简介:摘要目的探讨生长抑素受体5(SSTR5)活化在垂体催乳素腺瘤中激素分泌中的抑制作用。方法使用大鼠GH3细胞(美国细胞中心,ATCC)作为垂体催乳素腺瘤的体外细胞模型,外源性转染SSTR5质粒构建SSTR5过表达模型,使用流式细胞仪分选技术分选转染阳性细胞,并用蛋白质印迹法(Western blot)加以验证,荧光素酶报告基因检测PRL-luc启动子活性,CellTiter Glo试剂盒及酶联免疫吸附试验(ELISA)试剂盒检测细胞活性及细胞上清PRL的浓度。使用SSTR5激动剂BIM23052进行细胞刺激,检测空白组和转染组细胞上清PRL浓度及细胞活性。应用Student’s t检验和单向方差分析进行组间比较。结果蛋白印迹法检测流式分选SSTR5过表达质粒转染细胞GH3SSTR5可发现SSTR5蛋白高表达,单纯过表达SSTR5显著降低PRL-luc报告基因的活性[(71.07±4.38)%比 (99.96±0.88)%,t=6.47,P<0.01],抑制细胞上清PRL的分泌[(65.24±10.71)%比 (100.00±4.44)%,t=2.99,P<0.05];使用不同浓度的BIM23052刺激GH3SSTR5细胞,PRL-luc报告基因活性呈现U型剂量反应曲线,BIM23052浓度在10 nmol/L时达到最大抑制效应[(45.23±1.21)%对(99.96±1.24)%,t=31.62,P<0.01],而BIM23052并不影响SSTR5空载质粒mock转染组GH3mock细胞的PRL-luc报告基因活性;BIM23052并不影响GH3mock细胞上清PRL的浓度,但BIM23052可显著抑制GH3SSTR5细胞上清PRL的浓度[(57.10±6.41)%比 (96.14±6.82)%,t=4.16,P<0.01]。BIM23052并不改变GH3mock和GH3SSTR5细胞的活性。结论SSTR5活化可以通过抑制PRL mRNA的转录抑制垂体催乳素腺瘤激素的异常分泌。
简介:摘要目的构建Spink5基因条件性敲除小鼠模型并鉴定其表型。方法采用CRISPR/Cas9技术构建基因型为Mb1cre/+Spink5floxp/floxp的B淋巴细胞Spink5基因条件性敲除小鼠(敲除组),以基因型为Mb1+/+Spink5floxp/floxp的小鼠为对照组。提取小鼠脾脏单个核细胞并经流式细胞荧光技术分选B淋巴细胞及非B淋巴细胞,然后分别进行基因型鉴定及淋巴上皮Kazal型抑制物(LEKTI)蛋白表达的测定。切取小鼠皮肤行HE染色,测量表皮厚度,免疫荧光染色测定小鼠皮肤LEKTI蛋白荧光强度。组间比较采用配对t检验或两独立样本t检验。结果基因型鉴定结果表明,成功构建稳定的B淋巴细胞Spink5基因条件性敲除小鼠模型。Western印迹显示,条件性敲除小鼠B淋巴细胞中LEKTI蛋白相对表达量为0.01 ± 0.02,显著低于非B淋巴细胞(0.66 ± 0.11,t = 9.99,P < 0.001)及对照组小鼠B淋巴细胞(1.08 ± 0.13,t = 13.78,P < 0.001)。39只敲除组小鼠中,4只出现皮肤干燥、散在鳞屑性肥厚型斑丘疹。敲除组皮损部位表皮厚度为(90.42 ± 21.31)μm,显著高于其非皮损部位[(29.71 ± 3.63)μm,t = 5.05,P = 0.002]及对照组表皮[(12.42 ± 2.21)μm,t = 6.74,P < 0.001]。免疫荧光检测显示,敲除组皮损处LEKTI蛋白荧光强度为46.21 ± 1.21,非皮损处为46.62 ± 2.13,与对照组(47.69 ± 1.71)差异均无统计学意义(P > 0.05)。结论成功构建了B淋巴细胞Spink5基因条件性敲除小鼠模型,为进一步探究Netherton综合征皮肤屏障缺陷伴免疫功能异常的机制提供研究基础。
简介:【摘要】目的:叶酸也叫维生素B9,是一种水溶性维生素,属于女性机体中的重要养分之一,孕妇怀孕早期缺乏叶酸会发生巨幼红细胞贫血等疾病,同时也对胎儿造成一定的影响,易发生神经管畸形等疾病,还将影响智力和体力,因此本文探析5,10-亚甲基四氢叶酸对不良妊娠临床干预效果。方法:入组样本为2021年1月-2022年1月在我院妇产科进行诊疗的80例育龄妇女,对比两组孕产妇不良妊娠结局和婴儿缺陷情况以及对治疗的满意度。结果:叶酸治疗组治疗后不良妊娠率为10.0%,婴儿畸形率为2.63%,对治疗的满意度为97.5%,均明显优于常规治疗组,P<0.05说明存在对比意义。结论:对孕产妇补充叶酸,增加5,10-亚甲基四氢叶酸能够有效降低其不良妊娠的情况和婴儿的畸形率,获得大部分患者对治疗的满意度,说明四氢叶酸在生物体的生长发育繁殖过程中起很重要的作用,故此项治疗方案应当在临床上大力推荐。
