量间有剂量-效应关系。结论胃肠结构损害程度,以及CCK和MTL在中枢的表达水平具有铅剂量依赖性,这可能是胚胎期铅暴露仔鼠出现异常的摄食、排便及消化功能改变的重要机制。

简介：目的建立神经生长因子β（NGFβ）基因修饰大鼠胚胎中脑神经干细胞。方法以质粒pcDNA3-hNGFb、pEGFPN1共转染大鼠胚胎中脑神经干细胞，荧光显微镜观察绿色荧光蛋白（GFP）在细胞内的表达，免疫细胞化学、Westernblot鉴定NGF-β在细胞内的表达。体外诱导分化，免疫细胞化学鉴定其分化能力。结果GFP在基因转染12h后开始表达，免疫细胞化学、Westernblot结果表明NGF-β能在细胞中正确表达且NGF-β、GFP基因修饰不影响其增殖与分化。结论成功建立NGF-β、GFP基因修饰大鼠胚胎中脑神经干细胞。

简介：目的探讨大鼠胚胎背部皮肤β-NGF和p75NTR的表达规律。方法使用冰冻超薄切片结合免疫组织化学染色方法和显色半定量统计方法。结果大鼠胚胎背部皮肤呈现逐渐增厚的趋势，其中毛囊隆突区并不明显，但可明显观察到基底层细胞的表达变化。结论形态学观察说明毛囊发生初期毛囊于细胞（hairfolliclestemcell，HFSC）不仅仅定位于毛囊上段β-NGF和p75NTR的表达有差异。背部皮肤基底层细胞具有于细胞特性，未分化为表皮细胞或者毛囊中的各种细胞。β-NGF和p75NTR的表达变化可能与毛囊于细胞以及毛囊的生物学特性有关。

简介：1概述“胚胎工程”是在基因工程和细胞工程的基础上发展起来的一门新兴技术，是生物科技热点问题之一。分析近两年新课程高考试题不难发现，往往将本专题知识与减数分裂、遗传变异及细胞工程和基因工程等知识相联系进行考查。考查模式主要有3种：一是以新材料为命题背景，综合考查对基础知识的迁移能力；

简介：哀伤的锦旗锦旗是红绒布面的，压印着金字。9月26日早上8点多，沈新南夫妇和刘金法夫妇带着卷起的锦旗，从宜兴赶到无锡市中级人民法院。保安安排他们在门口等候．法院瞧才上班。不过很快，政治部的一个年轻女孩就领着他们走进这座铅灰色建筑的一间会议室，办案法官还没到，宣传处的小伙子要跑去拿相机，他们都在等待这个小小仪式的开始。

简介：

简介：目的探讨GB对体外培养的胚鼠脊髓神经元存活和生长发育的作用。方法胚胎大鼠脊髓神经细胞原代培养，相差显微镜下进行细胞计数和显微测量，观察GB对神经元存活和生长发育的作用。对培养7d细胞行NSE免疫组化染色，光镜下观察GB对NSE染色阳性神经元生长发育的影响。结果GB及NGF能够促进体外培养胚胎大鼠脊髓神经细胞及NSE染色阳性神经元的存活，促进其细胞及突起的生长。其促进脊髓神经细胞的存活、胞体及突起发育的作用与NGF一致，而其促进神经突起分化与生长的作用强于NGF。结论NGF和GB能促进培养大鼠发育期脊髓神经元存活、分化和生长，并且表现出各自作用的特异性。

