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  • 作者: 刘雪霞 张璘 任梅宏 宋桂宁 张颜秋 李艳晖
  • 学科: 医药卫生 > 临床医学
  • 创建时间:2020-09-15
  • 出处:《医师在线》 2020年第18期
  • 机构:羊水细胞染色体核型分析是目前诊断胎儿是否有染色体疾病的较为安全可靠及常用的方法 [1],但羊水细胞培养一直存在着标本难以复得、 培养周期长、 易污染、 分裂象少等问题 [2-4]。羊水从抽取后进行培养,到制备出可分析的良好染色体核型,整个过程步骤繁多;其中包括羊水细胞接种、培养、收获,及羊水染色体制片、 G显带、染色等过程,每一个步骤都对实验的成功具有重要的影响。因此,分析羊水细胞培养和染色体制备的影响因素以及探索提高实验成功率和质量的方法,对满足临床需求和提高染色体异常诊断率有着深远的意义。本文结合本人的工作积累和目前羊水培养和染色体制备的关键环节进行综述,现综述如下:
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  • 简介:摘要目的在传统组织块贴壁法培养的基础上,寻找一种改良的脐带间充质干细胞培养方法.方法将脐带组织制作成约0.3X0.7cm2大小组织片,称之为脐带组织片,进行悬浮培养(改良法组织片悬浮法);观察其形态结构、生长特性;并进行成骨细胞诱导培养,测定多向分化潜能.结果采用改良法成功培养出脐带间充质干细胞;其生物学特性与传统的组织块贴壁法培养细胞一致.并证实了其干细胞特性.结论改良法较传统组织块贴壁法简便,可靠,成功率高.关键词脐带间充质干细胞;培养;组织片悬浮法中图分类号R714.5文献标识码B文章编号1008-6315(2015)12-0237-02

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  • 简介:摘要:现阶段,国内企业(含外企)单克隆抗体(以下简称“单抗”)药物生产设备主要有传统型生产设备和一次性抛弃型生产设备两种。通过项目设计实例,结合中国GMP(2010修订版)的要求,就一次性抛弃型生产设备的车间布局设计进行探讨与分析。

  • 标签: 重组单克隆 抗体药物 工程细胞培养
  • 简介:目的构建出一种新型的微孔水凝胶并用于体外培养原代软骨细胞。方法利用双乳液法制备明胶微球,然后用罗丹明染色液标记后包埋在水凝胶,观察明胶微球降解情况,再用此方法获得的微球制备微孔海藻酸钠水凝胶培养原代软骨细胞,通过荧光显微镜观察活/死细胞检测结果,并使用细胞活力检测试剂(CCK8)方法测定细胞活力值。结果在显微镜下观察到,明胶微球在37℃的培养环境下能够自然降解,水凝胶内部产生微孔。活/死细胞染色结果观察到原代软骨细胞能够在材料中均匀地分布和生长,在微孔边缘生长的软骨细胞甚至能够突破边缘,将空腔位置占据生长。细胞活力检测数据提示微孔水凝胶组软骨细胞的增殖能力高于对照组细胞。结论通过明胶降解的特性构建出的新型微孔水凝胶材料,具有良好的细胞相容性,并在水凝胶内部形成微孔,可有效地产生边缘效应,有利于体外培养原代软骨细胞

  • 标签: 水凝胶 明胶 生物相容性材料 软骨细胞
  • 简介:摘要:所谓的细胞培养,就是将一些有机体的组织分离出来,分成不同的个体,或者是从体内分离出来的个体。自1885年由德国的罗克斯用生理盐水培育出鸡胚胎,至今已经有130余年的发展历程。在此期间,该技术得到了长足的进步,尤其是60年代后期,该技术达到了顶峰,在培养容器、培养基以及培养方式上都有了新的突破。由于其操作简便,周期短,成本低廉,因此,无论是在科学的研究还是在实际的生产中,都得到了越来越多的重视。基于此,本文研讨三维荧光光谱在细胞培养中的应用及其效果、

  • 标签: 三维荧光光谱 细胞培养中 应用效果
  • 简介:摘要1966年羊水细胞培养成功同时应用在胎儿染色体疾病的产前诊断当中,从那以后这项技术在产前诊断当中已经达到了无可替代的地位,但是传统的羊水细胞培养时间长、成功率低、不能够满足临床需要,因此人们对羊水细胞培养技术进行不断的摸索,得到了更大的改进,诞生了羊水细胞培养染色体核型分析技术。这项技术在产前诊断当中的作用和效果突出,体现出技术自身优势,因此本文主要对羊水细胞染色体核型分析技术在产前诊断当中的应用进行进一步的研究和探讨。

