简介：摘要目的探讨磷酸化的P38丝裂原活化蛋白激酶(p-p38-MAPK)、胰岛素受体(INS-R)在人精子中的表达水平与精子活力的相关性。方法抽取2019年7月至2020年6月于安阳市妇幼保健院就诊的因弱精子症而致男性不育的患者共70例，取其精液标本，利用上游法、密度梯度离心加上游法优选精子，分为活力强的上游精子组和活力弱的沉淀精子组，采用逆转录-多聚合酶链反应(RT-PCR)测定INS-R mRNA在精子中的表达情况，采用免疫印迹法测定p-p38-MAPK与INS-R在两组中的相对表达水平，并分析p-p38-MAPK、INS-R与精子活力的相关性。结果INS-R mRNA在两组精子标本中均有表达，p-p38-MAPK蛋白与INS-R蛋白在两组精子标本中也均有不同程度的表达，但两组INS-R蛋白的表达水平比较差异未见统计学意义(P>0.05)，而p-p38-MAPK蛋白在沉淀精子组中的相对表达量(0.43±0.06)高于上游精子组(0.19±0.04), P<0.05。结论INS-R的表达水平与精子的活力无关，而p-p38-MAPK的高表达可能是精子活力降低的原因之一。

简介：摘要目的探讨lncRNA UCA1通过调控miR-873-5p表达对体外培养的胶质瘤SHG-44、U87、U251细胞放射敏感性的影响。方法采用克隆形成实验检测X线照射0、2、4、6、8 Gy SHG-44、U87、U251细胞存活情况，qRT-PCR检测SHG-44、U87、U251细胞中UCA1基因表达。以放射抵抗的U87、U251细胞为研究对象，沉默UCA1表达、过表达miR-873-5p后用克隆形成实验及流式细胞术检测细胞存活分数和细胞凋亡率。双荧光素酶报告基因实验和qRT-PCR检测验证UCA1和miR-873-5p的靶向关系。结果UCA1在U87、U251细胞中表达上调。沉默UCA1或过表达miR-873-5p可抑制U87、U251细胞存活，并促进细胞凋亡。miR-873-5p是UCA1靶基因，UCA1可负性调控miR-873-5p1的表达。抑制miR-873-5p表达可逆转沉默UCA1对胶质瘤细胞放射敏感性的影响。沉默UCA1增加射线对胶质瘤细胞U251移植瘤的抑制作用。结论沉默UCA1通过上调miR-873-5p表达，抑制胶质瘤细胞存活并促进其凋亡，从而提高胶质瘤细胞放射敏感性。

简介：摘要目的探讨长链非编码RNA(lncRNA) MYOSLID靶向微小RNA(miR)-339-5p调控肺癌细胞生物学行为的分子机制。方法收集2016年5月至2018年4月于本院接受手术治疗的肺癌组织及癌旁组织标本20例，采用实时荧光定量聚合酶链反应(RT-qPCR)法检测肺癌组织及癌旁组织中MYOSLID与miR-339-5p的表达。体外培养肺癌细胞株A549并分组转染，用噻唑蓝(MTT)、双荧光素酶报告实验验证MYOSLID对miR-339-5p的靶向调控作用；通过细胞转染及分组，流式细胞术检测细胞凋亡，Transwell实验检测细胞迁移及侵袭，双荧光素酶报告基因检测，蛋白质印迹法(Western blot)检测，细胞周期蛋白D1(Cyclin D1)，负向调控因子P21(p21)，B淋巴细胞瘤2(bcl-2)、bcl-2相关X蛋白(bax)、金属蛋白酶2(MMP)-2、MMP-9蛋白表达用Image J软件分析各条带灰度值。结果抑制lncRNA MYOSLID表达对肺癌A549细胞活力及Cyclin D1蛋白相对表达量，si-MYOSLID组低于si-NC组[1.00±0.09比0.42±0.04，t＝17.667，P<0.05；0.74±0.06比0.31±0.03，t＝19.230，P<0.05]；p21蛋白si-MYOSLID组高于si-NC组[0.28±0.03比0.69±0.06，t＝18.335，P<0.05，]，差异有统计学意义。抑制lncRNA MY OSLID表达对肺癌A549细胞凋亡率(%)及bax的表达水平，si-MYOSLID组明显高于si-NC组[6.32±0.64比19.48±1.83，t＝20.317，P<0.05；0.32±0.03比0.71±0.07，t＝15.362，P<0.05]；bcl-2蛋白的表达水平，si-MYOSLID组明显高于si-NC组[0.62±0.06比0.23±0.03，t＝17.441，P<0.05]，差异有统计学意义。抑制lncRNA MYOSLID表达对肺癌A549细胞迁移与侵袭细胞数及MMP-2、MMP-9的表达水平，si-MYOSLID组低于si-NC组[0.22±0.06比0.43±0.01，t＝14.441，P<0.05；0.15±0.02比0.37±0.02，t＝10.410，P<0.05；0.36±0.02比0.48±0.02，t＝16.041，P<0.05]，差异有统计学意义。miR-NC组肺癌A549细胞增殖、凋亡率低于miR-339-5p组[(1.00±0.09)%比(2.58±0.25)%，t＝17.839，P<0.05；(7.32±0.74)%比(17.45±1.63)%，t＝16.041，P<0.05]；迁移细胞数及侵袭细胞数，miR-NC组高于miR-339-5p组(98.36±9.54比52.64±5.28，t＝12.579，P<0.05；84.33±8.41比44.69±5.17，t＝12.046，P<0.05)，差异有统计学意义。miR-339-5p过表达对肺癌A549细胞增殖、凋亡、迁移、侵袭相关蛋白表达的影响-Cyclin D1蛋白表达，miR-NC组高于miR-339-5p组(0.76±0.07比0.38±0.03，t＝14.968，P<0.05)；p21蛋白表达miR-NC组低于miR-339-5p组(0.27±0.03比0.64±0.06，t＝16.546，P<0.05)；bcl-2蛋白表达，MMP-9蛋白表达，MMP-2蛋白表达，miR-NC组低于miR-339-5p组(0.61±0.06比0.28±0.03，t＝14.758，P<0.05；0.71±0.07比0.33±0.03，t＝14.968，P<0.05；0.88±0.08比0.43±0.04，t＝15.093，P<0.05)bax蛋白表达，miR-NC组低于miR-339-5p组(0.31±0.03比0.68±0.06，t＝16.546，P<0.05)，差异有统计学意义。干扰miR-339-5p表达逆转了抑制lncRNA MYOSLID表达对肺癌A549细胞凋亡、迁移、侵袭的作用，与si-NC组比较，si-MYOSLID组逆转miR-339-5p表达，凋亡率(%)及迁移细胞数最明显，si-MYOSLID和si-MYOSLID+anti-miR-339-5p差异有统计学意义[(2.41±0.24)比(1.53±0.14)，F＝119.730，P<0.05；(19.63±1.95)比(12.48±1.23)，F＝130.702，P<0.05；(43.16±4.38)比(82.64±8.26)，F＝141.749，P<0.05]；与si-MYOSLID+anti-miR-NC组比较，si-MYOSLID+anti-miR-339-5p凋亡率[(12.48±1.23)%，F＝130.027，P<0.05]干扰miR-339-5p表达逆转了抑制lncRNA MYOSLID表达对肺癌A549细胞凋亡、迁移、侵袭相关蛋白表达的作用，蛋白表达si-MYOSLID组和si-MYOSLID+anti-miR-339-5p组差异有统计学意义。结果显示抑制MYOSLID的表达可通过靶向miR-339-5p而抑制肺癌细胞增殖、迁移及侵袭，并可诱导细胞凋亡，MYOSLID可能为肺癌治疗的潜在新靶点。结论lncRNA MYOSLID通过调控miR-339-5p促进肺癌细胞的增殖、迁移及侵袭，抑制细胞凋亡。

