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简介：目的基于LC-MS／MS测定复方苦参汤中苦参碱、氧化槐果碱、氧化苦参碱的含量。方法采用LC-MS／MS（Agilent1260液相色谱仪，ABSCIEX4000QTRAP三重四级杆质谱仪），Agilent5TC-C18（2）（250mm×4．6mm，5μm）色谱柱，流动相为甲醇．水，梯度洗脱，流速400μL／min，进样量50L，柱温30℃；离子源为ESI源，采用正离子模式进行检测，检测离子对质荷比为：苦参碱（249．2／148.3）、氧化槐果碱（262．9／136．1）、氧化苦参碱（265．3／136．1）。结果苦参碱、氧化槐果碱、氧化苦参碱的线性关系良好（r〉0．995），平均加样回收率分别为99．7％（RSD=3．4％）、102．1％（RSD=3．1％）、100．8％（RSD=2．9％），10批样品中苦参碱、氧化槐果碱、氧化苦参碱含量分别在0．4475～0．5229mg／mL、0．0564～0．0812mg／mL、0．1512～0．2142mg／mL范围内。结论该法简便、快捷、可行性强，可用于测定复方苦参汤中苦参碱、氧化苦参碱、氧化槐果碱含量。

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简介：目的观察中药复方糖肾煎对2型糖尿病肾病气阴两虚证大鼠足细胞的保护作用。方法采用随机数字表法将大鼠分为假手术组、模型组、糖肾煎小剂量组、糖肾煎大剂量组、贝那普利组、中西医结合组,采用单肾切除＋高脂饲料＋小剂量链脲佐菌素（STZ）腹腔注射＋行为干预的方式,建立病证结合的2型糖尿病肾病气阴两虚证大鼠模型。各组分别干预16周后,观察各组大鼠空腹血糖（FBG）、负荷后2h血糖（P2hBG）、空腹胰岛素（FINS）、胰岛素抵抗指数（HOMA-IR）、胆固醇（TC）、甘油三酯（TG）、高密度脂蛋白（HDL-c）、低密度脂蛋白（LDL-c）,血尿素氮（BUN）、血肌酐（Cr）、肾重/体重指数、24h尿微量白蛋白（UAlb）,尿β2微球蛋白（β2MG）,免疫组化计算足细胞密度、电镜下足细胞病理改变。结果（1）与假手术组比较,模型组大鼠糖脂代谢异常（P〈0.01）,尿蛋白排泄率增加（P〈0.01）,肾功能无明显改变（P〉0.05）,足细胞密度减小（P〈0.01）,足突增宽、融合;（2）与模型组比较,糖肾煎小剂量组上述指标均有改善趋势,但无统计学意义（P〉0.05）,糖肾煎大剂量组、贝那普利组及中西医结合组上述指标均有改善（P〈0.05或P〈0.01）;（3）与贝那普利组比较,糖肾煎大剂量组及中西医结合组HOMA-IR有所改善（P〈0.01）,余指标无明显变化。结论中药复方糖肾煎对2型糖尿病肾病气阴两虚证大鼠足细胞有保护作用。

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简介：目的通过比较甘松不同提取物对6-羟基多巴胺（6-OHDA）所致人神经母细胞瘤细胞（SH-SY5Y）损伤的保护作用,筛选活性部位并进行成分分析。方法采用体外细胞培养法,建立6-OHDA损伤SH-SY5Y细胞帕金森模型。MTT法检测甘松不同提取部位对6-OHDA诱导损伤的SH-SY5Y细胞活力的影响,计算抑制率;进一步观察细胞形态明确活性提取部位对细胞生长的影响。采用GC-MS技术对该部位进行化学成分分析。结果甘松石油醚、乙酸乙酯、正丁醇及乙醇部位均能抑制6-OHDA所致的SH-SY5Y细胞损伤,提高细胞存活率,其中石油醚部位的保护作用最强,从该部位中分离鉴定出22个成分,主要为倍半萜类化合物。结论甘松不同提取部位对6-OHDA诱导的SH-SY5Y细胞损伤均有一定保护作用,其中石油醚部位活性较强,主要成分为倍半萜类化合物。

简介：目的:建立超高效液相色谱-串联质谱(UPLC-MS/MS)方法同时检测大鼠血浆中12种神经递质和激素的含量,包括去甲肾上腺素(NE)、肾上腺素(Epi)、L-甲状腺素(L-T4)、β-雌二醇(β-E2)、乙酰胆碱(Ach)、5-羟色胺(5-HT)、多巴胺(DA)、组胺(HA)、γ-氨基丁酸(GABA)、睾酮(T)、孕酮(P)、皮质醇(Cor),并应用该方法研究寒性中药对神经递质和激素的影响。方法:(1)正常大鼠血浆样品经甲醇-乙腈(1∶1)沉淀蛋白后,取上清液挥干,流动相复溶,2μl进样分析;采用BEHamide(2.1mm×100mm,1.7μm)色谱柱,以含0.2%甲酸的水溶液-乙腈作为流动相进行梯度洗脱,流速0.2ml/min、柱温35℃,并进行方法学考察。(2)正常大鼠灌胃给予寒性中药后,于0.5、1.5、2.5和4.5h分别采血,分离血浆,测定12种神经递质和激素的含量。结果:12种神经递质和激素检测的线性关系良好,低、中、高浓度的提取回收率RSD范围为1.31%~10.96%,基质效应RSD范围为1.68%~10.70%,批内、批间精密度RSD均小于10.99%。寒性药物可以显著降低大鼠血浆Epi、DA、T、5-HT、Cor水平,升高GABA、P、β-E2、Ach的含量。结论:该方法灵敏、快捷、准确、简便,适用于血浆中12种神经递质和激素含量的同时测定;寒性中药可诱导机体副交感神经功能亢进,但对交感神经-肾上腺髓质、皮质功能显示抑制效应。

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简介：目的:从脑红蛋白(neuroglobin,Ngb)正性调控p38丝裂原活化蛋白激酶(p38MAPK)信号通路探讨电针百会、水沟穴对脓毒性脑病大鼠脑保护作用及其可能机制。方法:采用经盲肠结肠穿孔(CLP)造模成功的脓毒症大鼠,通过观察大鼠神经行为学改变制作脓毒性脑病模型。随机选取造模组大鼠,分为模型组和电针24h组、电针72h组,每组10只;假手术组10只作为对照组。电针24h组和电针72h组在造模成功后开始采用电针百会、水沟穴电针治疗,每12h治疗30min;其余组不实施电针治疗。分别治疗24h和72h后,对大鼠进行神经行为学评分;取大鼠脑组织,行免疫组化检测大鼠脑组织Ngb,采用Westernblot分别检测Ngb、p38MAPK蛋白表达水平。结果:电针组大鼠神经行为学评分均显著高于模型组(P<0.01)。与假手术组比较,模型组的Ngb免疫阳性表达、Ngb及p38MAPK蛋白表达水平均明显升高(P<0.01);与模型组比较,电针24h组及72h组Ngb阳性表达、Ngb及p38MAPK蛋白表达水平也均明显升高(P<0.05,P<0.01)。结论:电针百会、水沟穴对脓毒性脑病大鼠具有脑保护作用,其机制可能与上调脑组织Ngb表达,从而正性调控p38MAPK信号通路、促进神经元突起生长相关。