简介:目的:探讨宫颈癌组织中miR-150的表达及意义。方法:收集62例宫颈癌组织样本,其中Ib期患者23例,IIa期患者29例、IIb期患者10例,正常宫颈组织13例,采用实时荧光定量PCR方法检测miR-150在不同宫颈组织中的表达,并将检测结果和临床及病理资料进行统计学分析。结果:宫颈癌组织中miR-150mRNA的表达量显著高于相应癌旁组织;宫颈癌组织miR-150mRNA的表达量明显高于正常宫颈组织,差异具有统计学意义(P〈0.01);宫颈癌患者癌组织中miR-150mRNA的表达水平与宫颈癌的临床分期相关,与宫颈癌Ib期患者相比,IIa期以及IIb期宫颈癌患者癌组织中miR-150mRNA的表达水平明显增高,差异具有统计学意义(P〈0.05),而宫颈癌IIa期与IIb期患者的miR-150mRNA表达水平之间无明显差异(P〉0.05)。结论:miR-150在宫颈癌组织中高表达,可能作为癌基因调控宫颈癌的发生及发展。
简介:摘要目的本研究探讨干扰miR-150表达对鼻咽癌细胞5-8F增殖的影响。方法使用脂质体将miR-150抑制剂转染5-8F,以无关序列抑制剂作为阴性对照。采用qRT-PCR技术验证miR-150抑制剂转染细胞中miR-150的表达水平;通过MTS法实验观察miR-150表达下调对5-8F细胞增殖能力的影响。结果转染miR-150抑制剂的5-8F细胞中miR-150的表达量明显下调,并且呈现明显的浓度依赖性。表明转染miR-150抑制剂能显著降低5-8F细胞中miR-150的表达。转染miR-150抑制剂的5-8F细胞与对照细胞相比,增殖速度明显减慢,差异具有显著性(P<0.05)。结论miR-150能促进鼻咽癌细胞增殖能力,它可能在鼻咽癌的发生和进展中发挥重要作用。
简介:目的研究miR-150*修饰对骨髓间充质干细胞来源的囊泡(exosome)对胶质瘤细胞的影响。方法qRT-PCR检测miR-150*在胶质母细胞瘤组织与正常组织间的表达量差异。培养骨髓间充质干细胞(BMSCs),分别转染miR-150*模拟物和阴性对照序列,上调BMSCs中miR-150*表达水平,提取BMSCs培养基中的exosome。Westernblot验证exosomal的表面标记蛋白CD63和flotillin-1,电镜下观察exosome的形态。CCK-8和细胞周期实验验证miR-150*修饰BMSCs来源的exosome对胶质瘤细胞的影响。结果miR-150*在胶质母细胞瘤组织中表达明显低于正常脑组织,转染miR-150*模拟物能明显提高BMSCs来源的exosome中miR-150*的表达。miR-150*修饰BMSCs来源的exosome能有效抑制胶质瘤细胞的增殖。结论miR-150*(miR-150的互补核苷酸序列)在胶质母细胞瘤组织中低表达,miR-150*修饰BMSCs来源的exosome对胶质瘤细胞有抗增殖的作用。因此exosome可作为一种有效的基因治疗载体。
简介:摘要目的通过采集肿瘤患者放疗前后外周血,探讨照射对人外周血血清miR-150-5p、miR-23a-3p表达的影响,以期为寻找辐射生物标志物提供科学依据。方法以2021年10月至2022年3月63例行放疗的肿瘤患者为研究对象,采用实时荧光定量PCR(qPCR)方法,检测患者放疗前后外周血血清miR-150-5p与miR-23a-3p的相对表达水平。比较两种miRNAs放疗前后在患者外周血血清中的差异表达变化,分析其与肿瘤类型等因素的关系。结果放疗后,患者外周血血清miR-150-5p与miR-23a-3p的相对表达量明显低于放疗前(t=4.97,Z=-2.77,P<0.05)。不同的肿瘤类型中,乳腺癌、食管癌和其他消化道肿瘤患者放疗后miR-150-5p的相对表达量降低(t=3.47、2.47、2.87,P<0.05),消化道肿瘤患者放疗后miR-23a-3p相对表达量下降(Z=-1.99,P<0.05)。在放疗前、后miR-150-5p的表达改变均不受性别、年龄、化疗和肿瘤类型等因素影响(P>0.05),而miR-23a-3p的表达改变在放疗后受性别、年龄和化疗等因素影响(t=2.04、-3.34、-2.29,P<0.05)。结论放疗可影响肿瘤患者血清中miR-150-5p的表达,其有作为辐射生物学标志物的潜力。