简介：摘要目的评价自体血小板分离回输对急性A型主动脉夹层（acute type A aortic dissection, ATAAD）患者P-选择素和炎性因子水平的影响，以探讨其肺保护作用。方法选择拟在CPB和深低温停循环下行主动脉弓人工血管替换和象鼻支架植入术的ATAAD患者48例，年龄24~68岁，采用随机数字表法将患者分为两组（每组24例）：对照组（C组）和血小板分离组（P组）。P组患者于全身麻醉后进行急性血小板分离，采集富血小板血浆并于CPB结束后回输；C组输入等量6%羟乙基淀粉130/0.4。所有患者分别于麻醉诱导前（T1）、CPB开始前（T2）、CPB结束后30 min（T3）和术后6 h（T4）抽取动脉血行血气分析，计算PaO2/FiO2和肺泡-动脉氧分压差（alveolar-arterial oxygen partial pressure difference，P（A-a）O2），同时抽取静脉血检测血浆P-选择素和炎性因子（IL-6、IL-8、TNF-α）浓度、血小板计数及白细胞计数。结果与T1时比较：P组T2时血浆P-选择素、血小板计数、白细胞计数均减少，P（A-a）O2升高（P<0.05）；T3时PaO2/FiO2、血小板计数、白细胞计数减少，P（A-a）O2、P-选择素、IL-6、IL-8和TNF-α升高（P<0.05）；T4时PaO2/FiO2、血小板计数减少，P（A-a）O2、P-选择素、IL-6、IL-8和TNF-α升高（P<0.05）。与T1时比较，C组T2~T4时PaO2/FiO2、血小板计数减少，P（A-a）O2、P-选择素、IL-6、IL-8和TNF-α升高，T4时白细胞计数升高（P<0.05）。与C组比较，P组T2~T4时PaO2/FiO2升高，P（A-a）O2、P-选择素、IL-6、IL-8、TNF-α、白细胞计数降低，T2、T3时血小板计数减少（P<0.05）。结论自体血小板分离回输可降低ATAAD患者术中P-选择素及IL-6、IL-8、TNF-α水平，减轻炎症反应，具有肺保护作用。

