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  • 简介:目的:构建大鼠CB1(rCB1)基因真核表达载体,检测rCB1基因在细胞表达,研究rCB1对人宫颈癌CaSki细胞凋亡影响。方法从大鼠脑组织中提取总RNA,RT-PCR扩增rCB1基因,通过酶切、纯化、连接PCR纯化产物与pCDNA3.1(+)质粒,构建pcDNA3.1(+)-rCB1。脂质体法将其转染HEK293和CaSki细胞,Westernblot及细胞免疫荧光联合激光扫描共聚焦方法检测rCB1表达及定位,流式细胞仪检测细胞凋亡率,Westernblot与实时荧光定量PCR检测rCB1、Bcl-2、Bax、Bad表达。结果酶切重组质粒获得5300bp载体片段和1500bp目的片段,测序结果和rCB1基因序列(NM_012784.4)一致。转染HEK293细胞后,rCB1HEK293细胞细胞膜和细胞质表达。转染CaSki细胞后,rCB1使细胞凋亡率增加(P<0.05);rCB1基因上调Bax、Bad表达,同时抑制Bcl-2表达,与空白组比较,其差异具有显著(P<0.05)。结论成功构建了pcDNA3.1(+)-rCB1真核表达载体,rCB1表达于细胞膜和细胞质,rCB1可以明显促进宫颈癌CaSki细胞凋亡,其机制是上调Bax、Bad和抑制Bcl-2表达。

  • 标签: CB1基因 HEK293细胞 CASKI细胞 细胞凋亡 rCB1
  • 简介:目的:观察巨噬细胞移动抑制因子(MIF)和C-Jun氨基端激酶(JNK)糖代谢异常大鼠肝脏组织中表达水平变化,探讨糖代谢异常合并非酒精脂肪肝(NAFLD)病理机制。方法60只大鼠随机分为糖耐量受损(IGT)模型组(n=20)、2型糖尿病(T2DM)模型组(n=20)、IGT对照组(n=10)及T2DM对照组(n=10),高脂饲料喂养复制IGT大鼠模型,高脂饲料喂养加腹腔注射小剂量链脲佐菌素(STZ)制备T2DM大鼠模型,采用TUNEL法检测各组大鼠肝脏细胞凋亡;实时荧光PCR技术检测肝脏组织MIFmRNA表达;Westernblot方法检测肝脏组织MIF、caspase-3、JNK蛋白表达及磷酸化JNK(p-JNK)表达。结果IGT大鼠及T2DM大鼠肝组织凋亡细胞明显增多;IGT组和T2DM组肝组织MIF基因表达较各自对照组明升高(P<0.01),MIF、caspase-3、JNK蛋白表达及JNK磷酸化水平也明显升高(P<0.05或P<0.01);与IGT组相比,T2DM组caspase-3、MIF、JNK蛋白表达水平明显降低(P<0.01),而JNK磷酸化水平是明显升高(P<0.01)。结论糖代谢异常合并非酒精脂肪肝发生可能与MIF、caspase-3、JNK表达水平升高及JNK磷酸化水平增强有关。

  • 标签: 巨噬细胞移动抑制因子 C-JUN氨基端激酶 Caspase-3 糖耐量受损 2型糖尿病
  • 简介:目的探索大气污染对动物致病机制,对BALB/c小鼠采用无创性气管滴注PM2.5颗粒悬浮液方法,构建大气污染致炎动物模型。方法150只SPF级BALB/c小鼠随机分成空白对照组、生理盐水组、PM2.5低度组(2.5mg/kg)、PM2.5度组(5mg/kg)和PM2.5高度组(10mg/kg)共5组,各剂量组气管滴注第3天,第7天、第21天、第35天、第49天,气管滴注操作完成后24h采取组织样本,采用ELISA、肺组织病理HE染色方法,来验证无创性气管滴注方法可行和致炎模型构建成功与否。结果本建模方法,成功率高达96%。采用气管滴注法,建模小鼠肺组织炎症评分与气道滴注时间延长和剂量呈正相关。PM2.5暴露后,肺内有大量淋巴细胞聚集及吞噬颗粒巨噬细胞浸润,肺泡间隔增宽。各暴露组分别与生理盐水对照组、空白组比较,肺泡灌洗液炎症因子IL-6、肺组织匀浆TNF-α水平增高,高剂量组差异最显著。结论本实验用气管滴注法建立小鼠致炎模型成功,并证明此方法简单、可靠,可广泛用于小鼠呼吸系统重复滴注,有利于进一步研究大气污染及其他致炎机制。

