简介：摘要目的分析毒死蜱对大鼠海马神经元自噬相关蛋白表达的影响，探讨自噬在急性毒死蜱中毒中枢神经损伤中的作用。方法于2018年10月，将35只雄性清洁级SD大鼠根据观察时间点随机分成7组，即0.5 d、1 d、2 d、3 d、5 d、7 d组和对照组，每组5只。各观察组采用81.5 mg/kg毒死蜱一次性灌胃处理，对照组给予橄榄油灌胃。连续观察大鼠一般情况和中毒症状，蛋白质免疫印迹（Western blot）法检测海马组织中自噬相关蛋白Beclin1、P62/SQSTM1、LC3的表达，免疫组织化学染色观察脑组织细胞形态和LC3表达。结果Western blot结果显示，与对照组比较，1 d、2 d、3 d组大鼠海马神经元Beclin1蛋白表达升高，0.5 d、1 d、2 d组P62/SQSTM1蛋白表达降低，2 d组大鼠海马神经元LC3蛋白表达升高，差异均有统计学意义（P<0.05）。免疫组织化学结果显示，5 d组大鼠海马神经元排列紊乱，部分细胞核轮廓消失，7 d组尤其明显，LC3蛋白呈胞质表达，表达量逐渐增高，第2天达高峰。结论急性毒死蜱中毒大鼠自噬的早期激活可能参与了毒死蜱诱导的海马神经元损伤。

简介：摘要腹膜透析作为一种重要的肾脏替代疗法，较血液透析有诸多优势。但长期的腹膜透析会导致腹膜进行性纤维化，造成超滤功能衰竭，导致患者退出腹膜透析治疗。细胞自噬是细胞的一种防御性机制，但自噬的抑制和过度激活都会在腹膜纤维化的发生发展中发挥不利作用。本文系统性回顾了近年来细胞自噬在腹膜透析相关性腹膜纤维化领域的相关研究，旨在综述其机制，为腹膜纤维化的防治提供潜在的新靶点。

简介：摘要目的研究饥饿条件下不同浓度硝酸盐对脑胶质瘤C6和U87细胞生物活性的影响以及自噬相关蛋白的变化。方法将C6和U87细胞分为对照组和饥饿组，对照组给予常规培养基培养，饥饿组给予等体积的Hank′s平衡盐溶液培养。两组细胞分别应用0 mmol/L、0.05 mmol/L、0.20 mmol/L和0.50 mmol/L的硝酸盐处理12 h和24 h，然后采用噻唑蓝比色法检测各组细胞的增殖情况；流式细胞术检测各组细胞的凋亡水平；实时荧光定量PCR实验检测各组p62的表达水平；蛋白质免疫印迹实验检测自噬相关蛋白p62、微管相关蛋白1轻链3(LC3)Ⅱ/Ⅰ及硝酸盐转运蛋白(SLC17A5)的表达水平。结果与对照组相比，饥饿状态引起C6和U87细胞的增殖能力下降，C6细胞培养12 h和24 h后分别下降了(63.60±2.40)%和(77.10±2.70)%；U87细胞分别下降了(65.60±2.70)%和(86.80±3.20)%(均P<0.01)；给予0.20 mmol/L和0.50 mmol/L的硝酸盐处理后，饥饿组C6和U87细胞的增殖能力与0 mmol/L组比较均明显下降(均P<0.05)，而0.05 mmol/L的硝酸盐浓度对各组细胞的增殖能力均无明显影响(均P>0.05)。流式细胞术检测显示，C6细胞对照组给予0.20 mmol/L和0.50 mmol/L硝酸盐后，各组膜联蛋白Ⅴ和碘化丙啶的阳性细胞数比较差异均无统计学意义(均P>0.05)；饥饿12 h后，0 mmol/L组膜联蛋白Ⅴ和碘化丙啶的阳性细胞所占比率分别为(13.50±0.71)%和(7.80±0.34)%；0.20 mmol/L组分别为(17.30±0.82)%和(10.30±0.42)%；0.50 mmol/L组分别为(19.40±0.75)%和(12.60±0.75)%，组间比较差异均有统计学意义(均P<0.05)。U87各组细胞的凋亡水平也呈现相同的变化趋势。实时荧光定量PCR实验显示，对照组给予不同浓度的硝酸盐不影响C6和U87细胞p62 mRNA的表达水平(均P>0.05)；而饥饿组给予不同浓度的硝酸盐后C6和U87细胞p62 mRNA的表达水平均明显上调(均P<0.05)。蛋白质免疫印迹实验显示，饥饿组给予不同浓度的硝酸盐后LC3Ⅱ/Ⅰ的比值明显下调，而p62和SLC17A5的表达水平明显上调(均P<0.05)。结论硝酸盐可抑制饥饿状态下胶质瘤细胞的增殖能力和细胞内的自噬水平，从而诱导细胞发生凋亡。