简介：摘要目的探讨微RNA-377-3p（microRNA-377-3p, miR-377-3p）对缺氧/复氧（hypoxia/reoxygenation, H/R）人肾近端肾小管上皮细胞（human renal tubule epithelial cell line, HK-2）损伤的影响及机制。方法HK-2先置于三气低氧培养箱（1%O2、5%CO2、94%N2）中培养12 h，诱导细胞缺氧损伤。之后细胞置于常氧培养箱（5%CO2、95%空气）培养，建立HK-2 H/R模型。构建miR-377-3p抑制剂（inhibitor）、miR-377-3p拟似物（mimic）、X染色体连锁的凋亡抑制蛋白（X-linked inhibitor of apoptosis, XIAP）特异性小干扰RNA（small interfering RNA, siRNA）（si-XIAP）及相应的对照物转染细胞。按照随机数字表法将细胞分为7组（每组5×105个细胞），即正常常氧组（NC组）、缺氧/复氧组（H/R组）、miR-377-3p抑制剂对照组（miR-IC组）、miR-377-3p抑制剂组（miR-I组）、miR-377-3p拟似物对照组（miR-MC组）、miR-377-3p拟似物组（miR-M组）、miR-377-3p抑制剂特异性小干扰RNA组（miR-XIAP组）。采用RT-PCR实验检测细胞中miR-377-3p表达量，细胞计数试剂盒（cell counting kit-8, CCK8）检测细胞存活率，ELISA实验检测炎症因子IL-6及TNF-α表达水平。生物信息学软件预测miR-377-3p靶基因，荧光素酶报告基因实验检测miR-377-3p对XIAP信使RNA（messenger RNA, mRNA）3′端非翻译区（untranslated region, UTR）荧光素酶活性的变化。CCK8及ELISA实验检测细胞经miR-377-3p抑制剂特异性小干扰RNA处理后细胞存活率及炎症因子变化。结果成功建立HK-2 H/R模型。与NC组比较，miR-377-3p表达水平在H/R组明显升高（P<0.05）；与H/R组比较，miR-I组miR-377-3p表达水平明显降低，miR-M组miR-377-3p表达水平明显升高（P均<0.05）。与NC组比较，H/R组细胞存活率明显降低、IL-6及TNF-α表达升高（P均<0.05）；与H/R组比较，miR-I组细胞存活率增高且IL-6及TNF-α表达水平降低，miR-M组细胞存活率下降、IL-6及TNF-α表达水平增加（P均<0.05）。生物信息学方法提示XIAP为miR-377-3p靶基因，miR-377-3p降低XIAP的表达并且抑制XIAP 3′UTR野生型报告基因活性（P均<0.05）。此外，CCK8及ELISA结果提示，敲减XIAP可逆转miR-377-3p抑制剂导致的细胞存活率增强及IL-6和TNF-α表达下降（P均<0.05）。结论抑制miR-377-3p可减轻H/R诱导的HK-2损伤，其机制与负性调控XIAP有关。

简介：AbstractBackground:Microribose nucleic acids (miRNAs) are implicated in the progression of lung adenocarcinoma. MicroRNA-345-5p (miR-345-5p) is a recently identified anti-oncogene in some human cancers, but its functional role and possible molecular mechanism in lung adenocarcinoma remain unknown. This study aimed to identify the biological function and underlying mechanism of miR-345-5p in lung adenocarcinoma cells.Methods:In this study, lung adenocarcinoma tissues and adjacent tissues were collected in the First Affiliated Hospital of Anhui Medical University between April 2016 and February 2017. The expression of miR-345-5p and ras homolog family member A (RhoA) in lung adenocarcinoma tissues and human lung adenocarcinoma cell lines (A549, H1650, PC-9, and H441) was detected by reverse transcription quantitative polymerase chain reaction analysis. Functional assays including colony formation, flow cytometry analysis, wound healing, and transwell assays were performed to assess the proliferation, apoptosis, migration, and invasion of lung adenocarcinoma cells. In addition, RNA pulldown and luciferase reporter assays were conducted to evaluate the relationship between miR-345-5p and RhoA. Difference between the two groups was analyzed with Student’s t test, while that among multiple groups was analyzed with one-way analysis of variance.Results:MiR-345-5p expression displayed lower level in lung adenocarcinoma tissues (0.241 ± 0.095 vs.1.000 ± 0.233, t = 19.247, P < 0.001) and cell lines (F = 56.992, P < 0.001) than control tissues and cells. Functional experiments demonstrated that upregulation of miR-345-5p inhibited the malignant phenotypes of lung adenocarcinoma cells via suppressing cell proliferation, migration, invasion, and facilitating cell apoptosis. Additionally, RhoA was verified to be the downstream target of miR-345-5p. Expression of RhoA was downregulated by overexpression of miR-345-5p in PC-9 (0.321 ± 0.047 vs. 1.000 ± 0.127, t = 8.536, P < 0.001) and H1650 (0.398 ± 0.054 vs. 1.000 ± 0.156, t = 4.429, P = 0.011) cells. Rescue assays revealed that overexpression of RhoA rescued the suppressive effects of miR-345-5p upregulation on proliferation, migration, and invasion of lung adenocarcinoma cells. Further, miR-345-5p was found to regulate the Rho/Rho-associated protein kinase (ROCK) signaling pathway by downregulation of RhoA in lung adenocarcinoma cells.Conclusions:MiR-345-5p plays a tumor suppressor role in lung adenocarcinoma cells by downregulating RhoA to inactivate the Rho/ROCK pathway.

简介：摘要弥漫大B细胞淋巴瘤（DLBCL）是一组异质性疾病，进一步分型对预后分层有着重要价值。近年来，一些预后较差的亚型，如"双打击"淋巴瘤或"双表达"淋巴瘤逐渐被认识。此外新的分子学分型为DLBCL的精准诊断及预后分层带来新视角。p53基因突变和缺失是DLBCL传统意义上的高危因素，但随着二代测序等技术的应用，更精确的基因突变或缺失对预后的影响及其在新的细胞分子亚型中的预后价值尚需进一步证实。现就细胞分型、分子学分型及p53基因异常在DLBCL预后的研究进展进行综述。