  • 标签: PM2.5 大气污染 气管滴注 模型 小鼠
  • 简介:目的为了寻求一种新小口径血管代用品,建立异种移植动物实验模型,以观察异种移植物安全、可靠、通畅及组织学改变。方法共采用17只杂种雌性犬,实验组10只,植入经环氧化物处理猪血管移植物;对照组7只,植入人造血管。手术方法为右侧股动静脉瘘。术后通过超声和血管造影方法来观察移植血管通畅并在术后3月移植物取出,进行病理学检查,观察移植前后移植物组织学改变。结果术后第一周、二周行Doppler超声检查结果,两组动静脉瘘通畅,2周血管通畅率为100%。术后3个月动脉造影检查后,生物血管组(PG)通畅5只,通畅率62.5%,e-PTFE组通畅4只,通畅率66.7%。两组数据统计学处理,差异无显著(P〉0.05)。术后3月对移植物取材,进行光镜及扫描电镜病理学检查,通畅生物血管吻合口无狭窄,吻合部位有新内膜覆盖,周围组织无钙化,有新生内皮细胞覆盖。结论经环氧化物处理血管移植物(PG)生物血管作为异种移植物,生物相容好,具有一定可行

  • 标签: 异种移植 生物血管材料 小口径 病理学
  • 简介:目的探讨半夏总生物碱(totalalkaloidsfromPinelliaTernate,TAPT)对帕金森病模型大鼠防治作用及其抗氧化机制。方法采用脑内定位注射6-羟基多巴胺(6-OHDA)建立帕金森病大鼠模型,模型建立成功同时给予半夏总生物碱预防治疗。采用Morris水迷宫进行帕金森病大鼠行为学检测,用化学比色法检测大脑皮质及血清超氧化物歧化酶(SOD)活力、丙二醛(MDA)、过氧化氢(H2O2)和还原型谷胱甘肽(GSH)含量。结果与正常组比较,帕金森病模型组大鼠逃避潜伏期明显延长(P〈0.01),跨越平台次数明显减少(P〈0.01);经半夏总生物碱治疗组,大鼠逃避潜伏期明显缩短(P〈0.05,P〈0.01),跨越平台次数明显增加(P〈0.01)。帕金森病模型组大鼠脑皮质及血清MDA、H2O2含量增加,SOD活性及GSH含量降低(P〈0.01);经半夏总生物碱治疗组,脑皮质MDA、H2O2含量显著减少(P〈0.01),皮质GSH、SOD含量显著增加(P〈0.01);半夏总生物碱给药组中低浓度组、浓度组血清MDA含量无统计学意义(P〉0.05),高浓度组血清MDA含量下降(P〈0.01),各治疗组血清H2O2含量明显下降(P〈0.01),血清GSH含量显著增加(P〈0.01)。结论半夏总生物碱具有改善学习记忆能力,对抗大鼠神经系统退行变有一定作用,可能通过改变帕金森病模型大鼠皮质部分及血清SOD、GSH含量,而抑制了MDA和H2O2产生。

  • 标签: 半夏总生物碱 6-羟基多巴胺 MORRIS水迷宫 大鼠 还原型谷胱甘肽
  • 简介:目的初步研究巴尔通体恒河猴体内存在情况,并分析其柠檬酸合成酶(gltA)基因序列,判断巴尔通体种属。方法16只来自福建恒河猴,用血琼脂培养基分离可能存在巴尔通体。根据NCBI数据库上巴尔通体gltA基因序列,设计一对引物,以巴尔通体菌落为模板进行扩增,获得序列进行克隆测序。结果从3只恒河猴体内成功分离到了巴尔通体病原,并获得了巴尔通体gltA全长基因序列,测序结果表明该序列与五日热巴尔通体同源99%。结论福建来源恒河猴种群携带巴尔通体病原,巴尔通体流行地区可能存在鼠与灵长类动物之间病原体流行和传播。

  • 标签: 五日热巴尔通体 柠檬酸合成酶 恒河猴 序列分析
  • 简介:目的老年大鼠、基底前脑损伤大鼠及注射东莨菪碱大鼠常作为老年痴呆动物模型,本研究对这三种模型行为表现进行比较研究。方法采用水迷宫及旷场分析法对这三种模型及青年对照和假手术对照进行了研究。结果老年大鼠、基底前脑损伤大鼠和注射东莨菪碱大鼠学习记忆能力显著减弱,老年大鼠对新环境紧张程度增强;基底前脑损伤大鼠和注射东莨菪碱大鼠空间认知能力显著下降;注射东莨菪碱大鼠兴奋异常增强,(P<0.05)。结论基底前脑损伤动物行为表现最符合老年痴呆患者早期临床症状。