简介：摘要糖尿病心肌病(DCM)是一种严重的糖尿病心血管病并发症。线粒体功能异常是DCM的重要病理基础。DCM易合并线粒体自噬异常，明确二者的相关性对寻找DCM的新靶点有一定的指导意义。线粒体自噬包括自噬起始和降解两个过程，可选择性地清除受损线粒体从而实现对糖尿病心肌内环境稳态和代谢平衡的调节，因此有必要了解线粒体自噬在DCM病理机制中的作用、糖尿病对心肌细胞线粒体自噬的影响及其相关分子机制。

简介：摘要自噬是用于降解细胞质组分的高度保守的细胞内分解代谢过程，近年来，因其在急慢性肾脏病发病机制及靶向治疗方面的重要性而备受关注。在生理和病理条件下，自噬在维持肾脏稳态中的作用至关重要，利用各种肾脏细胞组织特异性的条件性自噬相关基因敲除的研究逐步揭示了自噬在肾脏疾病中扮演的角色。最近的研究发现，自噬缺陷在肾脏不同病理状态下可能发挥关键作用，激活自噬在肾小球和肾小管间质中均表现出细胞保护功能，表明自噬的上调可能成为一种有潜力的治疗策略。然而，也有相反的证据表明自噬可能是有害的，这对研发针对上调自噬的治疗策略提出了巨大的挑战。

简介：摘要椎间盘退变是导致椎间盘源性腰痛和突出的主要原因。自噬是一种重要的细胞内降解过程，细胞内容物被自噬体吞噬，然后交付溶酶体降解，从而维持细胞内环境的稳定。目前的研究认为自噬在椎间盘退变中起着双重作用，即如果损伤或细胞应激得到纠正，自噬的激活可导致细胞存活，而如果损伤或细胞应激过强，则可能导致自噬由保护性向破坏性的转变。同时，新出现的证据表明自噬过程受到内源性因子非编码RNAs的调控，自噬、非编码RNAs和两者之间的串扰在椎间盘退变中发挥重要作用。基于此，本文回顾了非编码RNAs通过调节自噬参与椎间盘退变过程中细胞增殖和凋亡，细胞外基质合成和降解，以及各种细胞应激反应的最新研究进展，以此分析自噬相关非编码RNAs在椎间盘退变中的作用，希望对开发新的椎间盘退变治疗策略有所启发。

简介：摘要目的探讨卵巢癌（ovarian cancer，OC）中环状RNA circ_0020123表达水平，进而评估circ_0020123水平对卵巢癌的诊断价值。方法收集2016年10月至2017年3月在杭州市临平区妇幼保健院进行诊治的卵巢癌患者55例，收集血清进行高通量基因表达测序分析。采用实时荧光定量PCR技术测定卵巢癌患者和健康对照组血清中circ_0020123水平，通过绘制受试者工作特征曲线（receiver operating characteristic curve，ROC），评估circ_0020123水平对卵巢癌的诊断效能。通过t检验探讨circ_0020123表达与卵巢癌患者临床特征的相关性。绘制生存曲线分析卵巢癌患者血清circ_0020123水平与预后生存的关系。Western blot检测自噬相关蛋白LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ、p62表达水平。结果与健康人血清（1.00±0.25）相比，circ_0020123在卵巢癌患者血清（1.24±0.23）中表达明显上调（t=5.23，P<0.001）。ROC曲线显示circ_0020123对卵巢癌标本的检测具有较高的诊断性能（AUC=0.757 9，P<0.001）。t检验与logistics综合分析显示circ_0020123高表达明显与FIGO分期（t=5.46，P<0.001）和肿瘤大小（t=6.37，P<0.001）相关。生存资料测定显示，circ_0020123高表达组的5年总生存期明显短于circ_0020123低表达组（P=0.019）。在细胞中敲减circ_0020123能下调自噬相关蛋白LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ的表达（0.45±0.05）（t=9.31。P=0.001），且上调p62的表达（1.94±0.11）（t=12.62，P<0.001）。结论circ_0020123是一个重要的卵巢癌相关环状RNA，为卵巢癌患者提供了一个潜在的诊断、预后的生物标志物和治疗靶点。

