简介：摘要目的探讨胶质瘤干细胞(GSCs)微环境中恶变巨噬细胞(tMΦ)的脂代谢特征及其相关分子调控机制，为靶向tMΦ的精准治疗提供实验依据。方法实验采用巨噬细胞(MΦ)、tMΦ细胞株(包括tMΦ1、tMΦ2)，通过检测细胞内的三酰甘油(TG)和总胆固醇(TC)的水平分析tMΦ的脂代谢特征，采用蛋白质免疫印迹(Western blot)实验检测调控脂代谢的关键分子钙调蛋白(CaM)、载脂蛋白E(ApoE)、激素敏感性三酰甘油脂肪酶(HSL)、肝X受体(LXR)的表达水平。构建tMΦ的差异表达长链非编码RNA(lncRNA)表达谱，选择HOXC-AS3为研究对象。建立HOXC-AS3过表达和低表达的tMΦ细胞株。采用实时定量PCR(qRT-PCR)检测上调、沉默HOXC-AS3后tMΦ内CaM的表达水平。通过克隆形成实验观察HOXC-AS3沉默后tMΦ的集落形成能力，以Transwell实验检测其侵袭能力，通过建立在体移植瘤小鼠模型观察其致瘤能力。对与HOXC-AS3脂代谢相关的结合蛋白进行蛋白组学分析，应用RNA免疫共沉淀实验验证二者是否可形成复合体，进一步通过qRT-PCR、Western blot实验分析HOXC-AS3对其结合蛋白的调控作用。结果tMΦ中的TC、TG含量及CaM、ApoE、HSL、LXR蛋白的表达水平均高于正常MΦ(均P<0.01)。LncRNA表达谱结果提示，与正常MΦ相比，HOXC-AS3在tMΦ1、tMΦ2中均呈高表达。克隆形成实验结果表明，沉默HOXC-AS3后的tMΦ1、tMΦ2(sh-HOXC-AS3组)的克隆数目明显少于空转染对照组(sh-NC组)(均P<0.01)；Transwell实验结果表明，sh-HOXC-AS3组tMΦ1、tMΦ2的穿膜细胞数少于sh-NC组(均P<0.01)；致瘤实验结果表明，sh-HOXC-AS3组小鼠的移植瘤体积均小于sh-NC组(均P<0.01)。qRT-PCR结果提示，过表达HOXC-AS3可上调tMΦ中CaM的表达，而沉默HOXC-AS3可下调tMΦ中CaM的表达(均P<0.01)。蛋白组学分析结果提示，与HOXC-AS3相关性最高的脂代谢相关蛋白为hnRNPA1。RNA免疫共沉淀结果证实，hnRNPA1与HOXC-AS3可形成复合体，沉默hnRNPA1后tMΦ内的CaM表达下调(均P<0.01)，而沉默tMΦ内的HOXC-AS3后，hnRNPA1基因和蛋白水平的变化均无统计学意义(均P>0.05)。结论tMΦ中的脂代谢合成水平高于正常MΦ，其机制可能为HOXC-AS3通过与hnRNPA1的结合，从而影响脂代谢分子CaM的表达，进而调控tMΦ的脂代谢重塑。靶向HOXC-AS3可抑制tMΦ在GSCs微环境的增殖和侵袭，HOXC-AS3可能为提高脑胶质瘤免疫治疗效果的潜在靶点。