  • 标签: 基底前脑 东莨菪碱 脑损伤 注射 老年大鼠 老年痴呆
  • 简介:目的根据解剖学和血流动力学原理建立新型大鼠全脑缺血/再灌注模型。方法夹闭大鼠双侧颈总动脉,同时经右颈外动脉持续抽吸颈总动脉血液,造成大鼠全脑缺血,抽出血液从左股静脉回输;停止抽吸血液,去除微动脉夹,开始再灌注。应用脑电图、光镜和电镜等评定脑缺血效果。结果实验组大鼠脑电图、光镜和电镜检查显示明显缺血改变。结论本模型具有全脑缺血效果可靠、再灌注充分、制备简便、成功率高并可经颈动脉注入药物等优点,适用于全脑缺血/再灌注损伤及其干预措施实验研究。

  • 标签: 全脑缺血 大鼠 再灌注模型 颈动脉 血液 颈总动脉
  • 简介:目的进一步探讨客观评价大鼠心肌缺血模型指标.方法观察皮下注射10mg/kg异丙肾上腺素(ISO)造成SD大鼠心肌缺血性损伤模型后心电图变化、检测血清肌酸激酶(CK)、乳酸脱氢酶(LDH)、游离脂肪酸(FFA)以及心肌组织坏死面积、超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)含量变化.结果腹腔注射ISO后30s,大鼠心电图J点开始降低,2min后缓慢回升,但20min后仍未回复原来水平,而且20min各时间点与给药前比较,模型对照组大鼠J点与生理盐水对照组比较,差异有显著(P<0.05);T波则在注射异丙肾上腺素30s后开始下降,10min两组T波一直保持显著差异(P<0.05),而且注射异丙肾上腺素后30s(P<0.01)以及5min(P<0.05)与给药前比较,T波均有显著差异;模型对照组大鼠血清CK、LDH、FFA以及心肌组织MDA浓度显著高于生理盐水对照组,心肌坏死面积与这些指标呈正相关关系,心肌组织SOD浓度显著低于生理盐水对照组.结论J点可以作为评价此种动物模型主要指标,T波可以作为辅助指标,应重点观察20min内心电图变化;可以选择CK、LDH、FFA、SOD、MDA等生化指标以及心肌坏死面积等来探讨抗心肌缺血药物作用机理.

  • 标签: 心肌缺血 超氧化物歧化酶(SOD) 异丙肾上腺素 丙二醛(MDA) 素性 心肌组织
  • 简介:目的探索BALB/c和C57BL/6两个品系在有关实验不同作用。方法选取了结合随机测序与生物信息学分析设计合成神经系统表达一些基因反义核酸(antisense)2个,用Hamilton微量注射器将其分别定量注射到BALB/c和C57BL/6小鼠侧脑室,并分别设注射生理盐水和随机序列核酸(Scramble)对照组。每一反义核酸实验组和对照组各注射10只小鼠,之后观察实验组与对照组不同行为学实验差异。小鼠行为学检测模型为:考察日常代谢能力摄食量,考察Locomotionactivity(移动)旷场行为,考察疼痛阈值甩尾试验和考察记忆能力步下法实验。结果注射No.1基因反义核酸后,两品系实验组均在测试记忆力步下法(Step-downTest)试验中表现出记忆力减弱,且与对照组差异明显,说明No.1基因功能确与记忆相关。注射No.2基因反义核酸后,测试移动能力旷场行为(OpenFieldBehavior)试验,BALB/c实验组跨格、直立行为比对照组明显减少,说明受此反义核酸影响显著,而C57BL/6实验组则与对照组无大差异。此外,在生理盐水对照组和随机序列核酸对照组实验以及其他行为学模型实验,两品系也存在着一定差异。结论用遗传背景不同多品系进行相关实验,可进一步建立新基因功能初筛中有显著结果基因复筛平台;同时,实验结果对于进一步研究什么样品系适用于什么样实验具有较大意义。