简介：摘要目的探究高迁移率蛋白A2基因(HMGA2)调控微小RNA(miRNA，miR)-497-5p对膀胱癌细胞增殖和侵袭的机制。方法实时荧光定量反转录聚合酶链反应(RT-qPCR)和免疫印迹实验(Western blot)测定5种膀胱癌细胞系、膀胱永生化上皮细胞SV-HUC-1和正常膀胱尿路上皮细胞中的HMGA2表达。构建HMGA2过表达和si-HMGA2质粒转染EJ细胞，不做任何处理作为对照，检测各组EJ细胞miR-497-5p和p65、p-p65表达水平。EJ细胞转染不同质粒后，克隆形成实验检测增殖能力，Transwell实验测定侵袭能力。两组间比较采用独立样本t检验。结果5种膀胱癌细胞系的HMGA2表达(10.31±0.86、138.38±19.32、34.55±3.95、10.88±0.56、220.55±15.32)高于SV-HUC-1(2.02±0.32，t＝15.648、12.223、14.218、23.793、24.701，P<0.01)。HMGA2组克隆数和侵袭细胞个数[(254.33±7.64)、(380.67±7.10个)]高于Blank组[(170.67±14.79)、(267±11.37)个，t＝9.768、17.168，P<0.01]；miR-497-5p mimic组克隆数和侵袭细胞个数[(174.00±1.73)、(109±3.46)个]低于miR-NC组[(189.00±7.55)、(219.00±16.64)个，t＝3.354、11.207，P<0.01)]；si-HMGA2+miR-497-5p inhibitor组克隆数和侵袭细胞个数[(203.00±13.08)、(305.00±3.46)个]高于si-HMGA2组[(138.67±19.04)、(170.33±24.99)个，t＝4.825、9.247，P<0.01]。HMGA2转染组p-p65/p65水平的比值(254.33±7.64)高于对照组(254.33±7.64，t＝18.557，P<0.01)。结论HMGA2基因负向调控miR-497-5p促进膀胱癌细胞的增殖和侵袭。

简介：摘要目的分析P-选择素、促血小板生成素（TPO）在脑胶质瘤患者表达情况，并探讨其与病情严重程度的相关性。方法选择2017年6月至2019年6月在大连市第三人民医院接受治疗的106例脑胶质瘤患者作为观察组，同期50例医院健康体检的健康者作为健康组。对两组患者的临床资料进行分析。结果观察组患者的血清P-选择素、TPO水平明显高于健康组[（62.35 ± 16.71） μg/L比（25.42 ± 9.18） μg/L、（12.64 ± 3.26） μg/L比（6.93 ± 1.77） μg/L]（P < 0.01）。在不同严重程度脑胶质瘤患者中，高级别组患者的血清P-选择素、TPO水平明显高于低级别组[（65.14 ± 17.19） μg/L比（53.71 ± 15.26） μg/L、（14.57 ± 3.38） μg/L比（9.04 ± 1.97） μg/L]（P < 0.01）。脑胶质瘤患者治疗后的血清P-选择素、TPO水平明显低于治疗前[（57.28 ± 16.22） μg/L比（62.35 ± 16.71）μg/L、（10.85 ± 2.97） μg/L比（12.64 ± 3.26） μg/L]（P<0.01）。Spearman相关性分析结果显示，脑胶质瘤患者血清P-选择素、TPO水平与WHO分级呈正相关性（r = 0.417、0.361，P<0.05）。受试者工作特征曲线分析结果显示，血清P-选择素水平在诊断脑胶质瘤时的曲线下面积（AUC）为0.859（95% CI 0.794 ~ 0.910，P<0.01），灵敏度为90.00%，特异度为74.53%；血清TPO水平在诊断脑胶质瘤时的AUC为0.720（95% CI 0.643 ~ 0.789，P<0.01），灵敏度为69.81%，特异度为72.00%。结论血清P-选择素、TPO在脑胶质瘤患者中均存在着异常表达的情况，且其水平变化同病情严重程度相关。

简介：摘要目的探讨OA发病机制中潜在的Hub基因、关键miRNAs、生物过程及相关信号通路，为OA的发病机制及治疗提供生物信息学依据。方法从基因表达综合数据库（GEO）下载OA滑膜组织样本的表达谱芯片，鉴定差异表达基因DEGs，并进行功能富集分析。构建蛋白-蛋白相互作用网络（PPI），STRING和Cytoscape进行模块分析，进一步鉴定Hub基因，并对Hub基因进行更深一步的miRNAs挖掘。结果最终鉴定出与OA进展相关的9个Hub基因[细胞因子信号转导抑制因子（SOCS）3、转导素重复序列包含蛋白（BTRC）、F-框蛋白32（FBXO32）、KLHL22、UBE3A、HUWE1、UBR4、ANAPC5、TRIM50]和2个关键miRNAs（hsa-miR-103a-3P、hsa-miR-107），可能是OA发病机制中的潜在生物标志物。信号转导、RNA聚合酶Ⅱ启动子的转录正调控和蛋白丝氨酸/苏氨酸酶活性与OA的发病机制具有一定的相关性。此外，分析结果表明cAMP信号通路和Rap1信号通路也参与了OA的进展。结论潜在生物学分子、生物过程及相关通路对于OA的病因研究及治疗研究具有重要的指导意义。