简介:【摘要】目的:通过5例跖跗关节(Lisfranc)轻度损伤漏诊分析,提高Lisfranc关节轻度损伤X线诊断的准确性。
简介:摘要目的建立一种应用脱氧胆酸钠沉淀和离子交换色谱技术纯化5型肺炎球菌荚膜多糖的方法。方法5型肺炎球菌发酵液经离心、超滤、脱氧胆酸钠沉淀处理后,再经过Capto Q离子交换层析,得到精制多糖原液。依据中国药典2020年版三部的相关制检规程对精制多糖原液进行检定分析。结果精制多糖原液中蛋白和核酸含量分别不超过3.0%和0.1%,糖醛酸含量不低于18.4%,氨基己糖含量不低于22.7%,各项指标均符合中国药典标准;且多糖回收率达到60.0%以上。结论建立的5型肺炎球菌荚膜多糖纯化工艺可替代使用乙醇或苯酚的工艺,且操作步骤简便,具有很好的规模化应用前景。
简介:摘要目的总结抗代谢型谷氨酸受体5(mGluR5)脑炎的临床特点及影像学表现,以提高临床医生对该病的认识。方法报道郑州大学第一附属医院神经内科2020年12月收治的1例抗mGluR5脑炎患者的临床资料,并结合国内外数据库中已报道的13例单一抗mGluR5脑炎患者资料进行汇总分析。结果14例患者主要症状为精神行为异常(13/14)、认知障碍(11/14)、睡眠障碍(9/14)、癫痫发作(8/14)、意识水平下降(6/14)及运动障碍(4/14)。4例患者头部MRI异常,包括T2像上右侧颞叶内侧高信号、双侧脑桥上部高信号,FLAIR像上双侧顶枕叶后部皮质高信号及T2/FLAIR像上双侧额叶、右侧枕叶/小脑高信号。6例患霍奇金淋巴瘤。治疗包括免疫治疗和抗肿瘤治疗。14例患者中共有3例复发,使用免疫疗法后症状仍有显著改善。除1例患者院内死亡外,末次随访时(中位时间20个月),6例完全恢复,7例部分恢复。结论抗mGluR5脑炎症状不局限于边缘系统,存在复发可能,免疫治疗效果良好;患者多合并霍奇金淋巴瘤。
简介:摘要目的研究小鼠附睾上皮表达的CD147对精子成熟的影响。方法利用小鼠附睾4-5段主细胞特异表达的Lcn5-Cre小鼠和CD147flox/flox繁育,获得24只CD147在附睾4-5段特异敲除的小鼠(CD147 cKO-Lcn5)和21只CD147flox/flox对照小鼠。通过计算机辅助精子活力检测(computer-aided sperm analysis,CASA)、A23187诱导精子的顶体反应以及体外受精(invitro fertilization,IVF)等方法评估CD147对小鼠精子功能的影响。结果小鼠附睾头部4-5段敲除CD147后,精子活力和顶体反应的差异均无统计学意义(均P>0.05)。IVF实验结果显示,CD147 cKO-Lcn5小鼠2-细胞率(74.03%±2.93%)相较于CD147flox/flox小鼠(90.59%±2.39%)显著降低(P=0.012)。结论附睾头部4-5段敲除CD147后对精子活力和顶体反应无显著影响,IVF后2-细胞率显著被抑制。
简介:无
简介:小儿便秘是小儿排便时间延长,便次减少,或排出困难的一种消化系病证。近5年推拿治疗本病的临床研究主要有单纯推拿法、推拿联合口服药、推拿联合穴位贴敷及推拿联合针灸等,且大部分研究集中在联合疗法的功效研究和优势探索方面。本文就对近5年推拿治疗小儿功能性便秘的临床研究文献做一综述,以求探究近年来推拿治疗本病的最新研究内容与方向,为今后的临床应用提供参考依据。
简介:摘要目的总结慢性肾脏病(CKD)3~5 D期患者饮食管理的相关证据,为临床护理工作提供参考。方法确立循证护理问题,按照"6S证据模型",应用计算机系统检索有关CKD 3~5 D期患者饮食管理的相关文献,包括计算机决策支持系统证据、指南、最佳证据总结、系统评价等,检索时限为建库至2020年9月。指南质量评价由2名研究护士及1名肾脏病学博士独立完成,非指南文献的质量评价由2名研究护士独立完成,1名循证导师参与决策。应用Joanna Briggs Institute (JBI) 2014版干预性研究证据预分级系统对证据进行证据提取、评价及等级划分。结果共纳入符合要求的文献19篇,其中指南5篇、系统评价8篇,随机对照试验研究4篇、临床决策1篇、国家标准1篇,最终从饮食/营养评估、饮食管理、团队合作与教育3个方面总结出22条CKD 3~5 D期患者饮食管理的最佳证据。结论本研究总结的CKD 3~5 D期患者饮食管理等的最佳证据,为临床实践提供一定参考,以提升慢性肾脏病患者饮食管理质量,改善患者临床结局。