假性血小板减少原因分析及解决方案

假性血小板减少原因分析及解决方案

李涛，周芳[1]*，杨永兰

云南省中医院检验科   650021

【摘要】目的：探讨假性血小板减少（pseudo thrombocytopenia, PTCP）的原因及解决方案，全面掌握引起血小板计数假性减少的原因，避免误报、漏报，保证检验质量，更好地为临床诊疗工作提供准确数据。方法：对我院血细胞分析仪检测的64例假性血小板减少样本进行血涂片染色复检、手工计数血小板。结果：64例假性血小板减少患者中，25例为EDTA依赖患者，15例存在大血小板的患者，20例为采血不顺或未及时充分混匀采血管，2例为冷凝集患者，2例为不明原因患者。仪器阻抗法血小板计数结果与手工计数血小板结果比较，具有明显差异。结论：采用手工计数血小板复检假性血小板减少标本，可保证结果的准确性。日常检验工作中，对不明原因血小板计数减低，应改用其他检测方法复查，避免误诊、漏诊。

【关键词】假性血小板减少；原因分析；解决方案

Cause Analysis and Solution of Pseudo Thrombocytopenia

Li Tao, Zhou Fang，Yang  Yong Lan

Yunnan provincial hospital of medicinal Chinese medicine  Laboratory  650021

Abstracts：Aim：Discuss the causes and solutions of pseudothrombocytopenia (PTCP), Comprehensively understand the causes of PTCP, avoid false alarms and omissions to ensure inspection quality, and better provide accurate data for clinical diagnosis and treatment.

Method：The 64 samples of PTCP detected by blood cell analyzers in our hospital were re-examined by blood smear staining and platelets were manually counted.  Results: Among the 64 patients with PTCP, 25 were EDTA-dependent patients, 15 had large platelets, 20 had blood collection problems that were not smooth or the blood collection tubes were not mixed sufficiently in time, 2 had cold agglutination, and 2 had unknown causes patient.There is a significant difference between the platelet counting results of instrumental impedance method and manual platelet counting. Conclusion: Using manual platelet counting to recheck PTCP specimens can ensure the accuracy of the results.In daily inspection work, for unexplained decreases in platelet count, other testing methods should be used for review to avoid misdiagnosis or missed diagnosis.

Key words：pseudo thrombocytopenia；Cause Analysis；Solution

血小板是血液的重要组成部分，主要功能是凝血和止血，修补破损的血管，还有保护内皮、参与内皮修复、防止动脉粥样硬化血小板减少是指血液中血小板计数低于参考值下限则称为血小板减少，轻度减低不会有出血风险，当血小板数量低于50×109/L则有会出现皮肤、牙龈、鼻粘膜、消化道等出血，甚至危及生命，由此可见血小板在生理性止血过程中起着至关重要的作用。引起血小板减少的原因有病理性的因素，也有假性减少的因素，尤其是后者，全面了解其原因找到解决方案才能为临床提供准确的血小板数值，是医疗检验工作中重要任务，用来协助临床医生判断患者有无出血倾向或者有无止血能力。

血细胞分析作为临床常规检测项目，血细胞分析仪在血细胞检测方面具有高效、快速、准确、重复性好等优点而被广泛应用。血细胞分析仪的主要原理有电阻抗和高频电导及激光散射联合检测法、光散射和细胞化学染色联合检测法、电阻抗和射频电导联合检测法、多角度激光偏振光散射检测法等，它们各有优点，但在检测过程中仍存在许多干扰因素，从而影响其计数的准确性，特别是血小板的计数，常有假性减少而导致计数不准确[1, 2]。现将本院2022年1月2022年12月内26280例血细胞分析样本中发现64例血小板计数假性减少的原因和解决方案归纳总结如下。

1资料与方法

1.1一般资料   选取我院2021年1月-2021年12月门诊及住院患者血细胞分析血小板数量低于80×109/L共6655例患者,样本均使用EDTAK2抗凝血,对血小板计数结果低于80×109/L的标本进行人工计数和涂片瑞氏染色镜检，对镜检时发现有血小板聚集的样本，重新抽血复查，共收集到64例不同原因引起血小板计数假性减少的样本, 其中25例为EDTA依赖所致假性血小板减少，15例为大血小板所致血小板计数减少，20例为采血不顺或未及时充分混匀采血管所致血小板计数减少，2例为冷凝集所致血小板计数减少，2例未找到原因。

1.2  仪器与试剂 希森美康SystemXN-2000全自动血细胞分析仪、原装配套试剂及质控品，日本OLYMPUS X-23显微镜，草酸铵血小板稀释液，配制参照《全国临床检验操作规程（第四版）》[3] ，瑞姬氏染液。