简介：摘要目的初步探讨冷冻胚胎复苏周期中已冻存的低质量囊胚与高质量卵裂期胚胎的优先移植顺序。方法回顾性分析了郑州大学第三附属医院生殖医学中心2015年11月至2018年5月期间3677个冻融胚胎移植(FET)周期的临床资料。根据移植胚胎发育时期、质量及移植胚胎数的不同分为5组：单非优质囊胚组(A组)、单优质囊胚组(B组)、第3日(D3)双优质胚胎组(C组)、D3优+非优质胚胎组(D组)、D3双非优质胚胎组(E组)。每组再根据患者的年龄分为3个亚组：<35岁、35~37岁和>37岁。主要观察指标为活产率，次要观察指标为临床妊娠率、植入率和多胎率。结果D3双胚胎移植组(C~E组)植入率均显著低于单囊胚组(A、B组)(P均<0.05)，而多胎妊娠率均显著高于单囊胚组(P均<0.01)。C组与A组相比，临床妊娠率差异无统计学意义(P>0.05)；患者年龄<35岁时，活产率显著升高(P=0.003)，35~37岁组及>37岁组活产率的差异无统计学意义。D组与A组相比，患者年龄<35岁组及35~37岁组，临床妊娠率及活产率差异均无统计学意义(P>0.05); 患者年龄>37岁时，临床妊娠率显著降低(P=0.018)，活产率降低，但差异无统计学意义(P>0.05)。E组与A组相比，所有年龄段的临床妊娠率、活产率均降低；当患者年龄<35岁及>37岁时差异均有统计学意义(P<0.05)，患者年龄为35~37岁时，差异无统计学意义(P>0.05)。年龄和移植胚胎的种类均是活产的独立影响因素。调整年龄对活产的影响后，与A组相比，B组(OR=1.311，95% CI=1.083~1.586，P=0.005)、C组(OR=1.322，95% CI=1.092~1.601，P=0.004)、E组(OR=0.616，95% CI=0.468~0.809，P=0.001)对活产率的影响差异均有统计学意义，而D组(OR=1.139，95% CI=0.914~1.420，P=0.247)对活产的影响程度与A组相比，差异无统计学意义。结论综合考虑多胎妊娠及活产等因素，冷冻胚胎复苏周期最优的移植顺序可能是单优质囊胚>单非优质囊胚>D3双优质胚胎>D3优+非优质胚胎>D3双非优质胚胎。

简介：1教材分析“胚胎分割及胚胎干细胞”是普通高中课程标准实验教科书人教版生物选修三“现代生物科技专题”中的内容。该内容属于专题三胚胎工程中第三节“胚胎工程的应用及前景”的第二课时。选修模块是为了满足学生多样化的需要而设计的，它有助于拓展学生的生物科技视野，增进学生对生物科技与社会关系的理解，提高学生的实践和探究能力。但鉴于教学内容的现代性与我校实验设备条件之间的矛盾，因此发展探究能力将比较多地集中在学习资料的收集分析、撰写专题综述、口头交流、讨论或辩论等方面，并辅以适量可行的调查或实验活动。

