抗β2-糖蛋白I抗体在系统性红斑狼疮诊断中的临床应用

抗β2-糖蛋白I抗体在系统性红斑狼疮诊断中的临床应用

周蓓1黄文渊

周蓓1黄文渊2

（1浙江省杭州萧山区河上镇社区卫生服务中心检验科311265）

（2浙江省杭州萧山区第三人民医院311265）

【摘要】目的了解抗β2-糖蛋白I抗体(抗β2-GPI抗体)及亚型与系统性红斑狼疮(SLE)的关系及在诊断中的价值。方法应用间接免疫荧光法检测100例SLE患者、39例疾病对照组类风湿关节炎(RA)7例、系统性硬化病(SSc)5例、干燥综合征（SS）19例、自身免疫性肝病4例、MCTD4例)患者和30例正常人血清中的抗β2-GPI抗体、抗心磷脂抗体(抗ACL抗体)水平，并分析与临床的关系。结果100例SLE患者抗ACL抗体阳性率为39%，特异性67.7%，与疾病组比较有显著性差异。100例SLE患者抗β2-GPI抗体的滴度显著高于疾病组和正常组，联合检测抗β2-GPI抗体、抗ACL抗体的阳性率高于疾病组，且显著高于单独检测抗β2-GPI抗体、抗ACL抗体的阳性率。抗β2-GPI抗体Ig-M与SLE存在相关性。结论抗β2-GPI抗体在SLE中具有敏感性，联合检测抗β2-GPI抗体和抗ACL抗体能辅助诊断SLE，抗β2-GPI抗体Ig-M在SLE诊断临床意义更大。

【关键词】抗β2-糖蛋白I抗体抗心磷脂抗体间接免疫荧光法系统性红斑狼疮

【中图分类号】R446【文献标识码】A【文章编号】2095-1752（2014）03-0150-02

抗磷脂抗体(anti—phospholipidantibody，APL)是一组主要针对磷脂结合蛋白的异质性抗体。如抗心磷脂抗体(ACL)、狼疮抗凝物(LAG)以及抗β2-糖蛋白(抗β2-GP)I抗体等。抗β2-GPI抗体是以磷脂结合蛋白为靶抗原的APL，这种抗体除在系统性红斑狼疮(SLE)中有检出外，还存在于其他疾病中，如干燥综合征(ss)、类风湿关节炎(RA)、硬皮病、传染性单核细胞增多症以及免疫缺陷病毒感染等。在自身免疫性疾病中，APL常与动静脉血栓形成、反复流产以及血小板减少有关。1990年，研究者发现在自身免疫性疾病中APL识别的是磷脂结合蛋白β2-GPI，而在感染性疾病中APL则主要识别心磷脂。目前，一般认为ACL和LAC识别的主要靶抗原有β2-GPI、凝血酶原及其与磷脂的复合物，而抗β2-GPI抗体与血栓形成密切相关，较ACL更为特异[1,2]。对SLE的深入研究发现，抗β2-GPI抗体与SLE临床症状的多样性及病程发展有密切关系，通过检测SLE患者血液中的抗体，可以评价该抗体在SLE中可能的临床意义。

1资料与方法

1.1一般资料

患者均随机选自浙江省人民医院2012年12月至2013年12月的住院患者。在100例SLE患者中，男性5例，女性95例，年龄10～74岁，平均38岁；疾病对照组39例，男性5例，女性34例，年龄28～82岁，平均53岁；正常健康检查者30名，男性11名，女性19名，年龄20～79岁，平均38岁。对照组年龄、性别与SLE组基本匹配，所有病例均符合美国风湿病学会(ACR)各自的诊断标准。全部检测对象均留取静脉空腹血3mL，分离血清至-20℃冻存待检。

1.2方法

1.2.1抗β2-GPI抗体的测定：采用间接免疫荧光法试剂盒(德国欧蒙医学诊断有限公司)检测患者血清中总的抗β2-GPI抗体(IgG、IgM、IgA)≥20RU／ml滴度的判定为阳性。

1.2.2实验室检查项目及临床相关资料：所有实验室检查项目以及临床资料均由浙江省人民医院检验室数据库中获得。实验室检查项目包括：抗核抗原抗体(ANA)、抗dsDNA抗体、抗mDNA抗体、抗核糖核蛋白(RNP)抗体、抗SSA抗体、抗SSB抗体、SCL70抗体、JO1抗体、P蛋白1、SM抗体、U1MP抗体、抗中性粒细胞胞质抗体(ANCA)、凝血酶原时间(PT)以及活化的部分凝血活酶时间(APTT)等。SLE活动性指数参照SLE疾病活动评分(SLEDAI)法。