简介:摘要目的探讨尿液外泌体miR-150-5p在不同年龄段人群中表达量的变化及miR-150-5p在肾脏衰老过程中的作用。方法选择2014年1月至2016年12月于北京友谊医院老年医学科就诊的76例为研究对象,其中青年组15例,中年组35例,老年组26例,提取尿液外泌体,利用实时定量荧光PCR法检测miR-150-5p表达情况,并通过Logistic回归分析评估不同含量miR-150-5p与年龄、性别、高血压病史、冠心病病史、高脂血症之间的相关性;在人肾小管上皮细胞HK2细胞中过表达和敲低miR-150-5p后,通过蛋白质印迹法分析HK-2细胞中上皮细胞黏附分子相关蛋白表达量情况;通过细胞学实验明确miR-150-5p过表达或敲低后对HK-2细胞增殖、细胞周期的影响。结果Logistic回归分析发现年龄与尿液外泌体中miR-150-5p相对含量密切相关(P<0.05),老年组尿液外泌体内miR-150-5p相对含量(1.33±0.41)较青年组(0.88±0.40)明显增加(P<0.05),且随着年龄增长,尿液外泌体内miR-150-5p相对含量与肾小球滤过率水平成反比。体外实验发现在肾小管上皮细胞HK-2中敲低miR-150-5p后上皮细胞黏附分子Zo-1、E-Cadherin表达量略有下降;而过表达miR-150-5p后,Zo-1、E-Cadherin表达略有增高,miR-150-5p可能影响HK-2细胞的凋亡。结论尿液外泌体miR-150-5p在老年组人群中表达量略有增加,且与肾功能相关;miR-150-5p可影响肾小管上皮细胞中部分上皮细胞黏附分子相关蛋白的表达,有望成为肾脏衰老相关性基因之一。
简介:摘要目的探讨miR-150-5p在慢性阻塞性肺疾病(COPD)相关肺动脉高压(PH)中的表达水平及临床意义。方法本研究为病例对照研究,采用非随机抽样的方法选择2019年7月至2020年12月在长沙市第三医院呼吸与危重症医学科门诊随诊的稳定期COPD患者198例,根据肺动脉收缩压(SPAP)和匹配度,筛选出COPD合并PH(COPD+PH)组30例和单纯COPD组30例,同期健康人(对照组)20名。检测3组肺功能指标第1秒用力呼气容积/用力肺活量(FEV1/FVC)、第1秒用力呼气容积占预计值的百分比(FEV1%pred)、N末端脑钠肽前体(NT-proBNP)和外周血miR-150-5p的表达水平,分析miR-150-5p相对表达量与NT-proBNP水平、SPAP的相关性。用曲线下面积评价miR-150-5p判断COPD患者继发PH的诊断价值。结果COPD+PH组和单纯COPD组FEV1/FVC和FEV1%pred均低于对照组,分别为FEV1/FVC(55.09±6.91)%、(57.80±7.04)%比(86.62±3.40)%;FEV1%pred(64.30±8.41)%、(66.82±7.90)%比(102.06±4.12)%(F值分别为45.61和44.97,P值均<0.01)。COPD+PH组和单纯COPD组NT-proBNP高于对照组,COPD+PH组又高于单纯COPD组,分别为(533.95±139.03)ng/L、(148.91±9.47)ng/L比(35.29±11.40)ng/L(P值均<0.01);COPD+PH组和单纯COPD组血清中miR-150-5p水平低于对照组,COPD+PH组又低于单纯COPD组[0.134(0.081,0.210)、0.312(0.248,0.388)比0.506(0.383,0.721),χ2=56.09,P<0.01]。相关性分析显示miR-150-5p的相对表达量与NT-proBNP和SPAP均呈负相关(r值分别为-0.872和-0.884,P值均<0.01)。受试者工作曲线分析显示,当miR-150-5p截断值为0.252时,曲线下面积为0.982(95%CI:0.959~1.000),其敏感度为96.70%,特异度为90.00%,准确度为93.33%。结论COPD合并PH患者外周血中miR-150-5p表达水平下调,与NT-proBNP和SPAP呈负相关。外周血miR-150-5p对COPD合并PH的预测能力有较高的敏感度、特异度和准确度,可作为COPD患者继发PH的早期诊断及病情评估的潜在生物标志物。
