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  • 简介:ThesplicingofmanyalternativeexonsintheprecursormessengerRNA(pre-mRNA)isregulatedbyextracellularfactorsbuttheunderlyingmolecularbasesremainunclear.HerewereportthedifferentialregulationofBcl-xpre-mRNAsplicingbyextracellularfactorsandtheirdistinctrequirementsforpre-mRNAelements.InK562leukemiacells,treatmentwithinterleukin-6(IL-6)orgranulocyte-macrophagecolonystimulatingfactor(GM-CSF)reducedtheproportionoftheBcl-xLvariantmRNAwhiletreatmentwith12-O-tetradecanoylphorbol13-acetate(TPA)hadnoeffect.InU251gliomacells,however,TPAefficientlyincreasedtheBcl-xLlevel.Theseregulationswerealsoseenforatransfectedsplicingreportermini-gene.Furtheranalysesofdeletionmutantsindicatethatnucleotides1-176ofthedownstreamintronarerequiredfortheIL-6effect,whereasadditionalnucleotides177-284areessentialfortheGM-CSFeffect.AsfortheTPAeffect,onlynucleotides1-76arerequiredinthedownstreamintron.Thus,IL-6,GM-CSFandTPAdifferentiallyregulateBcl-xsplicingandrequirespecificintronicpre-mRNAsequencesfortheirrespectiveeffects.

  • 标签: 信使RNA前体 交替剪接 BCL-X基因 白细胞间介素-6 12-氧-四价-13-醋酸酯 粒细胞-巨噬细胞菌落刺激因子
  • 简介:摘要目的克隆编码人粒-巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)的重组原核表达质粒,为进一步研究其功能提供依据。方法PCR扩增人GM-CSF基因编码序列,定向克隆入融合蛋白原核表达载体PET32a+获得重组表达质粒,转化大肠杆菌后用IPTG进行诱导表达,PCR和Western-blot鉴定表达产物。结果重组质粒经PCR、限制性内切酶及DNA测序证实构建成功;且诱导后能在大肠杆菌中稳定表达PET-GMCSF嵌合蛋白。结论成功构建并表达了PET-GMCSF蛋白,为进一步研究GM-CSF功能奠定基础。

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  • 简介:目的:观察清肠栓对急性溃疡性结肠炎(UC)大鼠结肠黏膜粒-巨噬细胞集落刺激因子(GM—CSV)和粒细胞集落刺激因子(G—CSF)的影响。方法:48只SD大鼠随机分为正常组、模型组、清肠栓组和柳氮磺胺吡啶(SASP)组,每组12只。用三硝基苯磺酸(TNBs)复制大鼠急性溃疡性结肠炎模型。造模后第3天开始给药,连续给药7d后处死大鼠。采用免疫组化、实时荧光定量PCR检测结肠组织中GMCSF、G—CSF蛋白及mRNA表达。结果:模型组GM-CSF和G-CSF蛋白表达较正常组升高(P〈0.05),清肠栓组及SASP组均较模型组降低(P〈0.05);模型组GMCSF和G—CSFmRNA表达较正常组明显增高(P〈0.05),清肠栓组及SASP组均较模型组减低(P〈0.05)。结论:清肠栓可通过调节结肠黏膜GMCSF、G-CSF蛋白及基因表达,以治疗急性溃疡性结肠炎。

  • 标签: 清肠栓 急性溃疡性结肠炎 粒-巨噬细胞集落刺激因子 粒细胞集落刺激因子
  • 简介:Objective:Tostudythevaccinepotencyofgene-modifiedtumorcells.Methods:TheEL-4lymphomawastransducedwithrecombinantretroviruscontainingthemurineGM-CSFgeneorB7-1gene.Theeffectofgenetransductiononantitumorimmunitywasinvestigated.Results:Flowcytometryanalysisshowedthatexpressionoftheirsurfacemarkerbetweenwild-typeEL-4cellsandgenetransducedtumorcellswasthesameexceptforCD80positiveinB7-1genetransducedcells.GM-CSFgeneorB7-1genetransducedEL-4cellsresultedinremarkablelossoftumorigenicityinsyngeneticmice.ThesystemicprotectiveimmunitywasinducedagainstthechallengewithEL-4/wtcells.TherapeuticvaccinewithEL-4/GM-CSForEL/7-1cellscouldretardthegrowthofestablishedearly-stageEL-4/wttumorsignificantly,butnotretardthegrowthoflate-stageEL-4/wttumor.IrradiatedGM-CSFgenetransducedEL-4cellsshowedstrongvaccineeffectagainstEL-4cellchallenge,butirradiatedB7-1genetransducedEL-4cellsshowedweakvaccineeffect.RemarkablecooperativeantitumoreffectagainstEL-4cellchallengewasobservedwhenbothirradiatedEL-4/GM-CSFandEL-4/B7-1wereinoculatedtogether.Conclusion:GM-CSFgeneorB7-1genetransducedcombinationofthetwokindsofvaccinemayhavepotentialapplicationvalueinhumancancertreatment.