简介：摘要目的开展2016—2018年长沙市人群感染和活禽市场(live poultry markets, LPMs)环境污染H5N6亚型禽流感病毒(avian influenza virus, AIV)监测，为防控人感染H5N6亚型AIV提供实验室数据。方法采集2016—2018年长沙市流感样病例和不明原因肺炎病例咽拭子6 909份及LPMs环境样品1 719份，利用实时RT-PCR进行A型、H5、H7、H9和N6亚型AIV核酸扩增，并对82份AIV核酸阳性样品进行高通量核苷酸测序，然后对测序结果进行BLAST比对和氨基酸(amino acids, aa)关键位点分析。结果从6 909份病例的咽拭子样品中检出H5N6亚型AIV核酸阳性1份，从1 719份LPMs环境样品中检出A型AIV核酸阳性927份(53.93%)，H5N6亚型AIV核酸阳性193份(11.23%)。高通量核苷酸测序获得14株H5N6亚型AIV的基因组序列，aa关键位点分析显示病毒血凝素(hemagglutinin, HA)蛋白连接肽第338～347位出现6个碱性aa，对禽表现为高致病性的分子特征，受体结合位点(receptor binding site, RBS)第238～240位aa(对应H3型流感病毒第226～228位编码aa)为QSG或QRG，受体特征为禽源。神经氨酸酶(neuraminidase, NA)蛋白第290位耐药基因位点aa未出现R290K突变现象，对NA抑制剂(达菲/磷酸奥司他韦)敏感；病毒PB2蛋白发生E627K和D701N(I)突变，表明病毒致病力强。结论长沙市人群感染H5N6亚型AIV为偶发，LPMs环境H5N6亚型AIV污染较重，需要进一步加强LPMs环境AIV监测。

简介：摘要目的探讨下丘脑-垂体-肾上腺轴相关基因SKA2、AVPR1B、CRHR2基因位点的多态性与抑郁症患者自杀未遂行为的关联性及基因与环境因素的交互作用。方法选取自2017年3月至2018年8月因自杀就诊的抑郁症患者61例(病例组)，同期选取与病例组年龄、性别、受教育程度匹配人员57例(对照组)。使用Snapshot分型技术对病例组和对照组进行基因型检验，采用Barratt冲动量表(Barratt impulsiveness scale，BIS-Ⅱ)、生活事件量表(life event scale，LES)分别评估个体的冲动特质及其过去1年的精神压力。使用SPSS 22.0软件，采用卡方检验、独立样本t检验进行组间比较；应用广义多因子降维法进行基因-环境交互作用分析。结果自杀未遂组BIS-Ⅱ总分和LES总分[分别为(65.05±11.14)分，(34.16±27.23)分]均高于对照组[分别为(53.30±9.07)分，(11.67±12.64)分]，差异具有统计学意义(均P<0.05)；两组SKA2和CRHR2基因的基因型与等位基因频率分布均差异无统计学意义(P>0.05)；两组AVPR1B基因rs28373064的基因型和等位基因频率分布差异均具有统计学意义(χ2＝5.763，4.279，均P<0.05)，经Bonferroni校正后的分布差异无统计学意义(P>0.05)。GMDR中最优交互模型为AVPR1B基因rs28373064位点与冲动特质、生活事件构建的三阶模型，检验样本准确度最高0.789，模型差异具有统计学意义(P＝0.001)。在多个遗传模式中，AVPR1B基因rs28373064位点与抑郁症患者自杀未遂行为存在关联[显性模式：A/G-G/G(OR＝0.38，95%CI＝0.16～0.88，P＝0.021)；超显性模式：A/G(OR＝0.36，95%CI＝0.15～0.87，P＝0.019)；累加模式：A/A、A/G及G/G(OR＝0.44，95%CI＝0.20～0.96，P＝0.034)]。结论AVPR1B基因rs28373064多态性与抑郁症患者的自杀未遂行为相关，该位点AA基因型携带者在生活事件及冲动特质的影响下更容易发生自杀行为。