简介：摘要目的评价瑞芬太尼诱发切口痛大鼠痛觉过敏时自噬与氧化应激的关系。方法清洁级健康雄性SD大鼠32只，体重230~250 g，2~3月龄，采用随机数字表法分为4组(n＝8)：切口痛组(I组)、瑞芬太尼＋切口痛组(RI组)、自噬抑制剂三甲基腺嘌呤＋瑞芬太尼＋切口痛组(MRI组)和自噬激活剂雷帕霉素组＋瑞芬太尼＋切口痛组(RRI组)。I组建立大鼠切口痛模型的同时静脉输注等容量生理盐水60 min，RI组、MRI组和RRI组建立大鼠切口痛模型的同时以1 μg·kg-1min-1的速率静脉输注瑞芬太尼60 min；MRI组于造模前12 h时腹腔注射三甲基腺嘌呤15 mg/kg，RRI组于造模前12 h时腹腔注射雷帕霉素10 mg/kg。分别于输注瑞芬太尼或生理盐水前24 h(T0)、输注结束后2、6、24和48 h(T1~4)时测定机械缩足反应阈(MWT)及热缩足潜伏期(TWL)。行为学测试结束后处死大鼠并取脊髓腰膨大节段，采用Western blot法测定自噬蛋白微管相关蛋白1轻链3Ⅱ(LC3Ⅱ)、Beclin-1和P62的表达，采用黄嘌呤氧化酶法测定SOD活性，硫代巴比妥法测定MDA含量。结果与T0时比较，4组大鼠T1~4时PWT降低，TWL缩短(P<0.05)；与I组比较，RI组T1~4时MWT降低，TWL缩短，脊髓LC3Ⅱ和Beclin-1表达上调，P62表达下调，SOD活性降低，MDA含量升高(P<0.05)；与RI组比较，MRI组T1~4时MWT降低，TWL缩短，脊髓LC3Ⅱ和Beclin-1表达下调，P62表达上调，SOD活性降低，MDA含量升高(P<0.05)，RRI组T1~4时MWT升高，TWL延长，脊髓LC3Ⅱ和Beclin-1表达上调，P62表达下调，SOD活性升高，MDA含量降低(P<0.05)。结论自噬通过调节氧化应激水平参与瑞芬太尼诱发切口痛大鼠痛觉过敏的过程。

简介：摘要目的探讨自噬对急性肺损伤小鼠Treg/Th17细胞失衡的作用。方法24只雄性SD小鼠随机分为假手术组(S组)、脓毒症组(Sep组)和自噬抑制剂3-甲基腺嘌呤组(Sep+3-MA组)。采用脂多糖气管滴注法制备ALI模型。在光镜下评估小鼠肺组织病理学损伤评分并计算肺湿干质量比值（W/D），通过流式细胞术检测小鼠气管肺泡灌洗液（bronchoalveolar lavage fluid，BALF）中Th17细胞和Treg细胞计数及其相关细胞因子的水平，用Western blot法测定BALF中Th17细胞和Treg细胞内LC3-Ⅱ、Beclin-1和p62的表达。结果与S组比较，Sep组和Sep+3-MA组肺组织病理学评分、W/D比值升高（P<0.05）；与Sep组比较，Sep+3-MA组BALF中Th17细胞计数下降，Treg细胞计数随着脓毒症的发展明显升高（P<0.05），IL-17、IL-10和TNF-α的水平均明显下降（P<0.05）；而TGF-β1的水平在脓毒症的早期升高，而随着脓毒症的发展，TGF-β1的水平明显下降（P<0.05）。与Sep组比较，Sep+3-MA组小鼠BALF中Th17细胞和Treg细胞内LC3Ⅱ的表达呈下降趋势，但差异无统计学意义，Beclin-1表达则明显下降（P<0.05），而p62的表达明显升高（P<0.05）。结论异常激活的自噬参与了脓毒症急性肺损伤中Th17/Treg细胞的失衡，抑制自噬可恢复Th17细胞和Treg细胞的功能，使被打破了的平衡得到改善，通过抑制自噬改善Th17/Treg失衡可能成为调控脓毒症免疫紊乱的新思路。