  • 标签: 对照组 反义核酸 注射 行为学 实验 C57BL/6小鼠
  • 简介:目的探讨HCMv感染是否引起大鼠和家兔睾丸、卵巢组织损伤。方法人巨细胞病毒ADl69毒株经静脉接种50只人鼠平和130只新四兰兔,30d后以原他杂交和免疫组化力方法检验病毒感染动物组织证据,以组织病理学方法检查动物睾丸、卵巢组织病理变化。结果接种病毒之动物睾丸、卵巢组织町查到痫毒抗原或基因,睾丸组织多见牛精细胞变性、坏死,精细胞减少甚至消失。结论HCMV感染可以导致动物睾丸组织生精细胞损伤和牛精功能下降。

  • 标签: HCMV感染 卵巢组织 睾丸组织 损伤 经静脉 人巨细胞病毒
  • 简介:目的本实验通过对小鼠卵巢组织进行冻存研究,掌握卵巢低温生物学特性,摸索出一种简便有效组织器官冻存法,为卵巢移植及器官冷冻提供有用技术方法。方法通过对小鼠卵巢组织进行慢速程序法与快速液氮蒸汽法冻存,比较分析了不同方法所需保护剂种类、浓度、渗透平衡时间。采用对解冻后卵巢组织超微结构观察、组织化学染色、微素测定及自体、异体移植后动情期恢复作为评价指标。结果与结论通过上述实验表明用同种冷冻保护剂,液氮蒸汽法冻存卵巢组织超微结构保存良好,组织化学染色示其活性与程序法冻存组织相同,自体、异体移植后,小鼠动情周期恢复率及血清雌二醇水平各项指标均与慢速程序法冷冻无显著差异。

  • 标签: 小鼠 卵巢组织 超速冻存法 液氮蒸汽法 程序法
  • 简介:目的了解和掌握引入西藏高原家兔生理生化指标,以便为实践教学、临床诊疗和科学研究提供参数。方法采用朗道全自动生化分析仪对引入西藏高原20年加利福尼亚兔(Californianrabbit)和中国白兔(Chinesewhiterabbit)12项血清生化指标进行了测定。结果加利福尼亚兔品种比较发现TP、ALB、A/G、CRE、CHOL、LDH指标表现极强雄兔特征(P〈0.01),而ALT、GLU测定值雌兔明显高于雄兔(P〈0.05);中国白兔品种比较发现CRE、LDH指标显示差异有显著(P〈0.01),CRE指标是雄兔高于雌兔,LDH参数是雌兔高于雄兔。加利福尼亚雄兔与中国白雄兔参数比较中发现AST、TP、ALB、GLO、A/G、GLU、CRE、LDH指标显示差异有显著(P〈0.01),而TG、BUN指标显示差异有显著(P〈0.05);加尼福利亚母兔与中国白母兔参数比较中发现ALT、GLO、CRE、TG指标显示差异有显著(P〈0.05),AST、TP、BUN、LDH指标显示差异有显著(P〈0.01)。结论实验结果将为西藏高原教学、临床诊疗和科学研究提供生理数据参考。

  • 标签: 加利福尼亚兔 中国白兔 生化指标
  • 简介:目的:比较不同移植部位对睾丸移植效果影响,以探索建立疾病模型小鼠安全保存新方法。方法按移植部位不同分为3组:背部皮下组,睾丸白膜组和肾包膜组。移植后处死受体鼠回收移植物。测试和分析受体精囊重量,移植物存活率,回收物增重倍数和生殖细胞分化情况。结果不同实验组移植睾丸生殖细胞分化差异显著。睾丸白膜分化情况最好与假移植对照组相似;背部皮下移植组睾丸分化率为29.2%;肾包膜组未见分化。结论睾丸白膜移植最利于精子发生;背部皮下移植是睾丸移植次优选择;肾包膜睾丸移植不适合用于小鼠雄性生殖器官安全保存。

  • 标签: 小鼠 睾丸移植 移植部位 生殖细胞分化
  • 简介:参照人T细胞分离方法用于猪T细胞分离,经二次绵羊红细胞分离T细胞,用PHA从功能上鉴定获得纯度很高T细胞,能进一步用于有关T细胞方面研究。

