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  • 简介:摘要目的探讨TAB182促进同源重组(HR)修复的相关调控分子及机制。方法利用shRNA敲低人乳腺癌MCF-7细胞中的TAB182基因,TAB182敲低的MCF-7细胞为沉默组,使用shRNA阴性对照物的MCF-7细胞为TAB182阴性对照组。通过RNA测序分析,筛选与TAB182相关差异表达的HR修复基因。qRT-PCR验证相关基因的mRNA表达,Western blot验证相关蛋白的表达。RAD51和BrdU免疫荧光检测DNA断裂末端形成的3′单链DNA(ssDNA);流式细胞术检测细胞周期阻滞和细胞凋亡;集落形成实验检测细胞的放射敏感性。结果RNA测序分析和qRT-PCR验证结果一致,TAB182沉默组细胞中RPA2的mRNA表达降低(t=17.97,P<0.05)。相比于TAB182阴性对照组细胞,TAB182沉默组细胞RPA2在蛋白水平也显著减少。相比于TAB182阴性对照组,TAB182沉默组细胞中RAD51焦点(foci)的表达显著降低;3′ ssDNA结合蛋白标志物BrdU在TAB182沉默组细胞的细胞核中foci形成显著减少。在放射菌素D作用后的第4、8、12 h,相比于TAB182阴性对照组,TAB182沉默组细胞RPA2 mRNA的衰减加快(t=5.37、3.79、3.69,P<0.05)。相比于TAB182阴性对照组,TAB182沉默组细胞放射敏感性增加(t=3.48,P<0.05);且TAB182沉默组放射诱发的凋亡率显著增加(t=11.05,P<0.05)、照射后24 h的周期阻滞时间延长(t=8.40,P<0.01)。结论TAB182通过维持RPA2 mRNA的稳定性,促进RPA2的表达,在DSBs的同源重组修复通路中发挥作用。TAB182的缺失可增强肿瘤细胞的放射敏感性。

  • 标签: TAB182 RPA2 DNA双链断裂 同源重组修复 放射敏感性
  • 简介:[摘要]目的:观察化湿解毒饮联合艾肤祛螨膏治疗螨虫皮炎的临床疗效。方法:将182例螨虫皮炎随机分为2组,治疗组100例、对照组82例,治疗组给予化湿解毒饮口服,外涂艾肤祛螨膏;对照组给予氯雷他定糖浆、克拉霉素片口服,外涂莫匹罗星软膏。观察1周。结果:经治疗后,治疗组总有效率(98.0% )大于对照组的总有效率(63.4%)。2组比较,差异有显著意义(X2= 29.057,P<0.05)。结论:化湿解毒饮联合艾肤祛螨膏治疗螨虫皮炎疗效确切。

  • 标签: []螨虫皮炎 化湿解毒饮 艾肤祛螨膏
  • 简介:摘要目的探讨山茱萸提取物对人前列腺癌PC3细胞增殖、凋亡及B细胞淋巴瘤/白血病-2(Bcl-2)和miR-182的影响。方法制备山茱萸提取物,根据MTT法确定山茱萸提取物对人前列腺癌PC3细胞的半数抑制浓度。实验分为阴性对照组、阳性对照组、低剂量组、中剂量组和高剂量组。阴性对照组细胞不进行处理;阳性对照组采用终浓度5 mg/L的顺铂干预细胞;低剂量组、中剂量组和高剂量组分别用终浓度为20、40、80 mg/L的山茱萸提取物干预细胞,48 h后,采用流式细胞术检测各组PC3细胞的凋亡率。采用实时荧光定量PCR检测各组PC3细胞中miR-182、Bcl-2和促凋亡因子(Bax) mRNA水平,同时采用蛋白印迹法检测各组PC3细胞中Bcl-2和Bax蛋白水平。结果随着山茱萸提取物浓度增加,PC3细胞的增殖率降低(P<0.05)。当山茱萸提取物浓度为80 mg/L时,增殖率最先降到50%左右,故选择80 mg/L作为半数抑制浓度。与阴性对照组比较,其余各组细胞的凋亡率、miR-182和Bax mRNA水平、Bax蛋白水平增加,Bcl-2 mRNA和蛋白水平降低,差异均有统计学意义(均P<0.05);与阳性对照组比较,低、中、高剂量组细胞的凋亡率、miR-182和Bax mRNA水平、Bax蛋白水平降低,Bcl-2 mRNA和蛋白水平增加,且随着山茱萸提取物剂量增加,各指标呈剂量反应关系,差异均有统计学意义(均P<0.05)。结论山茱萸提取物可诱导PC3细胞凋亡,抑制PC3细胞增殖,其机制可能与山茱萸提取物通过上调miR-182表达进而抑制Bcl-2活性有关。

  • 标签: 前列腺肿瘤 山茱萸 细胞增殖 细胞凋亡