简介：摘要缺血预处理(IPC)对于缺血再灌注损伤(IRI)发生后更迅速的恢复生理功能和组织结构和减少损伤具有重要的作用。细胞受到外界刺激后，内质网应激(ERS)启动，可以通过减少未折叠蛋白的累积并增加未折叠蛋白的降解，保护内质网稳态，泛素化降解系统也参与其中，但当细胞受到外界刺激持续或者过强时，ERS和泛素化降解系统无法消除未折叠蛋白时，自噬的激活可作为恢复内质网稳态的最后防线。除此之外，目前也有相关研究表明ERS可促进细胞自噬，维持细胞存活及内质网稳态，参与多种生理及病理过程。本综述将缺血预处理调节ERS相关通路促进自噬保护IRI的相关研究进行归纳，以期为缺血预处理保护IRI机制主题相关的科学研究提供参考。

简介：摘要目的铁蓄积与绝经后骨质疏松症发生相关，髋部骨质疏松骨折存在骨髓造血细胞自噬异常；本研究希望了解铁蓄积导致骨量下降与造血细胞自噬功能之间相关性，探索骨质疏松症新的危险因素。方法使用雄性小鼠腹腔注射枸橼酸铁铵构建铁蓄积小鼠模型，ELISA检测血清铁蛋白和骨生成指标I型前胶原氨基末端肽(P1NP)，micro-CT检测股骨骨密度，通过流式细胞仪分析小鼠股骨和胫骨骨髓造血干祖细胞比例和细胞凋亡，流式成像检测骨髓造血干祖细胞自噬溶酶体形成；使用造血细胞条件性敲除Atg7基因小鼠Atg7flox/flox; Vav-Cre(本文以Atg7-/-表示)对Atg7-/-小鼠股骨进行micro-CT扫描、股骨和胫骨骨髓造血干祖细胞进行转录组测序。结果两组比较后铁蓄积组显示：血清铁蛋白升高、血清骨生成指标P1NP表达减低、股骨骨密度下降(P<0.05)，骨髓造血干祖细胞比例异常升高(P<0.05)且伴随细胞凋亡比例增加(P<0.05)，骨髓造血干祖细胞自噬溶酶体形成受抑制；在Atg7-/-小鼠中，骨髓转录组测序结果提示：铁代谢活动增强，铁载体相关基因Lcn2、膜铁转运相关基因Tfr2，Slc40a1(Fpn1)、Steap3、线粒体亚铁血红素生成通路中酶的调控基因Cpox的mRNA表达均升高，Atg7-/-小鼠骨量下降(P<0.05)。结论铁蓄积导致骨量下降可能与骨髓造血细胞自噬功能抑制相关；骨髓造血细胞自噬异常与骨量下降存在相关性。