  • 标签: GM-CSF B7-1 (CD80 ) 肿瘤疫苗 基因治疗
  • 简介:摘要目的检验GM-CSF是否能缩短因恶性血液病而进行骨髓移植的患者出现重症口腔粘膜炎病程。研究设计治疗组包括10个在骨髓移植中出现重症口腔粘膜炎的患者,对照组与治疗组年龄性别相似,由29例有相似临床表现者组成,治疗组从发生口腔粘膜炎第一天开始治疗一直到口腔粘膜炎明显改善,每天GM-CSF漱口液漱口,对照组按照重症口腔粘膜炎持续时间不同分别进行比较(1—9天,10-19天,≥20天)。结果GM-CSF能缩短重症口腔粘膜炎病程,但要进一步双盲对照临床试验证实。

  • 标签: GM-CSF 临床疗效 口腔粘膜炎
  • 简介:目的:探究和评价粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)及白细胞介素4(IL-4)作为β淀粉样蛋白(Aβ)表位DNA疫苗的分子佐剂,增强DNA疫苗体液和细胞免疫反应的水平。方法:阿尔茨海默病DNA表位疫苗pVAX1-6Aβ15-T分别与重组DNA分子佐剂pVAX1-S-IL-4和pVAX1-S-GM-CSF联合免疫BALB/c小鼠,并检测其免疫原性。结果:分子佐剂IL-4组相比单独的DNA表位疫苗pVAX1-6Aβ15-T组抗体水平具有一定程度的提高;GM-CSF能明显提高DNA疫苗Aβ特异的抗体水平和泛DR辅助T细胞表位(PADRE)特异的细胞免疫反应,4次免疫后其抗体滴度提高了4倍。结论:GM-CSF佐剂能够有效地用于今后阿尔茨海默病DNA表位疫苗的研究中。

  • 标签: DNA表位疫苗 分子佐剂 粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子 免疫原性
  • 简介:目的探索bcl-2-9GM-CSF的长链dsRNA(LongerdoublestrandRNA,LdsRNA)对肿瘤细胞生长的抑制作用。方法使用体外转录法制备地高辛标记的bcl一2和GMCSF基因的LdsRNA,转染THP1、HL-60和K562髓系白血病细胞系,分别以MTT法、免疫组化、免疫荧光技术和紫外分光光度计检测细胞LdsRNA转染水平,细胞增殖,特异性bcl-2蛋白表达和细胞总蛋白含量。结果LdsRNA能显著抑制THP1细胞增殖(P<0.05)和蛋白质合成,对HL-60和K562细胞系也有一定的抑制作用。结论LdsRNA能抑制肿瘤细胞的增殖,为以后利用LdsRNA用于肿瘤的治疗奠定一定的理论基础。

  • 标签: 肿瘤细胞生长 抑制作用 GM-CSF bcl-2蛋白表达 紫外分光光度计 K562细胞系
  • 简介:为了观察重组人干细胞因子(rhSCF)和(或)粒细胞集落刺激因子(rhG-CSF)动员外周血干细胞的效果,本研究将15只正常成年猕猴分成3组,每天1次,连续14天分别皮下注射赋形剂、rhG-CSF10μg/(kg*d)和rhSCF50μ/(kg*d)+rhG-CSF10μ/(kg*d).结果表明,单独给rhG-CSF组的外周血白细胞数最高值在给药后第7天出现,为给药前值的411%,其后很快下降.联合给药组外周血白细胞数最高值在第9天出现,为给药前值的538%,第7至第9天的外周血白细胞数在535%-538%之间.单独给药组外周血CFU-GM最高值在给药后第5天为给药前值的937%,联合给药组在第9天为1175%.结论:rhG-CSF对外周血干/祖细胞有明显的动员作用,rhSCF+rhG-CSF联合动员的效果优于rhG-CSF单用.