简介：摘要目的动态观察孕晚期宫内高雄激素环境下子代SD雌性大鼠新生期、青春期、成年期的体质量、体脂分布、持续性低度炎症状态及胰岛素敏感性。方法通过对妊娠18~20 d SD孕鼠皮下注射2 mg睾酮获取孕晚期宫内高浓度睾酮组（简称宫内高雄组）的子代雌鼠（n=15），并以等体积生理盐水皮下注射孕晚期SD孕鼠获取子代雌鼠为对照组（n=15），观察新生期（4 d）、青春期（15 d）、成年期（35 d）子代雌鼠的体质量、体脂体质量比；酶联免疫吸附法检测各时期子代雌鼠肿瘤坏死因子（tumor necrosis factor，TNF）-α、单核细胞趋化因子（monocyte chemotactic factor，MCP）-1的浓度；荧光染色方法检测腹膜脂肪组织中CD16的表达情况；取青春期、成年期子代雌鼠行腹腔注射葡萄糖耐受试验（intraperitoneal glucose tolerance test，IGTT）。结果①宫内高雄组子代雌鼠新生期、青春期的体质量［（101.17±9.19）g、（211.61±11.94）g］高于对照组［（71.59±7.56）g，P<0.001；（189.85±6.97）g，P=0.003］，体脂体质量比（0.16±0.18、0.27±0.20）高于对照组（0.11±0.17，P=0.002；0.21±0.18，P=0.006），而成年期子代雌鼠与对照组差异无统计学意义（P>0.05）。②宫内高雄组子代雌鼠不同时期（新生期、青春期、成年期）的体脂肌肉比（0.05±0.04、0.08±0.05、0.12±0.04）均高于对照组（0.08±0.05、0.13±0.07、0.18±0.06），差异均有统计学意义（P=0.031、P=0.007，P=0.005）。③宫内高雄组子代雌鼠各时期血清中TNF-α含量及MCP-1含量较对照组均显著增加（P<0.001，P=0.004）；且腹膜脂肪组织中CD16表达较对照组明显增加（P=0.018，P=0.031，P=0.004）。④宫内高雄组青春期IGTT中120 min血糖［（165.00±58.68）mg/dL］明显高于对照组［（123.90±65.16）mg/dL，P=0.028］，成年期的60 min［（189.73±69.87）mg/dL］、120 min血糖［（136.67±37.14）mg/dL］明显高于对照组［（170.18±32.66）mg/dL、（102.56±12.27）mg/dL］（P=0.035、P=0.008）。结论孕晚期宫内高雄激素环境可导致子代雌鼠新生期、青春期雄激素过多及向心性肥胖，但该效应未延续至成年期；且可能对出生后子代的肌肉形成产生不利影响。另外孕晚期高雄激素暴露可使出生后子代雌鼠脂肪组织中的巨噬细胞向M1型转化持续至成年，并长期处于低度炎症状态；孕晚期高雄激素暴露可使出生后子代雌鼠胰岛素敏感性可从青春期至成年期持续下降，而且成年期表现更明显。

简介：摘要多发性骨髓瘤(MM)为一种浆细胞恶性肿瘤，其发病率较高。MM患者的免疫细胞数量及功能存在明显异常，其中CD4+T细胞在MM的发生、发展中发挥着重要作用。在MM患者骨髓微环境中，可观察到辅助性T(Th)1/Th2平衡紊乱、调节性T细胞(Treg)增多所致的MM细胞免疫逃逸，以及Th17、Th22等通过分泌细胞因子介导的促肿瘤效应，促进MM的发生、发展。为了加深对MM患者骨髓微环境中CD4+ T细胞亚群作用的理解，从而为MM的免疫治疗提供新思路，笔者在分析MM患者Th1、Th2、Th17、Treg及Th22细胞亚群生物学特征的基础上，重点阐述上述各CD4+ T细胞亚群参与MM发生、发展的研究现状。

简介：摘要 目的 了解百色市田阳县群众急救知识的普及率的情况，并探索“医学生、PDCA、情景模拟”模式对提高群众急救知识普及率情况。方法 在田阳5个区域选取研究对象随机发放问卷，利用自行设计的调查问卷进行自填式问卷调查。 结果 培训后，社区公众实施急救技能熟练度和正确性比培训前要高。且第二次PDCA培训效果比第一次PDCA效果好。差异有统计学意义（P