1.3统计学分析

应用SPSS13.0软件作统计学分析，计量资料做t检验和(或)Spearman相关性分析，分类资料做x2检验。P<0.05为差异有统计学意义。

2结果

2.1抗β2-GPI抗体测定结果：试验结果表明，100例SLE患者中，抗β2-GPI抗体阳性者39例(39％)，而非SLE疾病对照组39例患者中，仅10例阳性(25.6％)，正常组30例中抗β2-GPI抗体阳性3例（10%）。该抗体在SLE中的敏感性和特异性分别为39％和67.7％，见表1。此外，SLE组中抗β2-GPI抗体的平均滴度(34.11RU／m1)明显高于正常组(11.11RU／m1)和疾病组(25.86RU／m1)，差异有统计学意(P<0.05)。

2.2抗β2-GPI抗体、抗ACL抗体在SLE中的阳性率分析，抗β2-GPI抗体在SLE组和疾病组无明显差异，但联合检测抗β2-GPI抗体、抗ACL抗体的阳性率高于疾病组，且显著高于单独检测抗β2-GPI抗体、抗ACL抗体的阳性率。见表2

注:＊与正常组比较P<0.05

3讨论

β2-GPI又称载脂蛋白H，由肝细胞合成，在血浆中与脂蛋白结合，其第1、2,5功能区有大量带正电荷的氨基酸序列，与带负电荷的物质结合后，β2-GPI将其隐藏的抗原表位显露，导致抗β2-GPI抗体的产生[3]。体外试验发现：抗β2-GPI可干扰活化的蛋白C灭活因子V；活化内皮细胞，加速单核细胞黏附；促进巨噬细胞摄取氧化的低密度脂蛋白(LDL)；与血小板结合并活化血小板等。

本研究检测了SLE患者的抗β2-GPI抗体(IgG、IgM、IgA)水平。结果显示，抗β2-GPI抗体在SLE中的敏感性和特异性分别为39％和67.7％。SLE组中抗β2-GPI平均滴度明显高于对照组，说明β2-GPI及其抗体可能在SLE中具有一定的临床意义。目前，关于抗β2-GPI抗体的检出率，国内外报道不一，Mok等[4]报道在SLE中IgGβ2-GPI抗体的阳性率为7.7％；而Kaburati等[5]报道了抗β2-GPI抗体在SLE中占15％，此外，Gomez—Pachecol等[6]研究报道，而在本研究中，患者抗Β2-GPI抗体阳性(39％)，国内吕良敬等[7]用ELISA检测抗Β2-GPI抗体在APS患者中阳性率也仅为30％。存在检出率差异的原因可能有以下几种：①人选SLE患者的不同。患者的病情程度、免疫抑制剂及激素治疗，可能会影响抗β2-GPI抗体的检出率；②检测方法的差异。不同实验室β2-GPI的纯化以及ELISA所涉及的材料与方法等均可影响实验结果。周红等研究显示联合检测血清抗β2-GPI抗体、抗ACL抗体显著高于单独检测单一抗体在SLE中的阳性率[8]。在本研究也证实这点。

综上所述，抗β2-GPI抗体在SLE中具有一定的敏感性，联合检测ACL与抗β2-GPI抗体能够辅助诊断SLE，且在SLE中β2-GPIIg-M阳性率明显高于疾病组和正常组，而Ig-G和Ig-A型无统计学差异，说明β2-GPIIg-M在SLE诊断临床意义更大。

参考文献

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[2]RoubeyRAS，MaldonadoMA，ByrdSN．Comparisionofanenzynlelinkedimmunosorbentassayforantibodiestoβ2-glyeoproteinIandaconventionalantieardiolipinimmtmonssay．ArthritisRheum，l996，39：1606-1607．

[3]MatsuumE，Ig8mslliM，IgarashiY，eta1Molecularstudiesonphospholipid—bindingsitesandcrypticepitopesappearingonbeta2-glyeoproteinIstructurerecogniredbyantieard-iolipinantibodies．Lupus，1955，4(Suppl1)：7-13．

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[5]KaburatiJ'KuwanaM，YamamotoM，eta1．Clinicalsisnitlcance

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[6]Gomez—PaehecolL，VillaAR，DrenkardC，eta1．Serumanti—β2一glyeoproteinIandantieardiolipinantibodiesduringthrombosisinsystemiclupuserythematosuspatients．AmJMed，1999，106：417-423．

[7]吕良敬，陈顺乐，顾越英，等．β2糖蛋白I基因转染Hep一2细胞

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[8]周红王美美陈巧林,系统性红斑狼疮患者抗β2糖蛋白I抗体检测的意义.检验医学,2007,22:105-107.