  • 标签: 重组人粒细胞集落刺激因子 重组人干细胞因子 粒-巨噬细胞集落 白细胞
  • 简介:Ithasbeendemonstratedthattbecriticalroleofbonemarrowstromalcells(HMSCs)istosustaintheselfrenewalofpluripotenthematopoieticstemcellsandmaintainthehomeostasisofbonemarrowhematopoiesismicroenvironment.BMSCprogenitorcandifferentiateintoseveralclementsincludingmacrophages,endothelialcells,fibroblastsandsomeothercells.Almostall

  • 标签: Antigen PROGENITOR homeostasis macrophages HEMATOPOIETIC sustain
  • 简介:本实验旨在研究GM-CSF对脐血CD34+细胞诱导分化为巨核细胞的影响.采用免疫磁珠法分选CD34+细胞,在含有TPO+IL-3+SCF并添加了不同浓度(5、20、100ng/ml)的GM-CSF的无血清培养基中进行培养.培养6、10、14天后计数单个核细胞(MNC),检测CD41+细胞比例和CFU-MK.结果表明,培养14天后3种不同浓度GM-CSF对MNC均有明显的扩增作用,其中以20和100ng/mlGM-CSF的扩增效果较好.3种不同浓度的GM-CSF均使CD41+细胞比例增加,20和100ng/ml与5ng/mlGM-CSF相比更能提高CD41+细胞的比例.5和20ng/ml的GM-CSF能促进CFU-MK的形成,但100ng/ml的GM-CSF却抑制CFU-MK的形成.结论:在TPO+IL-3+SCF细胞因子组合中添加GM-CSF有利于促进脐血CD34+细胞诱导分化为巨核细胞.

  • 标签: GM-CSF 脐血 CD34^+细胞 巨核细胞 体外扩增
  • 简介:Granulocyte巨噬细胞刺激殖民地的因素(GM-CSF)是一个重要造血的生长因素和有免疫力的调节的人。GM-CSF也在各种各样的传播白血球的功能的活动有深刻效果。它被许多房间类型在收到有免疫力的刺激之上包括T房间,巨噬细胞,endothelial房间和成纤维细胞生产。尽管GM-CSF局部地被生产,它能以一种paracrine方式行动到在主人防卫提高他们的功能的成员传播neutrophils,单核白血球和淋巴细胞。最近的集中的调查为它增加树枝状的房间(DC)成熟和功能以及巨噬细胞活动的能力作为一个有免疫力的助手在GM-CSF的应用程序上被集中。在经历化疗的癌症病人对待嗜中性白血球减少症临床上被使用,在在治疗期间的爱滋病病人,并且在在骨髓移植以后的病人。有趣地,GM-CSF-deficient老鼠的造血的系统看起来正常;最重要的变化在一些特定的T房间回答。尽管GM-CSF的分子的克隆用T房间的cDNA图书馆被执行,T房间在激活以后生产GM-CSF,是众所周知的,在T房间功能上有在由T房间和它的效果的生产的这cytokine的系统的调查的缺乏。在这篇文章,我们将在T房间主要集中于GM-CSF的免疫生物学。

  • 标签: 巨噬细胞 粒细胞 菌落刺激因子 T细胞
  • 简介:Granulocyte巨噬细胞刺激殖民地的因素(GM-CSF)secreting细胞的肿瘤疫苗在鼠科的模型和病人受不了癌症贡献有势力antitumor免疫者回答的正式就职。Hepatocellular癌(HCC)是在中国的最经常、恶意的癌症之一。第一次,我们描述释放向与这类癌症作斗争代表步的疫苗的策略的GM-CSF。在这研究,一个旁观者对鼠科的HCC的基于房间的GM-CSFsecreting疫苗,Hepa1-6/B78H1-GM-CSF,与cyclophosphamide(CY)的低剂量被共同管理。在与肿瘤和种痘质问以后,免疫学的试金证明细胞的antitumor免疫者回答高效地被激活并且肿瘤开发显著地被延迟,它依赖于有CY的协同作用。在鼠科的模型的anti-HCC疫苗的有希望的结果表明未来的可行性为在HCC病人的这治疗的临床的申请。

  • 标签: GM-CSF 肿瘤疫苗 小鼠模型 分泌细胞 免疫反应 环磷酰胺
  • 简介:摘要目的研究血清粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)水平与急性呼吸窘迫综合征(ARDS)患儿病情严重程度及预后的相关性。方法采用便利抽样法选择郑州大学附属儿童医院2018年6月至2020年6月收治的ARDS患儿82例为研究组,根据氧合指数[动脉血氧分压(PaO2)/吸入氧浓度(FiO2)]将患儿分为轻度、中度和重度三组,另选择同期来院体检的40例健康儿童作为对照组。检测所有研究对象的GM-CSF水平,并回顾性分析其临床资料以及28 d生存情况,分析GM-CSF水平对ARDS患儿早期病情以及预后的评估价值。结果入院时,研究组GM-CSF水平为(284.40±72.53)pg/ml,高于对照组的(92.05±18.39)pg/ml,差异有统计学意义(t=16.484,P<0.05)。GM-CSF和PaO2/FiO2水平在重度、中度、轻度组ARDS患儿中依次降低,差异有统计学意义(P<0.05)。存活组患儿急性生理与慢性健康评分(APACHE Ⅱ)、PaO2/FiO2和GM-CSF水平均低于死亡组,差异有统计学意义(P<0.05)。高GM-CSF组总生存时间低于低GM-CSF组,差异有统计学意义(P<0.05);单因素及多因素Cox回归分析均证实高GM-CSF、高PaO2/FiO2、高APACHEⅡ评分为ARDS患儿预后不良的独立危险因素(P<0.05)。结论ARDS患儿GM-CSF水平呈高表达,且其表达水平与疾病严重程度密切相关,同时高GM-CSF是导致患儿不良预后的重要危险因素。