简介：摘要目的观察前列腺素E2 （PGE2）4种受体（EP1-4R）对高糖环境中人视网膜微血管内皮细胞（hRMEC）中炎症小体活化和细胞损伤作用。方法将hRMEC分为正常组、高糖组，分别置于含5.5、30.0 mmol/L葡萄糖的Dulbecco改良Eagle培养基中培养。采用流式细胞仪观察高糖组、正常组的细胞凋亡率；酶链免疫吸附试验（ELISA）检测hRMEC细胞培养上清液中PGE2水平；蛋白免疫印迹法（Western blot）检测细胞环氧化酶2 （COX2）、EP1-4R的蛋白表达；实时荧光定量聚合酶链反应（qRT-PCR）检测hRMEC中EP1-4R mRNA的表达。高糖组细胞培养后72 h后，将其再分为对照组、PGE2组、EP1-4R激动剂组、PGE2+EP1-4R抑制剂组、二甲基亚砜组。根据组别，各组给予相应的激动剂或抑制剂继续培养24 h。采用qRT-PCR检测各组细胞核苷酸结合寡聚化结构样受体蛋白（NLRP3 ）、白细胞介素（IL）-1β前体（pro-IL-1β）mRNA的表达；ELISA检测细胞培养上清液中IL-1β、乳酸脱氢酶（LDH）的含量；Western blot检测各组细胞活化的半胱氨酸天冬氨酸酶（Caspase）-1蛋白表达。同时对高糖环境的hRMEC给予IL-1β刺激24 h，检测其细胞培养上清液中LDH的活性。结果高糖组hRMEC细胞凋亡率、COX2蛋白表达、PGE2蛋白含量较正常组明显升高，并呈时间依赖性。与正常组比较，高糖组hRMEC中EP1R、EP2R、EP4R蛋白及mRNA表达水平较正常组升高（P<0.05 ）。与对照组比较，PGE2组（t=4.627，P<0.01）、EP1-4R激动剂组（t=3.889、3.583、2.445、3.216，P<0.05 ）hRMEC中NLRP3 mRNA表达水平明显升高，差异有统计学意义；pro-IL-1β mRNA表达水平有所升高，但差异无统计学意义（PGE2组：t=1.807，P>0.05；EP1-4R激动剂组：t=1.807、1.477、0.302、1.926，P>0.05）。与PGE2组比较，PGE2+EP2R抑制剂组hRMEC中NLRP3 mRNA表达水平明显降低，差异有统计学意义（t=2.812，P<0.05）；PGE2+EP3R抑制剂组hRMEC中pro-IL-1β mRNA表达水平明显升高，差异有统计学意义（t=4.113，P<0.01）。PGE2组、EP1R激动剂组、EP2R激动剂组细胞培养上清液中IL-1β的蛋白含量较对照组明显升高，差异有统计学意义（t=5.155、4.136、4.817，P<0.01）；PGE2+EP2R抑制剂组和PGE2+EP4R抑制剂组细胞培养上清液中IL-1β的蛋白含量较PGE2组明显降低，差异有统计学意义（t=1.964、4.765，P<0.05）。PGE2组和EP2R激动剂组hRMEC中活化的Caspase-1蛋白表达较对照组明显增多，差异有统计学意义（t=5.332、4.889，P<0.05）；PGE2+EP2R抑制剂组hRMEC中活化的Caspase-1蛋白表达较PGE2组明显降低，差异有统计学意义（t=6.699，P<0.01 ）。PGE2组和EP2R激动剂组细胞培养上清液中LDH活性较对照组明显升高，差异有统计学意义（t=4.908、4.225，P<0.05）；PGE2+EP2R抑制剂组细胞培养上清液中LDH活性较PGE2组明显降低，差异有统计学意义（t=5.301，P<0.01 ）。与对照组比较，高糖环境hRMEC细胞培养上清液中LDH活性明显升高，差异有统计学意义（t=3.499，P<0.05 ）。结论PGE2的4种受体对NLRP3及其效应分子均有不同程度活化作用，其中EP2R主要介导了高糖环境下hRMEC的损伤。

简介：摘要：近年来中医药防治结直肠癌肝转移的作用越来越受到重视。Treg细胞和Th17细胞二者的动态平衡可调节肿瘤炎症微环境，在结直肠癌肝转移中发挥重要作用。本文探讨Th17/Treg轴介导的炎症微环境与结直肠癌肝转移的关系，展望甲术三草汤调控Th17/Treg轴,调节肿瘤炎症微环境，抑制结直肠癌肝转移。