  • 标签: T细胞 绵羊红细胞 分离方法 鉴定 PHA 研究
  • 简介:目的观察体重增减影响血糖水平变化规律特点。方法8周龄雄性C57BL/6小鼠高热量饲料(脂肪热量占60%)喂养8周呈肥胖模型,随机分入体重干预组(interventiongroup,IT)和肥胖组(obesitygroup,OB),肥胖组维持高热量饲料至终点。正常对照组(controlgroup,CON)喂食普通饲料。限制热量摄入使IT组体重先减至CON组水平(P>0.05),后恢复高热量饲料再次诱导体重反弹至OB组水平(P>0.05)时终止。采用腹腔注射葡萄糖耐量试验反映葡萄糖代谢水平,胰岛素耐受试验评价胰岛素敏感性。胰腺病理HE染色观察胰岛形态学改变。结果IT组体重反弹时体重增速是干预前2.27倍,空腹血糖则高达5.13倍。与OB组相比,实验终点葡萄糖耐量试验血糖曲线下面积显著增加(P<0.05),胰岛素敏感性显著下降(P<0.05),内脏脂肪增加(P<0.05),胰岛面积显著减小(P<0.05)。结论体重波动导致内脏脂肪量增加、胰岛素敏感性降低和葡萄糖耐量受损。

  • 标签: 肥胖 减重 血糖 胰岛素敏感性
  • 简介:目的:观察安神补脑液长期灌胃给药对大鼠所产生毒性反应及严重程度,提供毒副反应靶器官及其损害可逆程度,确定无毒反应剂量,以评价安神补脑液长期用药安全,为拟定临床试验剂量及观察指标提供参考。方法Wistar大鼠随机分为安神补脑液低、、高剂量组(2.5、5、10mL/kg)和溶剂对照组(灌服同容积蒸馏水2mL/100g),每组60只,雌雄各半,每天给药1次,每周给药6d,连续26周。观察大鼠外观行为、体重、摄食量,并分别于给药第13、26周末及四周恢复期结束进行血液学及血液生化学等各项指标检测及脏器系数、病理组织学检查。结果长期连续灌胃给予安神补脑液,对动物一般状态、行为活动和外观体征无明显不良影响;各剂量组摄食量、体重、血液学及血液生化学指标与对照组比较无明显差别;给药3个月、6个月对动物各脏器组织位置、重量和脏器系数无不良影响,但部分脏器重量有所增加,各组动物脏器系数正常范围;病理结果显示对照组和安神补脑液高剂量组动物未见明显与给药相关异常病理改变和毒性改变,恢复期停药后未见延迟毒性,因此,、低剂量组动物各脏器组织无需进行组织病理形态学检查。结论安神补脑液长期用药对大鼠未见明确毒性反应,停药后亦无延迟毒性反应,预期拟定临床用药量为安全剂量。

  • 标签: 安神补脑液 长期毒性 大鼠
  • 简介:目的研究链脲菌素(STZ)处理新生期大鼠后诱发成年发病糖尿病量效关系及其胸腺淋巴细胞增殖活性变化.方法STZ分别以20、40、60及100mg/kg,ip,给予Wistar新生期大鼠,于注射STZ后第3天、第7天、第17天、第42天观察体重、血糖、血浆胰岛素及胸腺淋巴细胞增殖反应动态变化.结果100mg/kg剂量组可于第42天形成慢性糖尿病模型,血糖值(16.8±4.6)mmol/Lvs(5.8±1.6)mmol/L,P<0.001;血浆胰岛素水平(5.2±1.2)mIU/Lvs(8.4±1.6)mIU/L,P<0.01),胸腺淋巴细胞增殖呈现升高、受抑制再恢复变化过程.其他各剂量组,特别是40mg/kg虽无明显高血糖形成,但可使胸腺淋巴细胞增殖活性增强.结论STZ(100mg/kg,ip)处理新生期大鼠诱发糖尿病最适剂量为100mg/kg,诱发时间为42d.诱发过程伴有胸腺增殖活性变化.

  • 标签: 链脲菌素 大鼠 糖尿病 实验性 胸腺 淋巴细胞增多
  • 简介:随着人类生活方式和饮食结构改变,高尿酸血症和腹型肥胖发病率逐年升高,且临床研究发现高尿酸血症与腹型肥胖经常在同一个体上出现,两者密切相关。研究发现高尿酸血症并腹型肥胖已成为常见代谢性疾病,是心脑血管疾病危险因子。高尿酸血症并腹型肥胖模型研究,对于阐释高尿酸血症并腹型肥胖病理及药理机制十分重要。本文就高尿酸血症并腹型肥胖动物模型研究进展进行综述。

  • 标签: 高尿酸血症 腹型肥胖 动物模型