简介：摘要目的探讨自噬相关基因Beclin-1、LC3和p62在食管鳞状细胞癌（ESCC）中的表达及意义。方法回顾性分析2015年1月至2016年12月解放军陆军第八十一集团军医院接受手术治疗的112例原发性ESCC患者的临床资料。免疫组织化学法检测112例ESCC组织及31例癌旁正常食管黏膜组织中Beclin-1、p62和LC3蛋白的表达情况，分析3种自噬相关标志物在ESCC中的表达及其与患者临床病理特征的关系。结果112例ESCC组织中Beclin-1、LC3和p62阳性表达率分别为32.14%（36/112）、37.50%（42/112）和63.39%（71/112），31例癌旁正常食管黏膜阳性表达率分别为61.29%（19/31）、64.52%（20/31）和32.26%（10/31），差异均有统计学意义（χ2值分别为8.715、7.216、9.584，均P<0.01）。Beclin-1、LC3在ESCC中的阳性表达率均低于癌旁正常食管黏膜，p62在ESCC中的阳性表达率则高于癌旁正常食管黏膜。Beclin-1表达与ESCC患者组织学分级、肿瘤浸润深度、TNM分期、是否存在淋巴结转移均有关（均P<0.05）；LC3表达与ESCC患者肿瘤浸润深度、TNM分期均有关（均P<0.01）；p62表达与ESCC患者是否存在淋巴结转移有关（P<0.01）。在ESCC中，LC3与Beclin-1的表达呈正相关（r＝0.731，P＝0.001），而与p62的表达呈负相关（r＝-0.215，P＝0.023）。结论自噬在ESCC的发生、发展中发挥一定作用，联合检测自噬相关基因Beclin-1、p62和LC3可辅助临床诊断并指导后续综合治疗。

简介：摘要目的检测膀胱尿路上皮癌中微小RNA-15b-5p(miR-15b-5p)的表达，探讨其靶向犰狳重复X连锁蛋白2(ARMCX2)对细胞增殖的调控作用。方法选择69例2014年6月至2015年5月在海南医学院第二附属医院确诊并行手术治疗膀胱尿路上皮癌的患者，留取肿瘤组织。实时荧光定量PCR(qPCR)检测miR-15b-5p、免疫组织化学法检测ARMCX2和细胞核增殖抗原(Ki-67)的表达。选择尿路上皮癌T24细胞系，应用双荧光素酶报告基因实验验证miR-15b-5p和ARMCX2的靶向关系。建立无关序列组(NC组)、miR-15b-5p mimic组、miR-15b-5p inhibitor组、miR-15b-5p inhibitor和小干扰RNA(siRNA)-ARMCX2共转染组，应用蛋白质印迹法(Western blot)检测ARMCX2和Ki-67的表达，应用细胞计数试剂盒(CCK-8)检测细胞活性。两组间比较行独立样本的t检验，多组间比较行方差分析(SNK法行两两比较)。结果膀胱尿路上皮癌中miR-15b-5p的表达量范围为1.2～4.5，miR-15b-5p的表达量和ARMCX2的阳性率在不同病变级别(1.51±0.26比2.04±0.43，t＝4.560，P<0.05；78.95%比19.35%，χ2＝24.290，P<0.05)、是否为浸润性生长(1.60±0.40比1.86±0.44，t＝2.360，P<0.05；73.33%比35.90%，χ2＝9.520，P<0.05)的分组中差异有统计学意义。相关分析显示miR-15b-5p和ARMCX2(r＝-0.620，P<0.05)、miR-15b-5p和Ki-67(r＝-0.600，P<0.05)呈负相关，ARMCX2和Ki-67(r＝0.660，P<0.05)呈正相关。生存分析显示miR-15b-5p和ARMCX2与生存时间有关(χ2＝5.010，P<0.05)。双荧光素酶报告基因实验显示miR-15b-5p和ARMCX2具有靶向关系。MiR-15b-5p mimic组中ARMCX2(1.15±0.40比1.82±0.28，t＝3.430，P<0.05)和Ki-67(1.34±0.37比0.99±0.21，t＝2.780，P<0.05)的表达高于NC组，细胞活性低于NC组，miR-15b-5p inhibitor组中ARMCX2(2.24±0.35比1.82±0.28，t＝2.630，P<0.05)和Ki-67(1.65±0.26比0.99±0.21，t＝5.760，P<0.05)的表达高于NC组，细胞活性高于NC组，miR-15b-5p inhibitor和siRNA-ARMCX2共转染组ARMCX2(1.66±0.25比1.82±0.28，t＝1.130，P>0.05)、Ki-67(1.24±0.29比0.99±0.21，t＝1.710，P>0.05)的表达差异无统计学意义。结论MiR-15b-5p在膀胱尿路上皮癌中低表达，与肿瘤细胞的增殖及生长相关。MiR-15b-5p靶向ARMCX2抑制尿路上皮癌细胞的增殖。

简介：摘要目的探讨p53和Ki-67基因表达与膀胱癌病理分级和临床分期的关系。方法回顾性分析2013年1月至2015年1月在本院与天津医科大学第二医院收治的445例膀胱癌患者的临床资料，应用免疫组织化学染色的方法，对这些膀胱癌患者的病理切片进行p53和Ki-67免疫组化染色，并将p53和Ki-67基因的免疫组化表达强度结果与患者的病理分级和临床分期进行分析。结果在445例膀胱癌患者中，435例患者测得p53免疫组化指标，440例患者测得Ki-67免疫组化指标，Spearman秩相关分析表明，p53和Ki-67阳性程度越大，患者膀胱癌的病理分级、临床分期越高(P<0.05)。其中p53、Ki-67与病理分级的相关系数分别为0.298、0.181，与临床分期的相关系数分别为0.143、0.103，均呈正相关。结论p53和Ki-67基因的表达强度与膀胱癌病理分级与临床分期密切相关，即阳性程度越大，病理分级、临床分期越高。

