简介:目的探讨荧光定量PCR检测HBV-DNA载量与乙肝病毒标志物常见模式的关系。方法回顾性分析同时检测乙型肝炎病毒和荧光定量PCR255例患者,统计HBV–DNA检测含量值和酶联免疫吸附检测的HBV–M模式值,进行对比。结果53例大三阳标本中,HBV–DNA阳性47例平均拷贝数为2.25×107/ml;在7例HBsAg、HBeAg标志物阳性的标本中,HBVDNA阳性5例,平均拷贝数5.40×106/ml;在57例小三阳标本中,HBV-DNA阳性者为24例,平均拷贝数为7.69×10/ml;而在122例HBV-M标志物全阴性的标本中,仍有3例检出HBV-DNA阳性,平均拷贝数为4.54×10/ml。结论在各种HBV标志物模式中,以HBeAg阳性者的病毒复制水平最高,荧光定量PCR检测HBV-DNA载量可表达HBV感染和复制状态。
简介:探讨慢性乙型肝炎轻度患者血清HBVDNA载量与肝组织病理学变化的关系。方法根据血清HBeAg状态将310例慢性乙型肝炎轻度患者分为HBeAg阳性和HBeAg阴性,应用荧光定量PCR技术检测血清HBVDNA水平,常规进行肝活检术和病理学观察,分析血清HBVDNA载量与肝组织病理学变化的关系。结果224例HBeAg阳性患者肝组织炎症程度以G0(42.0%)为主,纤维化程度以S0(58.0%)为主;86例HBeAg阴性患者炎症程度以G0(29.1%)、G1(30.2%)、G2(34.9%)为主,纤维化程度以S0(51.2%)为主;HBeAg阳性患者血清HBVDNA水平与肝组织炎症程度无明显相关(r=-0.098,P>0.05),与纤维化分期间存在负相关关系(r=-0.309,P<0.01);HBeAg阴性患者血清HBVDNA水平与肝组织炎症程度存在正相关关系(r=0.306,P<0.01),与纤维化程度无明显相关(r=0.112,P>0.05)。结论HBeAg阳性与HBeAg阴性患者血清HBVDNA载量与肝组织病理学变化的关系存在显著差别,应区别分析其临床意义。
简介:目的实时荧光定量PCR测定马尔尼菲篮状菌病组织样本中马尔尼菲篮状菌的载量。方法收集马尔尼菲篮状菌病患者的皮肤病理切片、淋巴结活检组织,提取总DNA,采用实时荧光定量PCR技术检测样本中马尔尼菲篮状菌载量。结果皮肤病理切片、淋巴结活检组织中马尔尼菲篮状菌载量阳性。病理切片平均菌载量3.01×104copies(1.07×104~7.26×104copies),淋巴结活检组织中马尔尼菲篮状菌载量4.68×105copies。结论荧光定量PCR能高效检测皮肤病理切片、淋巴结活检组织中马尔尼菲篮状菌载量,对马尔尼菲篮状菌病诊断有一定的价值。
简介:目的观察慢性乙型肝炎(CHB)患者外周血单个核细胞干扰素刺激基因(STING)和I型干扰素(IFN)α、βmRNA的表达,及其与乙型肝炎病毒载量之间的关系。方法选择2016年2月—2017年2月在武汉大学人民医院感染科未经治疗的CHB患者88例(CHB组),以及同期进行体检的健康者74例(对照组),通过实时荧光定量PCR检测STING,IFN-α和IFN-βmRNA表达,用2-ΔΔCT的方法计算相对表达量,并对计算结果进行统计学分析。结果CHB组患者外周血中STING,IFN-α和IFN-βmRNA的表达分别是健康对照组的2.95、3.14、2.01倍,两组间比较差异均有统计学意义(t值分别为-4.72,-3.41,-2.31,均P<0.05);CHB患者STING相对表达量HBVDNA病毒载量≤104IU/mL组分别是HBVDNA病毒载量104~105IU/mL组、105~106IU/mL组和>106IU/mL组的2.98、3.76、3.97倍,差异有统计学意义(P<0.05);CHB组患者STING与IFN-α、IFN-βmRNA表达呈正相关性(r值分别为0.475、0.503,均P<0.05)。结论CHB患者体内STING表达升高,且STING高表达影响HBV复制。
简介:唐代宗李豫时宰相元载,是中国历史上巨贪之一,抄他家时,起赃无数,其中以搜出来的八百石胡椒,最为骇人听闻.这种调味品,日常用量极少,一餐饭,数粒即足以吃得口麻舌辣,头汗耳热.而按中国历史博物馆藏唐武德元年的铜权,知道唐代的一石,相当于今天公制的79320克.那么,从其家抄没的这一票赃物,差不多有60多吨.这就得需要上百峰骆驼,才能从印度洋的海滨,绕喜马拉雅山的南麓,经克什米尔,到南疆,运抵长安.