简介:摘要目的探讨非小细胞肺癌(NSCLC)患者癌组织miR系列基因表达水平与手术疗效的相关性。方法分别收集2013年10月至2017年4月的同时收集25例NSCLC手术患者的癌组织和癌旁组织冰冻样本,以及手术前和手术后2周的血清样本。组织totalRNA抽提使用ThemirVanamiRNAIsolationKit(Ambion,Austin,Texas,USA)。血清的totalRNA使用microRNAsIsolationKit(AppliedBiosystems,ForsterCity,CA,USA)抽提。totalRNA溶于DEPC处理水中,零下80度保存。RNA浓度使用Nanodrop2100(NanoDrop,Wilmington,DE)测量。采用qRT-PCR方法检测NSLCLC患者手术前、后血清miR系列基因表达水平,判断血清miR系列基因表达水平与手术效果的关系。结果NSLCLC患者的组织中miR-17-3p、miR-18a、miR-19a、miR-20a、miR-19b-1和miR-92-1基因表达与癌旁组织存在显著差异(P<0.01)。NSLCLC患者手术后的血清miR-17-3p、miR-18a、miR-19a、miR-20a、miR-19b-1和miR-92-1基因表达与手术前存在明显差异(P<0.05)。结论miR-17-3p、miR-18a、miR-19a、miR-20a、miR-19b-1和miR-92-1基因表达水平在NSCLC患者癌组织内明显升高,手术切除后血清基因表达明显下降。血清miR系列基因有可能成为预测NSCLC手术预后的分子标志物。
简介:[摘要] 目的:从表观遗传学角度出发,深入研究miR-150-5p在银屑病的发病机制中的作用。方法:采用双荧光素酶报告基因实验技术,验证HIF-1α为miR-150-5p的直接靶基因。通过体内转染实验探讨miR-150-5p通过靶向HIF-1α信号通路对Th17细胞的分化和功能影响。结果:下调miR-150-5p可能通过增加HIF-1α基因的表达,促进Th17细胞分化,分泌大量的IL-17、IL-22等细胞因子,促进小鼠银屑病的发生。结论:miR-150-5p可能在银屑病的发病中起作用,为临床探究银屑病新的治疗靶点和策略提供一定的参考依据。
简介:目的探讨MIR(微小RNA)-92a、MIR-100及MIR-143的表达水平对膀胱癌的诊断价值。方法收集我院2016年10月至2017年4月期间,50例临床及病理诊断为膀胱癌的患者血清及50例健康受试者的血清,通过应用实时定量反转录聚合酶链反应(RT-qPCR)检测血清中MIR-92a、MIR-100及MIR-143的表达水平,并应用受试者工作特征曲线(ROC曲线)计算MIR-92a、MIR-100及MIR-143的临界值,同时利用所得到的临界值单独或联合检测血清样本中MIR-92a、MIR-100及MIR-143的相对表达水平,计算其灵敏度及特异度。结果膀胱癌患者血清样本中MIR-92a、MIR-100及MIR-143的相对表达水平显著低于对照组,通过单独检测分析发现MIR-92a的灵敏度为96.0%,特异度为74.0%;MIR-100的灵敏度为86.0%,特异度为65.0%;MIR-143的灵敏度为74.0%,特异度为90.0%;MIR-100和MIR-92a组合的灵敏度为88.0%,特异度为82.0%;MIR-92a和MIR-143组合的灵敏度为92.0%,特异度为92.0%;MIR-143和MIR-100组合的灵敏度为86.0%,特异度为82.0%。结论膀胱癌患者血清中对MIR-92a和MIR-143组合联合检测有助于对诊断膀胱癌的诊断。