简介：摘要目的评价自噬在缺血后处理减轻小鼠肠缺血再灌注损伤中的作用。方法SPF级健康成年雄性C57BL/6J小鼠32只，9～12周龄，体重25～29 g，采用随机数字表法分为4组(n＝8)：假手术组(S组)、肠缺血再灌注组(IIR组)、缺血后处理组(IPO组)和缺血后处理＋自噬抑制剂3-甲基腺嘌呤组(IPO＋3-MA组)。采用夹闭肠系膜上动脉根部45 min恢复灌注2 h的方法制备小鼠肠缺血再灌注损伤模型，IPO组于恢复灌注前3 min给予3个循环灌注30 s，缺血30 s的处理。于再灌注2 h时采集股动脉血样，测定血清二胺氧化酶(DAO)、D-乳酸及肠型脂肪酸结合蛋白(I-FABP)的浓度，随后处死小鼠取小肠组织，光镜下观察病理学结果并行Chiu评分，计算肠组织含水量；Western blot法检测自噬相关蛋白Beclin-1和p62的表达。结果与S组比较，IIR组和IPO组Chiu评分升高，血清DAO、D-乳酸和I-FABP的浓度及肠组织含水量升高，肠组织LC3Ⅱ/LC3Ⅰ比值升高，Beclin-1表达上调，p62表达下调(P<0.05)；与IIR组比较，IPO组Chiu评分降低，血清DAO、D-乳酸、I-FABP浓度和肠组织含水量降低，LC3Ⅱ/LC3Ⅰ比值升高，Beclin-1表达上调，p62表达下调(P<0.05)；与IPO组比较，IPO＋3-MA组Chiu评分升高，血清DAO、D-乳酸、I-FABP浓度和肠组织含水量升高，LC3Ⅱ/LC3Ⅰ比值降低，Beclin-1表达下调，p-62表达上调(P<0.05)。结论自噬参与了缺血后处理减轻小鼠肠缺血再灌注损伤的过程。

简介：摘要近年来，脓毒症的患病率呈上升趋势，是引起儿童死亡的重要原因。心功能抑制是引起脓毒症相关死亡的主要因素，功能紊乱的线粒体作为持续炎症刺激，诱发细胞凋亡，导致心肌功能障碍。线粒体自噬是对脓毒症引起炎症反应的代偿机制之一，能够特异性清除因氧化应激、钙超载、细胞能量代谢障碍等引起的受损线粒体，维持细胞活力和呼吸，为机体提供足够的ATP。PINK1/Parkin及线粒体自噬受体(BNIP3L/NIX、FUNDC1等)是主要的线粒体自噬途径，通过控制线粒体质量可一定程度上保护细胞生命、促进细胞修复。本综述主要关注近年来线粒体自噬调控机制的研究进展，总结了线粒体自噬对脓毒症心肌的影响，以及线粒体自噬途径的信号传导途径，揭示线粒体自噬参与心肌保护的作用机制，为寻找靶向性调节线粒体自噬的分子或药物提供参考，为预防和治疗脓毒症心肌损伤提供新思路。

简介：目的探讨艾塞那肽作用10周后，大鼠胰腺腺泡细胞内自噬的变化情况。方法50只SD雄性大鼠中按随机数字表法随机选取30只予以高糖高脂饲料喂养2个月后，再腹腔注射链脲佐菌素（35mg／kg）以诱导糖尿病模型，并将26例糖尿病造模成功的大鼠随机分为数量相当的2组，即糖尿病模型实验组13只和糖尿病模型对照组13只。另外20只大鼠常规饲养2个月后，按随机数字表法随机等分为正常大鼠对照组和正常大鼠实验组。之后。2实验组大鼠皮下注射艾塞那肽5μg／kg·次，2次/d，每日清晨8点和下午6点在餐前1h给药，2对照组大鼠在同样时间予以等量生理盐水皮下注射。10周后取胰腺组织标本。免疫组化检测胰腺组织中GLP-1R的表达，westernblot检测胰腺组织中LC3-Ⅰ、LC3-Ⅱ和p62的表达并计算LC3-Ⅱ／Ⅰ比值和p62的相对表达量，每例胰腺标本均行HE染色以了解病变情况。结果正常大鼠实验组有6只出现胰腺腺叶结构破坏、胰腺腺泡细胞萎缩和细胞间隔增宽等病理改变．糖尿病模型实验组11只大鼠有7只出现上述病理改变。2实验组GLP-1R表达高于2对照组，差异有统计学意义（P〈0．05）。2实验组LC3-Ⅱ／Ⅰ比值和p62／β-actin比值大于各组相应对照组，差异均有统计学意义（P〈0．05）。结论艾塞那肽长期作用于正常大鼠和糖尿病模型大鼠可上调胰腺腺泡细胞上GLP-1R的表达并诱导胰腺腺泡细胞自噬流受损．p62蛋白积累，而引起胰腺损伤。