  • 标签: 羊水细胞培养 染色体核型分析技术 产前诊断 应用
  • 简介:摘要目的评价采用细胞培养法以及实时荧光定量PCR法在流感病毒检测中的临床价值。方法选择我中心于2018年6月-2019年8月收集采集到的流感样病例的350份咽拭子样本为研究对象,对其分别采取细胞培养法以及实时荧光定量PCR法进行检测,比较两种检验方式的阳性检出率。结果实时荧光定量PCR法阳性检出率为11.43%高于细胞培养法的2.86%,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论实时荧光定量PCR法在临床检测中具有简单快捷、简单快捷以及灵敏度高等优势,可应用于流感爆发初期大面积快速筛查。

  • 标签: 细胞培养法 实时荧光定量PCR法 流感病毒检测 阳性检出率
  • 简介:摘 要:重组人血小板生成素(rh-TPO)经CHO工程菌表达后,可调节巨核细胞形成有功能的血小板,用于治疗多种疾病引起的血小板减少症,但目前的培养系统与纯化方法较复杂且不能规模化生产等问题,亟需一种批量培养与蛋白纯化方法,所以本研究首先分别通过改变细胞培养基与补加营养物质培养细胞,并监测监测细胞活力、细胞密度及蛋白表达量,其次分别通过100L的反应器培养,最终监测蛋白表达量,结果表明,可培养高达100L的反应器体系,并获得90mg/ml的rh-TPO蛋白,这一优化提高了rh-TPO的生产,为批量的生产上市提供了理论基础。

  • 标签: 重组人血小板生成素 流加培养 病毒灭活 蛋白纯化 离子交换
  • 简介:目的探讨强直性脊柱炎(AS)滑膜细胞培养上清液对韧带成纤维细胞成骨分化的影响。方法分别进行AS患者滑膜和韧带成纤维细胞原代培养,收集第1代的滑膜细胞培养液上清液,应用此上清液对韧带成纤维细胞进行诱导,分别于0、5、10、15、20d检测碱性磷酸酶和骨钙素表达水平,并于25d时进行钙结节染色。结果在应用AS滑膜细胞培养上清液对韧带成纤维细胞进行诱导的第10天,碱性磷酸酶(ALP)和骨钙素(OC)表达水平明显升高,并在第15天达到高峰。第25天时进行钙结节VonKossa染色,发现有钙结节形成。结论AS滑膜细胞培养上清液对韧带成纤维细胞具有成骨诱导分化的能力。

  • 标签: 脊柱炎 强直性 滑膜 韧带 成纤维细胞
  • 简介:摘要:目的:观察人参提取的急性毒性、遗传毒性和30天喂养毒性,为其安全应用提供依据。方法:急性毒性实验,对小鼠灌服20g/kg的受试,连续14天。遗传毒性实验,进行Ames试验、小鼠骨髓嗜多染红细胞微核试验、小鼠精子畸形试验,30天喂养毒性试验,将大鼠随机分为正常对照组和受试高、中、低剂量组(1.0、0.5、0.25g/kg.bw),连续灌胃30天。结果:人参提取小鼠MTD>20g/kg。遗传毒性试验3项的结果均为阴性。30天喂养试验中,与正常对照组比较,人参提取高、中、低3个剂量组动物行为活动、进食量等均未见异常;血液学指标、血液生化指标和尿液指标未发现与受试有关的异常改变,病理组织学检查未发现与受试有关的异常改变。结论:在本实验条件下未观察到人参提取有明显毒性反应。

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  • 简介:摘要:目的 探究人参提取的安全性。方法 依据《保健食品及其原料安全性毒理学检验与评价技术指导原则》(2020年版),进行小鼠急性毒性试验、遗传毒性试验(细菌回复突变试验、红细胞微核试验、小鼠精母细胞染色体畸变试验)、大鼠 90 天喂养试验。结果 急性毒性实验LD50 >15.0 g/kg,属实际无毒级。遗传毒性试验结果均为阴性,无遗传毒性。90 天喂养试验显示,各剂量组生长发育、进食量、体重、血常规、血生化、尿常规、脏器重量及大体解剖结果均未见异常。结论 人参提取实际无毒,无遗传毒性,无亚慢性毒性。

  • 标签: 人参提取物 急性毒性 遗传毒性 亚慢性毒性
  • 简介:目的研究不饱和脂肪酸制剂--鱼肝油酸钠对体外培养肝癌细胞的抗癌作用及其机制,并进一步探讨经皮瘤内注射该药物治疗肝癌的效果及其机制.方法(1)不同浓度鱼肝油酸钠处理Bel-7402人肝癌细胞,监测其对细胞的影像,并用病理染色及流式细胞仪等方法研究作用机制;(2)肝癌模型裸鼠随机分成两组,分别给予鱼肝油酸钠及生理盐水局部浸润注射治疗.治疗前后分别测肝、肾功能及白细胞计数.完成试验,对所有动物行解剖病理检查,明确有无内脏及淋巴结转移.结果(1)鱼肝油酸钠使肿瘤细胞活度明显下降,较对照组出现明显凋亡细胞;(2)治疗组肿瘤组织完全坏死、脱落,实验前后肝、肾功能及白细胞计数无变化.结论(1)鱼肝油酸钠对体外培养肝癌细胞具有显著的杀灭和抑制作用,诱导肿瘤细胞凋亡是其作用机制之一;(2)鱼肝油酸钠瘤内及瘤周局部注射后造成肿瘤血供障碍是重要作用机制.动物实验未发现骨髓抑制现象和肝肾功能损伤的毒副作用.