简介：摘要目的探讨水通道蛋白3（AQP3）在皮肤光老化过程中的作用及机制。方法将正常人皮肤成纤维细胞（NHDF）分为NHDF组（未转染）、AQP3 cDNA组（转染AQP3 cDNA）、AQP3 siRNA组（转染AQP3 siRNA）、核内不均一核糖核蛋白Q（hnRNPQ）cDNA组（转染hnRNPQ cDNA）、hnRNPQ siRNA组（转染hnRNPQ siRNA）、AQP3-hnRNPQ cDNA组（转染AQP3 cDNA和hnRNPQ cDNA）、AQP3-hnRNPQ siRNA组（转染AQP3和hnRNPQ siRNA）、cDNA空载体组（转染cDNA空载体）、siRNA空载体组（转染siRNA空载体）。用长波紫外线（UVA，10 J·cm-2·d-1）连续照射已经转染或未转染的NHDF 3 d来建立细胞衰老模型，同时以未接受UVA照射的NHDF作为对照。用细胞计数法评估各实验组细胞增殖活性，衰老相关-β半乳糖苷酶染色试剂盒对各实验组进行染色来评估HDF的衰老水平，用荧光素酶报告基因技术检测p53转录调控活性，用Western印迹分析NHDF中AQP3、hnRNPQ及衰老相关蛋白p53、p21的表达水平。两组间比较采用独立样本t检验，多组间比较采用ANOVA检验。结果用UVA连续照射各组NHDF 3 d后，NHDF中p53、p21的表达水平和β半乳糖苷酶阳性细胞百分率明显高于未照射的对照组（P<0.05），但是AQP3的表达水平和照射后第5、6、7天细胞增殖活性明显低于对照组（P<0.05）。在接受UVA连续照射3 d后，AQP3 siRNA组中UVA诱导的NHDF的衰老相关表型较siRNA空载体组明显加重，两组间p53、p21、hnRNPQ的表达水平和β半乳糖苷酶阳性细胞百分率、p53转录调控活性、细胞增殖活性差异均有统计学意义（均P<0.05），进一步沉默hnRNPQ能够逆转上述反应。与siRNA空载体组相比，hnRNPQ siRNA组中UVA诱导的NHDF的衰老相关表型明显减轻，两组间p53、p21表达水平、β半乳糖苷酶阳性细胞百分率、p53转录调控活性和细胞增殖活性差异均有统计学意义（均P<0.05）。在接受UVA连续照射3 d后，cDNA空载体组中p53、p21、hnRNPQ的表达水平、β半乳糖苷酶阳性细胞百分率、p53转录调控活性和细胞增殖活性分别为0.56 ± 0.08、0.70 ± 0.07、0.92 ± 0.03、（81.53 ± 7.62）%、7.16 ± 0.25、（2.15 ± 0.23）× 106/ml，而AQP3 cDNA组中UVA诱导的NHDF的衰老相关表型明显轻于cDNA空载体组，其上述指标分别为0.25 ± 0.06、0.23 ± 0.06、0.82 ± 0.09、（31.23 ± 6.54）%、2.52 ± 0.36、（2.93 ± 0.33）× 106/ml，两组比较，差异均有统计学意义（均P<0.05），进一步过表达hnRNPQ能够逆转上述效应。在接受UVA连续照射3 d后，hnRNPQ cDNA组中p53、p21的表达水平、β半乳糖苷酶阳性细胞百分率、p53转录调控活性和细胞增殖活性分别为1.41 ± 0.09、1.42 ± 0.06、（91.06 ± 4.24）%、12.35 ± 0.88、（1.23 ± 0.41）× 106/ml，与cDNA空载体组相比，hnRNPQ cDNA组中UVA诱导的NHDF的衰老相关表型明显加重，两组比较，上述指标差异均有统计学意义（均P<0.05）。结论AQP3可能通过调控hnRNPQ下调p53的表达来减缓UVA诱导的NHDF衰老。

简介：摘要目的探讨miR-181a-5p靶向羧基末端区域小磷酸化酶样蛋白（carboxy-terminal domainsmall phosphatase-like, CTDSPL）基因介导TGF-β信号通路对胃肠道间质瘤发生发展的影响。方法选择2016年1月至2019年12月于商丘市第一人民医院行手术治疗的胃肠道间质瘤（gastrointestinal stromal tumor，GIST）患者作为研究对象，术中取患者的肿瘤组织和癌旁正常组织。分析患者的临床病理资料；采用定量实时聚合酶联反应（quantitative real-time polymerase chain reaction，qRT-PCR）检测CTDSPL基因mRNA和miR-181a-5p的表达量；采用western blot法检测CTDSPL基因及TGF-β信号通路相关因子的蛋白表达水平。将人胃肠道间质瘤细胞系（GIST-T1）分别转染miR-181a-5p mimic、miR-181a-5p inhibitor和CTDSPL过表达载体。MTT检测各组细胞增殖活力，Transwell检测各组细胞侵袭，流式细胞术检测各组细胞凋亡。结果相对于癌旁组织，GIST患者的肿瘤组织中miR-181a-5p及TGF-β信号通路相关因子表达增强，CTDSPL表达被抑制。肿瘤大小、浸润深度和改良NIH分级与GIST肿瘤组织CTDSPL基因mRNA表达量有关（P均<0.05）。相对于Blank组，敲除miR-181a-5p或过表达CTDSPL能抑制癌细胞增殖活力和侵袭，诱导细胞凋亡，而miR-181a-5p mimic对GIST-T1细胞的作用能被CTDSPL过表达挽救。结论miR-181a-5p可通过下调CTDSPL基因表达水平，激活TGF-β信号通路促进GIST的发生、发展。