简介：摘要目的探究泛素结合酶10(UbcH10)对三阴性乳腺癌自噬的调节作用及其作用机制。方法在人三阴性乳腺癌细胞系MDA-MB-231中，利用小干扰RNA(siRNA)进行瞬时转染低表达UBCH10基因，转染阴性对照siRNA的细胞作为阴性对照组，未经处理的细胞作为空白对照组。通过实时荧光定量反转录聚合酶链反应(RT-qPCR)和蛋白质印迹法(Western blot)检测转染后UbcH10的表达。MDA-MB-231细胞的增殖情况及单磷酸腺苷活化蛋白激酶(AMPK)/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)通路相关蛋白的表达情况分别用细胞增殖试验(CCK-8)法及Western blot法检测。组间差异采用单因素方差分析和t检验。结果RT-qPCR和Western blot实验结果显示，转染后siUbcH10-1组和siUbcH10-2组UbcH10的mRNA和蛋白的表达水平低于阴性对照组，差异有统计学意义(0.182±0.138比0.917±0.031、0.127±0.136比0.917±0.031，t＝9.191、9.876，P<0.001)、(0.430±0.245比0.430±0.245、0.434±0.093比0.434±0.093，t＝3.685、3.651，P<0.05)，证明低表达细胞株构建成功。CCK-8结果显示，siUbcH10-1组和siUbcH10-2组细胞12、24、48 h的吸光度值均低于阴性对照组(0.160±0.004比0.211±0.004、0.155±0.003比0.211±0.004、0.246±0.006比0.286±0.012、0.202±0.004比0.286±0.012、0.308±0.007比0.432±0.004、0.308±0.013比0.432±0.004，t＝14.965、16.423、4.649、9.629、13.737、13.756，P<0.01)，差异有统计学意义。Western blot实验结果显示siUbcH10-1组和siUbcH10-2组微管相关蛋白1轻链3BⅡ(LC3BⅡ)/微管相关蛋白1轻链3BⅠ(LC3BⅠ)的比值及AMPK的磷酸化水平高于阴性对照组(4.294±0.812比2.552±0.002、4.554±0.216比2.552±0.002，t＝4.033、4.633，P<0.05)、(1.533±0.177比0.564±0.185、1.519±0.263比0.564±0.185，t＝4.859、4.792，P<0.05)，差异有统计学意义，mTOR的磷酸化水平低于阴性对照组(0.482±0.028比1.153±0.069、0.504±0.072比1.153±0.069，t＝8.708、8.433，P<0.05)，差异有统计学意义。结论低表达UbcH10可通过抑制AMPK/mTOR信号通路来诱导三阴性乳腺癌细胞发生自噬。

简介：摘要目的观察I型糖尿病肾病大鼠模型肾脏中自噻相关蛋白LC3、p62的表达情况。方法①建立STZ诱导的I型DN大鼠模型将20只雄性SD大鼠随机分为正常对照组和糖尿病肾病模型组。采用鼠尾静脉注射STZ的方法诱发SD大鼠糖尿病肾病（STZ为50mg/kg）。对照组注射相同体积的枸橼酸盐缓冲液，3天后开始测定血糖和尿糖值，当血糖值≥16.7mmol/L，尿糖值为3+-4+者可确定为糖尿病模型。成模后第八周处死大鼠，留部分肾皮质组织，4%多聚甲醛固定。②进行HE染色观察两组间肾组织病理改变。③免疫组织化学检测两组间肾组织LC3和P62蛋白表达及分布情况。④采用Pearson相关分析评判LC3、p62与STZ大鼠蛋白尿、肌酐的相关性。结果①STZ诱导的I型DN大鼠的血尿生化检测结果血糖波动在19.2-23.3mmol/l；血肌酐波动在72.5-122.7umol/l；尿蛋白波动在4.63-9.19g/24h②STZ大鼠模型基本病理改变与正常对照组相比，可见肾小球体积明显增大，肾小管局灶性萎缩，小管间质造型纤维化，基底膜增厚，系膜细胞及系膜基质增多。③p63、LC3免疫组化结果肾组织小管上皮中，p62表达明显增加，LC3表达明显下降，定量分析结果显示，STZ大鼠肾组织小管中，p62较正常组增加2.5倍，LC3下降35%（p<0.01）