简介：摘要目的探讨高糖环境下基质细胞衍生因子-1(SDF-1)对巨噬细胞生物学功能的影响及其机制。方法体外建立RAW264.7巨噬细胞系，细胞计数试剂盒(CCK-8)检测SDF-1对巨噬细胞的毒性。采用蛋白质印迹法(Western blot)检测高糖(22.5 mmol/L)和正常糖(5.5 mmol/L)对巨噬细胞相关蛋白表达的影响。实验分组：A组(对照)、B组(SDF-1)、C组(磷脂酰肌醇激酶/蛋白激酶B通路抑制剂：LY294002)、D组(SDF-1+ LY294002)，Transwell实验检测巨噬细胞的迁移能力，Western blot检测各组相关蛋白的表达变化。两组间比较采用非配对t检验，多组间比较采用单因素方差分析。结果CCK-8实验结果显示，各组间比较差异无统计学意义(F＝0.464，P>0.05)。高糖组巨噬细胞SDF-1、血管内皮生长因子(VEGF)、SDF-1的特异受体(CXCR4)、基质金属蛋白酶-9(MMP-9)的表达低于正常糖组(SDF-1、VEGF、CXCR4、MMP-9组间比较，t＝50.510、11.020、27.660、55.350，均P<0.05)。Transwell实验中，A、B、C、D组迁移巨噬细胞数分别为(86.630±4.096)、(144.300±5.044)、(59.000±2.646)、(65.670±4.256)个。与A组比较，B组及C组差异有统计学意义(t＝21.460、5.574，均P<0.05)。此外，SDF-1可以增加巨噬细胞CXCR4、PI3K、蛋白激酶B(Akt)、MMP-9、VEGF的表达，而LY294002可以减少上述蛋白的表达(Western blot检测各蛋白，B组：CXCR4、PI3K、Akt、MMP-9、VEGF组间比较，t＝44.690、5.393、4.640、13.250、8.551，均P<0.05；C组：PI3K、Akt、MMP-9、VEGF组间比较，t＝13.430、5.287、4.381、45.510,均P<0.05)。结论高糖环境可以影响巨噬细胞SDF-1、VEGF、CXCR4及MMP-9的表达，SDF-1可能通过上调PI3K/Akt通路促进巨噬细胞分泌MMP-9及VEGF。

简介：摘要目的探讨弥漫性大B细胞淋巴瘤（DLBCL）中MYD88 L265P突变对肿瘤细胞及肿瘤微环境中PD-L1表达的影响，为患者进行免疫治疗提供理论依据。方法采用多重连接探针扩增技术检测2008年8月至2010年5月间经中国医学科学院肿瘤医院病理诊断明确的72例初治性DLBCL石蜡包埋样本中MYD88 L265P突变的发生频率。采用Ventana全自动免疫组织化学平台对所有样本进行PD-L1（22C3）及PD-L1（SP142）检测，分别观察肿瘤细胞及肿瘤微环境中PD-L1的表达情况，分析MYD88 L265P突变与DLBCL肿瘤细胞及肿瘤微环境PD-L1表达的关系。结果72例DLBCL组织标本中，MYD88 L265P突变15例（20.8%）。剔除9例伴有JAK2扩增的病例，将63例DLBCL分成MYD88 L265P突变型组14例，MYD88 L265P野生型组49例。免疫组织化学结果显示，14例MYD88 L265P突变组中，7/14肿瘤细胞PD-L1（22C3）表达阳性，4/14肿瘤微环境PD-L1（SP142）表达阳性。在49例MYD88 L265P野生型组中，9例（18.4%）肿瘤细胞PD-L1（22C3）表达阳性，38例（77.6%）肿瘤微环境PD-L1（SP142）表达阳性。并且在16例肿瘤细胞PD-L1（22C3）表达阳性的DLBCL中，7例伴有MYD88 L265P突变者中仅2例肿瘤微环境PD-L1（SP142）阳性；9例MYD88 L265P野生型者肿瘤微环境PD-L1（SP142）表达均阳性。统计学分析显示，MYD88 L265P突变型组肿瘤细胞PD-L1（22C3）的阳性率明显高于野生型组（P=0.017）；MYD88 L265P突变型组肿瘤微环境PD-L1（SP142）的阳性率明显低于野生型组（P=0.001）。结论MYD88 L265P突变可能在调控DLBCL肿瘤细胞及肿瘤微环境PD-L1的表达中发挥了一定作用，进一步的研究将为MYD88 L265P突变DLBCL患者进行免疫治疗提供理论依据。