简介：摘要目的探讨TRIM52反义RNA1(TRIM52-AS1)对缺氧/复氧(H/R)诱导的大鼠脑皮层神经元损伤的影响及其可能机制。方法(1)将体外培养的大鼠皮层神经元分为对照组和模型组，模型组制备H/R诱导的细胞损伤模型，采用实时定量PCR(RT-qPCR)检测2组神经元TRIM52-AS1、微小RNA(miR)-28-5p的表达。(2)将皮层神经元分为对照组、模型组、TRIM52-AS1小干扰RNA(si-TRIM52-AS1)转染组和无义序列转染组，后2组细胞分别转染si-TRIM52-AS1及其无义对照序列，转染6 h后，制备H/R诱导的细胞损伤模型。采用RT-qPCR、细胞计数试剂盒-8(CCK-8)、流式细胞仪分别检测4组神经元TRIM52-AS1的表达及细胞增殖、凋亡情况；采用酶联免疫吸附实验(ELISA)、Western blotting分别检测培养上清中乳酸脱氢酶(LDH)、细胞中丙二醛(MDA)和超氧化物歧化酶(SOD)含量和Cyclin D1、Bcl-2、Bax蛋白的表达。(3)将皮层神经元分为miR-28-5p转染组和无义序列转染组，分别转染miR-28-5p模拟物及其无义对照序列，转染6 h后，均制备H/R诱导的细胞损伤模型。采用RT-qPCR、CCK-8、流式细胞仪分别检测2组神经元miR-28-5p的表达及细胞增殖、凋亡情况；采用ELISA及Western blotting分别检测培养上清中LDH、细胞中MDA、SOD含量和Cyclin D1、Bcl-2、Bax蛋白的表达。(4)将皮层神经元分别分为野生型TRIM52-AS1+miR-28-5p模拟物转染组、野生型TRIM52-AS1+miR-28-5p无义对照序列转染组和突变型TRIM52-AS1+miR-28-5p模拟物转染组、突变型TRIM52-AS1+miR-28-5p无义对照序列转染组。转染6 h后换新鲜培养液继续培养12 h后，采用双荧光素酶报告基因实验检测各组细胞的荧光素酶活性。(5)将皮层神经元分为无义序列转染组、miR-28-5p抑制物转染组、无义序列+si-TRIM52-AS1转染组、miR-28-5p抑制物+si-TRIM52-AS1转染组，分别转染miR-28-5p抑制物无义对照序列、miR-28-5p抑制物、miR-28-5p抑制物无义对照序列+si-TRIM52-AS1、miR-28-5p抑制物+si-TRIM52-AS1，转染6 h后，制备H/R诱导的细胞损伤模型。采用RT-qPCR、CCK-8、流式细胞仪分别检测4组神经元miR-28-5p的表达及细胞增殖、凋亡情况；采用ELISA及Western blotting分别检测培养上清中LDH、细胞中MDA、SOD含量和Cyclin D1、Bcl-2、Bax蛋白的表达。结果(1)与对照组比较，模型组神经元TRIM52-AS1的表达升高，miR-28-5p的表达降低，差异均有统计学意义(P<0.05)。(2)与对照组比较，模型组和无义序列转染组神经元培养上清中LDH含量升高，细胞中MDA、SOD含量降低，细胞A值和Cyclin D1、Bcl-2蛋白的表达降低，凋亡率和Bax蛋白的表达升高。与模型组和无义序列转染组比较，si-TRIM52-AS1转染组神经元TRIM52-AS1的表达降低，培养上清中LDH含量和细胞中MDA含量降低，SOD含量升高，细胞A值和Cyclin D1、Bcl-2蛋白的表达升高，凋亡率和Bax蛋白的表达降低，差异均有统计学意义(P<0.05)。(3)与无义序列转染组比较，miR-28-5p转染组神经元miR-28-5p的表达增高，培养上清中LDH含量和细胞中MDA含量降低，SOD含量升高，细胞A值及Cyclin D1、Bcl-2蛋白的表达升高，凋亡率及Bax蛋白的表达降低，差异均有统计学意义(P<0.05)。(4)野生型TRIM52-AS1+miR-28-5p模拟物转染组细胞的荧光素酶活性显著低于野生型TRIM52-AS1+miR-28-5p无义对照序列转染组(0.43±0.04 vs. 1.00±0.09)，差异有统计学意义(P<0.05)。(5)与无义序列转染组比较，miR-28-5p抑制物转染组细胞miR-28-5p的表达明显降低，培养上清中LDH和细胞中MDA含量升高，SOD含量降低，细胞A值及Cyclin D1、Bcl-2蛋白的表达降低，凋亡率及Bax蛋白的表达升高。与无义序列+si-TRIM52-AS1转染组比较，miR-28-5p抑制物+si-TRIM52-AS1转染组神经元中miR-28-5p的表达明显降低，培养上清中LDH含量和细胞中MDA含量明显升高，SOD含量降低，A值及Cyclin D1、Bcl-2蛋白的表达降低，凋亡率及Bax蛋白的表达升高，差异均有统计学意义(P<0.05)。结论下调TRIM52-AS1可能通过靶向负调控miR-28-5p的表达抑制H/R诱导的大鼠脑皮层神经元的氧化应激和凋亡，从而减轻神经元的损伤。