简介：摘要目的探讨治疗性亚低温（therapeutic hypothermia, TH）对猪心肺复苏（cardiopulmonary resuscitation, CPR）后心肌钙调蛋白激酶Ⅱ（Ca2+/calmodulin-dependent protein kinase Ⅱ, CaMK Ⅱ）和细胞自噬的影响。方法国产健康雄性白猪20头，体质量33~40 kg，采用随机数字表法分为3组：假手术（sham, S）组（n=4）、CPR组（n=8）与TH组（n=8）。S组仅进行动物准备，不经历心脏骤停/复苏过程。CPR组和TH组采用电刺激诱发室颤8 min，然后心肺复苏5 min，制备猪心脏骤停复苏模型。实验猪复苏成功的标准为室上性自主心律伴平均动脉压>50 mmHg持续5 min以上。复苏成功后，TH组经体表冰毯将体温降至33 ℃，并维持至复苏后24 h，再以1 ℃/h复温5 h；S组和CPR组则利用冰毯仪全程维持正常体温。于复苏后6、12、24和30 h时，利用PiCCO法测定每搏输出量（stroke volume, SV）和全心射血分数（global ejection fraction, GEF），同时采用ELISA法检测血清心肌肌钙蛋白（cardiac troponin I, cTnI）的浓度、全自动生化分析仪检测血清肌酸激酶同工酶（creatine kinase-MB, CK-MB）的活性。于复苏后30 h处死动物，取左室心尖部心肌组织，采用Western blot法检测CaMK Ⅱ、微管相关轻链蛋白3 Ⅱ（microtubule-associated protein light chain 3, LC3 Ⅱ）和p62的蛋白表达水平。多组间比较采用单因素方差分析和Bonferroni事后检验。结果与S组相比，CPR组和TH组动物出现复苏后心功能障碍及心肌损伤，表现为SV和GEF值降低、血清cTnI浓度增加及CK-MB活性升高（均P<0.05）。但与CPR组相比，TH组动物在复苏6 h后SV和GEF值升高，在复苏12 h后血清cTnI浓度减少及CK-MB活性降低，组间比较差异有统计学意义[SV (mL)：6 h为25.0±6.9和31.9±3.3，12 h为26.7±5.1和34.6±3.7，24 h为28.8±3.3和35.7±3.2，30 h为29.2±5.2和36.7±3.3；GEF (%)：6 h为17.1±2.7和19.9±1.8，12 h为18.7±1.9和21.6±1.8，24 h为19.3±2.3和23.0±2.4，30 h为21.0±1.7和23.7±1.7；cTnI (pg/mL)：12 h为564±51和466±56，24 h为534±38和427±60，30 h为476±55和375±46；CK-MB (U/L)：12 h为803±164和652±76，24 h为693±96和557±54，30 h为633±91和480±77；均P<0.05]。组织检测分析显示，与S组相比，CPR组和TH组动物在复苏后心肌CaMK Ⅱ和LC3 Ⅱ表达增加、p62表达减少（均P<0.05）。但与CPR组相比，TH组动物在复苏后心肌CaMK Ⅱ和LC3 Ⅱ表达减少、p62表达增加（CaMK Ⅱ：0.73±0.06和0.58±0.05；LC3 Ⅱ：0.69±0.09和0.50±0.07；p62：0.40±0.07和0.68±0.14；均P<0.05）。结论TH减轻复苏后心功能障碍与心肌损伤的机制可能与抑制心肌CaMK Ⅱ表达及细胞自噬等有关。