简介：摘要环境内分泌干扰物（endocrine disrupting chemicals，EDCs）是广泛存在于环境中对环境和人类健康造成严重危害的一类外源性化学物质，目前机体暴露该类物质对甲状腺的影响备受关注。我们综述了环境内分泌干扰物对甲状腺激素的影响，磷脂酰肌醇3-激酶（phosphatidylinositol 3-kinase，PI3K）/蛋白激酶B（protein kinase B，Akt）/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白（mammalian target of rapamycin，mTOR）（PI3K/Akt/mTOR）信号转导途径在甲状腺疾病中的作用以及PI3K/Akt/mTOR信号通路在EDCs诱导甲状腺滤泡上皮细胞凋亡和自噬中的作用，为相关的甲状腺疾病提供进一步的认识。

简介：摘要目的探讨饱和氢气生理盐水对幼鼠高氧所致肺损伤的影响及其分子机制。方法幼年、雄性SD大鼠63只，2周龄，体重30～50 g，将其随机数字表法分为3组：高氧组(HO组，n＝21)，连续7 d吸入高浓度氧气并腹腔注射生理盐水0.5 ml；高氧并饱和氢气生理盐水干预组(HO+HRS组，n＝21)，连续7 d吸入高浓度氧气并腹腔注射饱和氢气生理盐水0.5 ml；空白对照组(C组，n＝21)，连续7 d吸入空气并腹腔注射生理盐水0.5 ml。7 d观察结束后处死幼鼠，收集眼球血和肺组织，检测幼鼠血浆中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-6(IL-6)的浓度，测定幼鼠肺脏组织湿/干重(W/D)比值、丙二醛(MDA)浓度、超氧化物歧化酶(SOD)活性、B细胞淋巴瘤/白血病-2相关X蛋白(bax)和B细胞淋巴瘤/白血病-2(bcl-2)蛋白的相对表达量以及半胱氨酰天冬氨酸特异性蛋白酶(Caspase)-3蛋白的表达，原位缺口末端标记法(TUNEL)观察肺脏组织细胞凋亡，计算凋亡指数(AI)。各指标组间比采用单因素方差分析。结果HO、HO+HRS组W/D比值(5.68±0.18、5.43±0.21)、血浆TNF-α[(801±183)、(611±173) pg/ml]、血浆IL-6[(519±101)、(399±95) pg/ml]、肺组织MDA含量[(8.11±2.35)、(7.01±1.56) nmol/mg蛋白]、bax蛋白的相对表达量(0.59±0.08、0.39±0.04)、Caspase-3蛋白的免疫组织化学评分[(6.01±1.01)、(3.55±1.43)分]、AI[(55.6±4.7)%、(32.5±5.4)%]高于C组，差异有统计学意义(F＝7.658、9.894、10.236、5.673、120.121、5.034、85.310，P<0.05)；HO组、HO+HRS组肺组织SOD含量[(9.96±2.36)、(11.21±2.26) U/mg蛋白]、bcl-2蛋白的相对表达量(0.16±0.34、0.27±0.09)、bcl-2/bax值(0.27±0.06、0.72±0.05)低于C组，差异有统计学意义(F＝7.088、150.901、72.522，P<0.05)；HO+HRS组W/D比值、血浆TNF-α、血浆IL-6、肺组织MDA含量、bax蛋白的相对表达量、Caspase-3蛋白的免疫组织化学评分、AI低于HO组，差异有统计学意义(F＝7.658、9.894、10.236、5.673、120.121、5.034、85.310，P<0.05)，肺组织SOD含量、bcl-2蛋白的相对表达量、bcl-2/bax值高于HO组，差异有统计学意义(F＝7.088、150.901、72.522，P<0.05)。结论幼鼠在高氧环境下导致肺损伤，饱和氢气生理盐水通过调控bcl-2/bax/Caspase-3通路降低幼鼠高氧肺损伤。