简介：摘要目的探讨动态对比增强磁共振成像(dynamic contrast-enhanced MRI，DCE-MRI)纹理分析在术前预测直肠癌患者P53表达状态的价值。材料与方法回顾性收集行DCE-MRI扫描且有P53免疫组化检测结果的原发直肠癌患者91例(P53高表达组50例、低表达组41例)。由GenIQ后处理软件获取Ktrans、Kep、Ve后处理图像并导入ITK-SNAP软件，由两位观察者分别使用AK软件提取12个纹理特征参数，采用组内相关系数ICC对数据的一致性进行检验，采用独立样本t检验或Mann-Whitney U检验比较两组纹理参数，应用ROC曲线分析纹理参数的鉴别效能，应用Logistics回归分析联合纹理特征参数进行效能分析，通过Delong检验比较各单一参数模型及联合模型与各单一参数模型AUC间的差异。结果P53高表达组纹理参数Cluster ProminenceKtrans (23.00±50.84)×106、CorrelationKtrans (1.49±1.42)×10-2、InertiaKep (13.52±22.31)×104值均大于低表达组Cluster ProminenceKtrans (4.89±5.92)×106、CorrelationKtrans (0.16±0.17)×10-2、InertiaKep (50.52±61.27)×103，差异均具有统计学意义(P＜0.05)，AUC值分别为 0.712、0.838、0.638。P53两组间有差异的纹理参数联合诊断效能更高，AUC为0.914，敏感度为80%，特异度为95%。经Delong检验，P53两组间有组间差异纹理参数联合模型的AUC大于单一参数模型，差异有统计学意义(P＜0.05)。结论纹理特征参数Cluster Prominence、Correlation、Inertia能有效预测直肠癌P53表达状态，纹理分析特征参数的联合分析可获得更高的鉴别诊断效能。

简介：摘要探讨CRNDE对白细胞介素1β（IL-1β）诱导的软骨增殖、凋亡和炎性因子表达的影响及可能机制。研究发现，与对照组比较，骨关节炎组患者软骨组织中CRNDE表达升高，而miR-212-5p表达降低。下调CRNDE可靶向负调控miR-212-5p提高IL-1β诱导的软骨细胞增殖，并降低细胞凋亡和炎性因子表达，CRNDE/miR-212-5p轴可能为骨关节炎的治疗提供了新靶点。

简介：摘要目的探讨微小RNA-642a-5p(miR-642a-5p)对结肠癌细胞株SW620细胞迁移和侵袭的影响及分子机制。方法将人结肠癌细胞SW620细胞分成4个组：对照组(OE-NC+mimic-NC组：共转染miR-642a-5p mimics阴性对照与空载体)；过表达miR-642a-5p组(OE-NC+mimic-miR-642a-5p组：共转染miR-642a-5p mimics与空载体)；过表达miR-642a-5p与Ⅰ型胶原α1(COL1A1)组(OE-COL1A1+mimic-miR-642a-5p组：共转染miR-642a-5p mimics与COL1A1过表达载体)；过表达COL1A1组(OE-COL1A1+mimic-NC组：共转染miR-642a-5p mimics阴性对照与COL1A1过表达载体)。反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测各组细胞内miR-642a-5p及COL1A1的表达；划痕实验、Transwell小室实验检测细胞迁移和侵袭能力；蛋白质印迹法(Western blot)实验检测细胞内COL1A1蛋白表达。两组间比较采用独立样本t检验。结果RT-PCR结果显示应用miR-642a-5p mimics转染细胞后，miR-642a-5p表达水平显著增加；双荧光素酶报告基因实验结果miR-642a-5p直接靶向作用于COL1A1。应用(COL1A1 overexpression，OE-COL1A1)转染后，细胞COL1A1表达水平明显增加。而OE-NC + mimic-miR-642a-5p组和OE-COL1A1 + mimic-miR-642a-5p组的RNA相对表达量(18.62±2.31)，(2.52±0.44)明显高于OE-NC+mimic-NC组(0.52±0.11)，差异有统计学意义(t＝36.120、6.125，P<0.05)，且OE-COL1A1 + mimic-miR-642a-5p组的COL1A1相对表达量(5.88±1.06)明显高于OE-NC+mimic-miR-642a-5p组(0.22±0.04)，差异有统计学意义(t＝10.201，P<0.05)。与OE-NC + mimic-NC组比较，miR-642a-5p的过表达显著抑制了细胞的迁移和侵袭能力，而过表达COL1A1显著促进SW620细胞的迁移和侵袭能力，并部分逆转miR-642a-5p对细胞迁移和侵袭的抑制作用。结论miR-642a-5p可通过调节COL1A1的表达水平来抑制结肠癌细胞的迁移与侵袭。

简介：摘要目的明确1例以热性惊厥为主要症状的女性患儿的遗传学病因。方法应用全外显子测序技术和全基因组拷贝数变异测序技术(copy number variation sequencing, CNV-Seq)对患儿进行分子学检测，并对微缺失区域进行家系荧光定量PCR验证。结果患儿的全外显子测序未发现与热性惊厥相关的致病性变异；CNV-seq检测结果显示患儿16号染色体短臂1.5 Mb的杂合性缺失(chr16: 14 982 579-16 524 069×1)，该区域包含16个蛋白编码基因；荧光定量PCR检测结果提示患儿及父亲在ABCC6、MYH11及NDE1基因上存在杂合缺失，提示该缺失来源于父亲。结论16p13.11微缺失综合征临床多样性较强，除已报道与癫痫、智力障碍、多发畸形、自闭症等症状有关外，部分患者可仅表现为热性惊厥。本例患儿检测到16p13.11微缺失，提示该区域或区域内的部分基因可能与热性惊厥有关，该区域拷贝数变异可能为该患儿的遗传学病因。