简介：摘要目的验证lncRNA AC119762.8-201在乙烯硫脲(ethylene thiourea，ETU)诱导的大鼠胚胎肛门直肠畸形(anorectal malformation，ARM)中的差异表达；研究干扰及过表达lncRNA AC119762.8-201后对大鼠小肠隐窝上皮细胞株(intestinal epithelial cell line，IEC-6)的细胞增殖、迁移(上皮-间质转换)及Wnt5a蛋白表达水平的影响。方法选用体重250～300 g的健康成年未育的Wistar大鼠30只，其中雌鼠24只，雄鼠6只；雌雄大鼠按4∶1的比例于晚上合笼过夜，次日晨雌鼠做阴道涂片，在光镜下见到精子或阴道栓即确认已交配，当日为孕0 d(E0)，选取明确受孕的18只雌鼠按随机数字表法随机分为大鼠ETU-ARM致畸组(9只)和大鼠生理盐水对照组(9只)。孕10 d(E10)时，将大鼠ETU-ARM致畸组一次性灌胃注入1% ETU(125 mg/kg)，大鼠生理盐水对照组灌入等量生理盐水。在孕16 d(E16)、17 d(E17)和19 d(E19)，对两组孕鼠剖宫并取出胎鼠。无菌操作下，从大鼠ETU-ARM致畸组中共取得162只胎鼠，根据肉眼及解剖显微镜下观察，若胎鼠出现无尾或短尾畸形，且肛门与外界不相通，直肠末端与尿道之间有瘘管连通，则纳入胎鼠ARM组(简称ARM组)，ARM组共122只致畸胎鼠，致畸率为75.31%(122/162)；从大鼠生理盐水对照组取得141只胎鼠，胎鼠尾部均正常，无肛门直肠畸形，肛门与外界相通且直肠末端与尿道之间无瘘管连通，为胎鼠正常组(简称正常组)。解剖显微镜下，在无菌条件下取出ARM组和正常组胎鼠的直肠末端组织置于-80℃冰箱保存备用。采用实时定量聚合酶链反应(quantificational real-time polymerase chain reaction，qRT-PCR)检测lncRNA AC119762.8-201的表达；提取IEC-6细胞质和细胞核RNA，通过qRT-PCR检测lncRNA AC119762.8-201在细胞中的定位；采用siRNA序列或过表达质粒转染的方法下调或上调IEC-6细胞中lncRNA AC119762.8-201的表达，通过细胞计数试剂盒8(cell counting kit-8，CCK-8)法检测细胞增殖，蛋白质印迹法检测细胞上皮-间质转换及Wnt5a蛋白表达水平的影响。结果通过qRT-PCR验证lncRNA AC119762.8-201在ARM组及正常组胎鼠肛门直肠组织中的表达水平；结果显示在E16、E17及E19时，与正常组相比，lncRNA AC119762.8-201的表达水平分别为(0.47±0.02比1.01±0.08，0.80±0.16比1.00±0.02，0.41±0.06比1.02±0.09)，lncRNA AC119762.8-201在ARM组中的表达水平下降，并且在E16和E19，ARM组及正常组之间的差异具有统计学意义(P<0.01)。通过qRT-PCR验证lncRNA AC119762.8-201在IEC-6细胞质及细胞核中的表达水平。结果提示lncRNA AC119762.8-201在IEC-6细胞中有表达，且在细胞质(1.01±0.08)及细胞核(1.01±0.05)中均存在表达，差异无统计学意义(P>0.05)。在转染干扰si-RNA(si-NC和si-lnc)和过表达质粒(over-NC质粒和over-lnc质粒)对lncRNA AC119762.8-201表达水平的影响方面，转染si-RNA的结果显示，与转染si-NC的细胞(1.01±0.18)相比，转染si-lnc后，lncRNA AC119762.8-201的表达水平明显下调为(0.43±0.13)，差异具有统计学意义(P<0.05)；转染过表达质粒的结果显示，与转染over-NC质粒的细胞(0.98±0.02)相比，转染over-lnc质粒后，lncRNA AC119762.8-201的表达水平明显上调为(2 960.31±167.95)，差异具有统计学意义(P<0.01)。在lncRNA AC119762.8-201对细胞增殖的影响方面，结果提示当干扰lncRNA AC119762.8-201的表达时，细胞增殖能力呈下降趋势，6 h时的si-NC比si-lnc为(3.17±0.01比3.15±0.02)，差异无统计学意义(P>0.05)；12 h为(3.40±0.01比3.26±0.01)，差异具有统计学意义(P<0.01)；18 h为(3.55±0.01比3.35±0.05)，差异具有统计学意义(P<0.01)；24 h为(4.02±0.01比4.04±0.02)，差异无统计学意义(P>0.05)；相反，当过表达lncRNA AC119762.8-201时，细胞增殖能力呈升高趋势，6 h时的over-NC比over-lnc为(3.21±0.04比3.30±0.02)，差异无统计学意义(P>0.05)；12 h为(3.39±0.01比3.57±0.04)，差异具有统计学意义(P<0.01)；18 h为(3.59±0.01比3.69±0.03)，差异具有统计学意义(P<0.01)；24 h为(3.76±0.01比3.79±0.03)，差异无统计学意义(P>0.05)。lncRNA AC119762.8-201在干扰或过表达状态下对E-cadherin、β-catenin、N-cadherin及Vimentin表达水平的影响，蛋白质印迹法检测结果提示，当干扰lncRNA AC119762.8-201的表达时，转染si-NC后E-cadherin和β-catenin的表达水平明显低于转染si-lnc后的表达水平，转染si-NC与转染si-lnc后E-cadherin的表达水平相比为(0.32±0.01比0.57±0.04)，差异具有统计学意义(P<0.05)；转染si-NC与转染si-lnc后β-catenin的表达水平相比为(0.89±0.03比1.48±0.05)，差异具有统计学意义(P<0.01)；转染si-NC后N-cadherin和Vimentin的表达水平明显高于转染si-lnc后的表达水平，转染si-NC与转染si-lnc后N-cadherin的表达水平相比为(1.47±0.01比0.90±0.0 003)，差异具有统计学意义(P<0.01)；转染si-NC与转染si-lnc后Vimentin的表达水平相比为(2.02±0.03比1.02±0.02)，差异具有统计学意义(P<0.01)。相反，当过表达lncRNA AC119762.8-201时，转染over-NC后E-cadherin和β-catenin的表达水平明显高于转染over-lnc后的表达水平，差异均具有统计学意义(P<0.05)；转染over-NC后N-cadherin和Vimentin的表达水平明显低于转染over-lnc后的表达水平，差异均具有统计学意义(P<0.01)。lncRNA AC119762.8-201在干扰或过表达状态下对Wnt5a表达水平的影响，蛋白质印迹法检测结果提示，当干扰lncRNA AC119762.8-201的表达时，转染si-NC后Wnt5a的表达水平明显高于转染si-lnc后的表达水平，差异具有统计学意义(P<0.01)；相反，当过表达lncRNA AC119762.8-201时，转染over-NC后Wnt5a的表达水平明显低于转染over-lnc后的表达水平，差异具有统计学意义(P<0.01)。结论本研究通过动物模型验证了lncRNA AC119762.8-201在ARM组大鼠肛门直肠组织中的表达水平较正常组降低，其表达水平的降低可能会抑制细胞增殖、细胞上皮-间质转换及Wnt5a的表达，从而影响ARM的发生和发展。