  • 标签: 粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子 急性呼吸窘迫综合征 病情评估 预后
  • 简介:摘要目的观察支气管哮喘患儿血清IL-6、IL-8和GM-CSF水平的变化。方法采用化学法和放射免疫法分析,先对31例支气管哮喘患儿进行了吸入糖皮质激素前后血清NO、IL-8和GM-CSF水平检测,并与35名正常健康儿作比较。结果支气管哮喘患儿在吸入糖皮质激素前血清NO、IL-8和GM-CSF水平均非常显著的高于正常儿组(P<0.01),经吸入糖皮质激素2个月后与正常人比较仍有显著差异(P<0.05)且血清NO水平与IL-8、GM-CSF水平呈显著正相关(r=0.5134,0.6012,P<0.01)。结论吸入糖皮质激素是治疗支气管哮喘的重要手段,其治疗作用与下调NO、IL-8和GM-CSF水平有关。

  • 标签: 支气管哮喘 一氧化氮 白细胞介素-8 糖皮质激素 粒-巨噬细胞集落刺激因子
  • 简介:目的观察粒细胞巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)分泌型肝癌疫苗对移植性肝癌小鼠细胞毒性T淋巴细胞(CTL)杀伤活性的影响。方法取小鼠肝癌细胞株H22细胞1×10^6/只注入小鼠腹腔内,接种7d形成腹水瘤后再在小鼠体内传3代。取生长旺盛且无血性的腹水,在无菌条件下制成2×10^7/ml的细胞悬液,以2×10^6细胞/0.1ml/只接种于小鼠右前肢皮下。将肝癌细胞移植瘤动物分成3组。4天后,在右侧背部皮下进行免疫治疗,即制备GM-CSF分泌型H22肝癌瘤苗并免疫ICR小鼠(H22-GM-CSF组,n=5),同时设立无GM-CSF基因修饰H22肝癌瘤苗组(H22组,n=5)和PBs对照组(PBS组,n=5),测量各组小鼠肿瘤体积;采用细胞增殖计数法检测小鼠脾血CTL杀伤活性。结果随着效/靶比增加,各组CTL杀伤活性均增强。在效/靶比为50∶1时,GM-CSF-H22组CTL杀伤活性为60±6.1%,明显高于H22组(17.4±0.9%)和PBS组(12.2±0.6%,P〈0.01);GM-CSF分泌型肝癌细胞瘤苗明显抑制H22荷瘤小鼠肿瘤生长。在21天时,H22-GM-CSF组、H22组和PBS组小鼠肿瘤体积分别为0.63±0.05mm3、1.47±0.75mm3和1.79±0.34mm3(P〈0.01)。结论GM-CSF分泌型肝癌细胞瘤苗可抑制肿瘤细胞生长,增强CTL杀伤活性。

  • 标签: 肝癌 粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子 肿瘤疫苗 细胞毒性T淋巴细胞 小鼠
  • 简介:摘要目的EV-71感染引起的手足口病发病率高,可引起神经系统等并发症,造成高死亡率。本研究拟探讨某些炎症因子与重症手足口的发生相关。方法将79例患儿分为EV/CA/EV+CA/其他病毒感染组(A/B/C/D组),同时选用10例正常体检患儿作为对照组(E组)。通过RT-PCR方法检测受试者咽拭子及血清中EV-71、CA-16及其他病毒的核酸表达,通过酶联免疫吸附法检测血清中如白介素1β(IL-1β)、白介素6(IL-6)、白介素10(IL-10)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)、集落刺激因子(GM-CSF)和干扰素γ(IFN-γ)分泌情况。结果IL-1β,IL-6,IL-10和TNF-α在A/B/C/D组内无明显差异;GM-CSF及IFN-γ在A组较B/C/D组明显升高。结论炎症因子IFN-γ和GM-CSF可应用于由EV-71感染引起的手足口病的早期诊断。

  • 标签: EV-71 手足口病 炎症因子