  • 标签: 鱼肝油酸钠 经皮瘤内注射 治疗 肝癌细胞 体外细胞培养 机制探讨
  • 简介:摘要目的观察人参总皂苷联合大鼠骨髓间充质干细胞(BM-MSCs)对高糖损伤INS-1细胞胰岛素分泌功能的影响。方法将体外培养INS-1细胞给予连续性高糖刺激后与BM-MSCs进行间接共培养。分为正常对照组、INS-1细胞损伤模型对照组、无TSPG共培养组、TSPG共培养组,ELISA检测各组INS-1细胞基础胰岛素分泌、葡萄糖刺激的胰岛素分泌。结果与正常对照组相比,高糖损伤模型组INS-1细胞基础胰岛素和葡萄糖刺激的胰岛素分泌量均减少。与损伤对照组比较,共培养各组INS-1细胞基础胰岛素和葡萄糖刺激的胰岛素分泌增加(P﹤0.05)。与无TSPG共培养组比较,不同浓度的TSPG干预共培养组基础胰岛素的分泌量无明显差异,而100和200mg/LTSPG干预共培养组葡萄糖刺激的胰岛素分泌增加(P﹤0.05)。结论BM-MSCs能促进高糖损伤INS-1细胞胰岛素分泌功能的恢复,一定浓度的TSPG能促进这种作用。

  • 标签: 高糖 骨髓间充质干细胞 胰岛&beta 细胞 共培养 人参总皂苷 PDX-1
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  • 简介:摘要:本研究通过水煮法对人参根和侧柏叶原料进行了天然活性成分提取,并选取成人毛囊真皮细胞人参根和侧柏叶提取的生物相容性进行评价,结果显示人参根和侧柏叶的天然活性成分有效促进了毛囊真皮细胞的生长和增殖。小鼠模型研究也进一步表明人参根和侧柏叶提取能够显著促进其毛发生长。本研究表明从人参根与侧柏叶中提取的天然活性成分有可能为治疗脱发性疾病提供一种新的策略。

  • 标签: 人参根 侧柏叶 毛囊 细胞增殖
  • 简介:背景:神经母细胞瘤是婴幼儿和儿童最常见的实体肿瘤之一,靶向肿瘤干细胞的治疗能够有望从根本上治愈肿瘤,但是肿瘤干细胞数量较少,并具有抗凋亡、抗放化疗能力等,导致其对于放疗、化疗并不敏感。目的:探究干细胞标志CD133在神经母细胞瘤中的表达及其临床意义。方法:收集2004年6月至2014年2月新疆医科大学第一附属医院小儿外二科诊治的58例神经母细胞瘤患儿临床资料,其中神经母细胞瘤患儿46例,节细胞细胞瘤患儿12例,通过免疫组织化学分析法分析所有患儿肿瘤组织中的CD133表达水平,并研究神经母细胞瘤的病理分型、INSS分期、术后存活时长与CD133表达水平之间存在的联系。结果与结论:共有22例(48%)神经母细胞瘤患儿CD133表达为阳性,有4例(33%)节细胞细胞瘤患儿CD133表达阳性,肿瘤细胞胞浆为CD133主要表达部位。肿瘤组织各临床分期的CD133阳性率差异明显,其中1,2期为21%,3,4期为64%,4S期为36.4%,差异有显著性意义(P=0.011);组织分型为预后良好型患儿CD133阳性率为29%,明显低于预后不良组织型患儿(57%),差异有显著性意义(P=0.031)。CD133阴性患儿生存周期显著长于CD133阳性患儿(P〈0.05)。结果表明干细胞标志CD133的表达与神经母细胞瘤发生、发展、转归有密切联系,在评估患儿术后存活时长、改进该病的诊断和治疗等方面具有重要意义。

  • 标签: 神经母细胞瘤 肿瘤干细胞 组织工程 干细胞 CD133 阳性率
  • 简介:细胞抽提重编程是近年来发展起来的技术,是将供体细胞抽提导入受体细胞中,使受体细胞向供体细胞的形态、基因、功能等方面发生改变。目前,此方法已成功应用于体细胞与体细胞之间、体细胞与干细胞之间,成为一种有效的、无伦理学争议的重编程方法。本文就细胞抽提重编程的研究现状、相关机理及存在的问题进行综述。

  • 标签: 细胞抽提物 重编程 诱导