简介：摘要目的研究红景天苷（salidroside，Sal）对重症急性胰腺炎大鼠胰腺细胞自噬的影响。方法50只雄性Wistar大鼠随机（随机数字法）分为假手术组（Sham组）、重症急性胰腺炎组（severe acute pancreatitis, SAP组）、红景天苷15 mg/kg治疗组（Sal 15组）、红景天苷30 mg/kg治疗组（Sal 30组）和红景天苷60 mg/kg治疗组（Sal 60组）五组，每组各10只。Sham组采用胰管内逆行注射生理盐水，SAP组和Sal各剂量组均采用胰管内逆行注射5%牛胆酸钠建立模型。Sal各剂量组于造模后2 h分别腹腔注射上述不同浓度红景天苷溶液。酶联免疫吸附法（enzyme-linked immunosorbent assay, ELISA）检测血清淀粉酶(amylase, AMY)活性和血浆肿瘤坏死因子-α(tumour necrosis factor-α, TNF-α)水平，Western blot检测胰腺组织蛋白表达水平，光学显微镜观察胰腺组织病理变化。实验数据采用SPSS 24.0进行分析。组间比较采用单因素方差分析，以P<0.05为差异有统计学意义。结果大鼠经造模后红景天苷干预，TNF-α（28.1±0.9）pg/mL、p65蛋白表达水平（0.52±0.01）和AMY活性（3 801±292） U/L在Sal 60组最低，组间差异有统计学意义（P<0.05）；p-mTOR水平在Sal 60组最低，LC3水平在Sal 60组最高（P<0.05）；且随着红景天苷剂量增加，胰腺组织病理损伤程度呈下降趋势。结论红景天苷对重症急性胰腺炎大鼠发挥保护作用，且以Sal 60组剂量作用最明显。

简介：摘要心肌细胞自噬对维持正常心脏结构和功能起重要作用。近年来的研究结果表明老年人心肌细胞自噬功能降低，老年人心肌自噬基因Atg5、Atg7和Beclin1表达降低；心肌细胞自噬下调与磷脂酰肌醇3-激酶/丝氨酸-苏氨酸激酶/雷帕霉素靶蛋白和单磷酸腺苷激活的蛋白激酶及SIRT1信号通路失调有关；此外，活性氧及一些神经内分泌因子也可介导老年人心肌细胞自噬下调。调控心肌细胞自噬将为老年人心肌病的预防和治疗提供新的途径。

简介：摘要目的探究骨科切口感染者创面病原菌分布，并分析骨科切口感染者自噬相关蛋白微管结合轻链蛋白-3（LC-3）、自噬特异性基因-1（Beclin-1）和泛素结合蛋白（P62）表达水平。方法选择2014年5月至2017年8月于西安市第九医院治疗的276例骨科患者为研究对象，将40例正处于切口感染期患者作为观察组，分析其创面病原菌分布；另采用随机数字表法选取暴露表皮、暴露皮下组织及暴露肌肉骨骼中未感染36例患者纳入对照组，分析两组患者感染切口创面组织标本Beclin-1、LC-3和P62自噬相关蛋白表达水平。结果276例骨科患者中治疗后发生切口感染者40例，感染率为14.49%。40例切口感染者共检出病原菌67株，包括革兰阴性菌46株（68.66%），其中铜绿假单胞菌为18株，占比最高（26.87%），其次为大肠埃希菌11株（16.42%）；革兰阳性菌19株（28.36%），凝固酶阴性葡萄球菌8株（11.94%），其次为金黄色葡萄球菌7株（10.45%）；酵母样真菌2株（2.99%）。感染切口创面组织标本免疫组织化学结果显示，观察组患者LC-3和Beclin-1蛋白阳性表达率显著低于对照组，差异有统计学意义（χ2 = 7.488、P = 0.006，χ2 = 11.800、P = 0.001）；P62蛋白阳性表达率显著高于对照组，差异有统计学意义（χ2 = 13.511、P < 0.001）。Western blot结果显示观察组患者LC-3和Beclin-1灰度值显著低于对照组，P62灰度值显著高于对照组，差异均有统计学意义（t = 15.282、4.207、8.678，P均< 0.001）。结论骨科切口感染者创面病原菌以革兰阴性菌的铜绿假单胞菌和大肠埃希菌为主，自噬相关蛋白LC-3、Beclin-1降低，P62升高，自噬水平降低，推测骨科切口感染与自噬相关蛋白表达存在密切相关性。