简介:摘要目的评价阴道自取样本高危型HPV(HR-HPV)分型检测用于子宫颈癌初筛的筛查效率,并探讨以不同HR-HPV亚型组合联合医生取样本的细胞学检查或HR-HPV病毒载量检测对自取样本HR-HPV阳性者进行二次筛查的筛查效率。方法本研究的数据来自2009年4月至2010年4月深圳市子宫颈癌筛查项目Ⅱ(SHENCCAST-Ⅱ)数据库,收集其中有自取样本的基质辅助激光解吸电离-飞行时间质谱分析(MALDI-TOF-MS)技术进行的HR-HPV分型检测结果以及医生取样本的第2代杂交捕获技术(HC-Ⅱ)检测的HR-HPV病毒载量结果、子宫颈细胞学检查结果的妇女共8 556例,转诊阴道镜检查者均有活检组织病理检查结果。分析自取样本HR-HPV分型检测作为子宫颈癌初筛方案(即方案1)时,基于其不同HR-HPV亚型组合[包括5个亚方案,即1a:HPV 16和(或)18型(HPV 16/18型)阳性;1b:HPV 16/18/58型阳性;1c:HPV 16/18/58/31/33型阳性;1d:HPV 16/18/58/31/33/52型阳性;1e:所有14种HR-HPV亚型中任一亚型阳性]的阴道镜转诊方案检出子宫颈上皮内瘤变(CIN)Ⅱ及以上病变(CIN Ⅱ+)、CIN Ⅲ及以上病变(CIN Ⅲ+)的敏感度与特异度;并以自取样本HR-HPV初筛阳性者即以方案1中的各亚方案为基础,对比分析其联合医生取样本的细胞学检查(即方案2,包括2a、2b、2c、2d、2e共5个亚方案)或HR-HPV病毒载量检测(即方案3,包括3a、3b、3c、3d共4个亚方案)作为分流指标的二次筛查方案的筛查效率。结果(1)本研究纳入的8 556例妇女的年龄为(38.9±7.9)岁,自取样本检测的HR-HPV阳性率为13.77%(1 178/8 556),其中HPV 16/18型、HPV 16/18/58型、HPV 16/18/58/31/33型和HPV 16/18/58/31/33/52型组合的阳性率分别为3.16%(270/8 556)、5.14%(440/8 556)、6.66%(570/8 556)和9.81%(839/8 556)。医生取样本的HR-HPV病毒载量≥10相对光单位/临床阈值(RLU/CO)者占8.87%(759/8 556),细胞学结果≥未明确诊断意义的不典型鳞状上皮细胞(ASCUS)者占12.05%(1 031/8 556)。(2)方案1中,所有14种HR-HPV亚型中任一亚型阳性者(即方案1e)行阴道镜检查对检出CIN Ⅱ+、CIN Ⅲ+的敏感度在所有方案(包括3个方案共14个亚方案)中最高(分别为92.70%、94.33%),但是特异度和阳性预测值(PPV)在所有方案中最低(特异度分别为88.44%、87.58%,PPV分别为18.34%、11.29%),且阴道镜检查率在所有方案中最高(为13.77%)。方案1的其他亚方案(即方案1a、1b、1c、1d)中,检出CIN Ⅱ+、CIN Ⅲ+的特异度方案1a最高,分别为97.92%、97.69%,其他亚方案也较高,均达90%以上;但敏感度方案1d最高(分别为88.41%、92.20%)。(3)HPV 16/18型阳性者直接行阴道镜检查(即方案1a),非HPV 16/18型阳性者行医生取样本细胞学检查或HR-HPV病毒载量检测,细胞学结果达到阈值(≥ASCUS,即方案2a)或病毒载量达到阈值(≥10 RUL/CO,即方案3a)者行阴道镜检查,其阴道镜转诊率低,而筛查CIN Ⅱ+、CIN Ⅲ+的敏感度和特异度则较高。若在此两个二次筛查方案基础上,首先根据自取样本HR-HPV分型检测结果,依次增加另外4种HR-HPV亚型(即HPV 58、31、33和52型)阳性者行阴道镜检查,再以细胞学检查或病毒载量检测结果进行二次分流,筛查CIN Ⅱ+、CIN Ⅲ+的敏感度也相应提高。结论以自取样本HR-HPV分型检测为子宫颈癌初筛方案,以及其联合细胞学检查或病毒载量检测进行二次筛查的方案,可以在筛查CIN Ⅱ+、CIN Ⅲ+的敏感度、特异度以及阴道镜检查率之间获得较好的平衡;将HPV 58、31、33、52型纳入HPV 16/18型阳性的初筛分流指标,并联合细胞学检查或病毒载量检测的序贯二次筛查,可进一步提高筛查效率。
简介:摘要目的构建包载骨形态发生蛋白(BMP)-4的腺病毒并利用其骨骼肌内异位成骨特性,探索移植异位形成的自体骨进行骨缺损修补的体内效果。方法2018年6月至2020年3月,将BMP-4基因构建入AAV载体内,纯化出AAV-BMP-4。将AAV-BMP-4吸附于明胶海绵(Gelfoam)上并植入郑州大学实验动物中心SPF饲养室饲养的SCID小鼠的股肌袋内,4周后进行AAV-BMP-4的活性测定。在小鼠背部皮下应用AAV-BMP-4,观察骨骼肌肉诱导异位成骨,待骨组织形成稳定后,取出这些骨组织移植入事先制备好的小鼠的颅骨缺损模型中,观察其骨缺损修复效果。结果成功构建出纯化后浓度达5×1012 vp/ml的AAV-BMP-4病毒颗粒。病毒颗粒植入小鼠的股肌袋内可成功诱导异位骨组织的形成,小鼠背部皮下植入AAV-BMP-4+Gelfoam复合体后4周出现了少量的新生骨组织,骨量达1 cm×2 cm×2 cm。X线和MicroCT的检查均证实了小鼠的背部皮下骨组织形成。经修剪移植入小鼠颅骨缺损模型处的骨组织在植入缺损处后,没有出现异常增生的现象,而是不断地随着时间的推移进行着外形的轻微改建,颅骨缺损得到了良好的修复。结论体外构建的AAV-BMP-4具有良好的生物学活性,AAV-BMP-4+Gelfoam在骨骼肌肉中可有效诱导成骨,利用新生骨组织可以成功地修复颅骨缺损的动物模型。移植的骨组织植入颅骨缺损后未出现过度生长的现象,且与宿主骨结合良好。