简介：

简介：目的探讨体外受精-胚胎移植（IVF-ET）新鲜胚胎移植（fET）及冻融胚胎移植（FET）对妊娠结局的影响。方法对2010年1月至2014年3月北京大学人民医院接受IVF-ET治疗的1516例单胎妊娠分娩患者进行回顾性研究,比较fET及FET的临床妊娠率、妊娠期并发症、围生儿结局等。结果1516例IVF-ET单胎分娩患者中,85例合并内科相关疾病,929例（61.3%）接受fET治疗（fET组）,587例（38.7%）接受FET治疗（FET组）。fET组前置胎盘发生率（1.8%,17/929）与FET组（4.3%,25/587）比较,差异有统计学意义（P〈0.05）;fET组产后出血发生率（5.0%,46/929）与FET组（9.2%,54/587）比较,差异有统计学意义（P〈0.05）。fET组胎盘粘连发生率（1.1%,10/929）与FET组（2.9%,17/587）比较,差异有统计学意义（P〈0.05）。logistic回归分析显示,FET是产后出血、胎盘粘连发生的独立危险因素（OR=1.603、OR=2.828,P均〈0.05）,两组其他并发症比较,差异无统计学意义（P〉0.05）。结论FET较fET可能增加患者妊娠期并发症的发病风险。

简介：摘要目的比较不同胚胎培养试剂对胚胎发育时间动力学参数、胚胎发育潜能及临床妊娠结局影响。方法回顾性分析2016年9月至2018年5月期间于郑州大学第一附属医院生殖医学中心行体外受精/卵胞质内单精子注射(IVF/ICSI)助孕患者资料，按照胚胎培养试剂不同，分为Vitrolife组和Cook组，比较符合入选标准的470个新鲜移植周期患者的胚胎时间动力学参数、胚胎发育潜能及临床妊娠结局。结果与Cook组比较，Vitrolife组原核出现时间、消失时间、发育到3-细胞和8-细胞时间更快[tPNa：（7.12±2.71） h比（7.40±2.61） h，tPNf：（23.83±4.33） h比（24.21±4.74） h，t3：（35.75±6.03） h比（36.64±6.16）h，t4：（38.30±6.25）h比（38.92±6.06）h， t5：（47.59±7.85）h比（49.01±7.86）h， t6：（50.77±7.17） h比（52.12±6.99） h，t7：（53.05±6.31） h比（54.33±6.37） h，t8：（55.35±6.89） h比（56.31±6.41） h］，差异均有统计学意义(P均<0.05)；细胞周期s2差异无统计学意义，在细胞周期同步性比较中，cc2 ［(9.71±4.60） h比（10.33±4.28) h］差异有统计学意义，Cook组具有更长的细胞周期，细胞发育时间间隔t5-t4 [(10.60±5.65) h比(11.20±5.90) h]、t8-t4 [(18.45±5.76) h比(19.28±5.18) h]，差异均有统计学意义(P均<0.05)，然而t2、t4-t2差异无统计学意义。两种胚胎培养试剂胚胎发育潜能比较显示，Cook组胚胎利用率(59.9%)、第3日（D3）优质胚胎率(65.4%)高于Vitrolife组(63.9%，P=0.017；69.5%，P=0.011)；两组种植率、胚胎种植率、囊胚种植率、受精率、卵裂率差异均无统计学意义（P均>0.05）；临床妊娠率、持续妊娠率、流产率、分娩率、活产率、胎儿畸形率、活产男女比例、胚胎妊娠率、囊胚妊娠率组间比较差异均无统计学意义（P均>0.05）。结论各中心应根据本中心的实际情况，摸索出适合本中心的胚胎培养试剂的胚胎时间动力学参数，制定符合最佳胚胎培养试剂选择标准，提高本中心患者临床妊娠率及活产率。