2 结果

2.1  EDTA依赖性血小板假性减少共25例。25例样本首次上机检测血小板结果均低于80×109/L，涂片瑞氏染色后镜下可见血小板聚集，随即通知患者采用枸橼酸钠抗凝管重新采血充分混匀后上机检测，计数结果均在正常参考值范围内，与人工显微镜计数结果一致，与初次检测结果存在差异。

2.2  大血小板所致血小板计数减少共15例。15例样本首次上机检测血小板数量多少不一，血小板直方图出现多峰、尾部抬高等，镜下未见血小板聚集，但可见大血小板数量增多，采用草酸铵法计数血小板报告准确数值。

2.3 采血不顺或未及时充分混匀采血管所致血小板假性减少共20例。20例样本首次上机检测血小板结果均低于80×109/L，随即涂片瑞氏染色，显微镜下可见血小板聚集，采血不顺利或未及时混匀采血管会使血液产生凝块，甚至产生肉眼看不到的微小凝集都会导致血小板假性减少，随即通知患者重新采血，及时混匀采血管，重新检测，结果正常。

2.4 冷凝集所致血小板计数减少2例。2例样本首次上机检测无结果或数量极低，肉眼可见管壁细沙样物质，且RBC、Hb、Hct三者关系明显不符，将样本置37℃水浴箱温浴30分钟后，上机检测，血小板计数结果均在正常范围之内，RBC、Hb、Hct三者之间关系相符。

2.5 不明原因致血小板计数减低2例。2例样本首次上机检测血小板结果均低于80×109/L，涂片瑞氏染色后镜下可见血小板聚集，重新使用EDTA K2管和枸橼酸钠抗凝管采血，上机检测血小板结果均低于80×109/L，整个过程采血顺利、及时充分混匀采血管，而后使用无抗凝剂的采血管采血后，即刻上机检测血小板计数结果正常。

3 讨论

3.1 EDTA抗凝剂的影响

EDTA作为全血细胞计数首选抗凝剂，在日常工作中偶尔也会发生致血小板聚集的现象，发生机制主要和某些特殊药物的使用、自身免疫性疾病、肿瘤以及毒血症等存在一定关系，也可能是EDTA会导致血小板膜表面某种隐蔽的抗原结构发生变化，并和血浆中的自身抗体进行结合，一旦结合后就会激活卵磷脂酶A，卵磷脂酶C等活性物质，从而活化血小板纤维蛋白受体，最终导致血小板与纤维蛋白聚集而出现团块。

3.2 大血小板的影响

血细胞分析仪电阻抗法计数血小板的阈值通常在2-30 fL，原理是根据细胞体积大小通过检测小孔产生的脉冲来区别和计数，许多病理情况下如白血病、肿瘤、急性心肌梗死、妊娠等血小板体积会偏大高达30fL以上，仪器会将这部分血小板错计为小红细胞或者白细胞而导致血小板假性减少[4]。此时可采用光学法（PLT-O）、荧光法（PLT-F）或人工显微镜计数重新测定，这样既消除小红细胞、红细胞碎片、微小细胞碎片、微小血小板的干扰，又避免将大血小板错计、漏计而造成的假性血小板减少，当然简单的方法还是草酸铵法血小板计数和推片染色镜检。

3.3 样本采集过程的影响

采血过程不顺利（如患者不配合、血管较细或血管不暴露、采血体位不正确等）、反复多次穿刺、压脉带绑扎时间过长等均可引起组织凝血因子混入血液中产生肉眼看不见的小凝块而引起血小板假性减少[5]。采血后不及时充分混匀导致抗凝不充分而引起血小板聚集，临床工作中常见于肥胖者、婴幼儿、老年人、肿瘤患者、长期输液者[6]。

3.4 冷凝集的影响

2例冷凝集素所造成的血小板假性聚集。目前各大医院检验均安装有空调等保暖设施，冷凝集现象较为少见

[7]，工作中一旦样本管壁出现肉眼所见的细沙样物质，为确保结果的准确性，可将血样放置于37℃水浴箱温浴30分钟后，再进行检测。

3.5 其他影响因素

冷凝集、血小板卫星现象、样本放置时间过久、低温、外科大手术后，使用促凝药后（维生素K1、维生素K3、止血敏等）都可发生血小板聚集从而导致计数减少。

综上所述，工作中遇到血小板数量显著减低，血小板直方图以及白细胞散点图异常报警，应引起高度重视进行复检，避免假性血小板现象发生，获得准确的血小板数据，保证检验质量，为临床诊疗提供可靠依据。

参考文献

[1]陈林, 张莉滟. 血细胞分析常见标本干扰因素及解决方法 [J]. 国际检验医学杂志 2010, 31 (4): 391-392.

[2]卢艳改, 任俏梅. 自动血细胞分析仪血小板计数的干扰因素分析 [J]. 山西医药杂志(下半月刊) 2010, 39 (009): 900-901.

[3]尚红, 王毓三, 申子瑜. 全国临床检验操作规程  [M].人民卫生出版社: 北京, 2015.

[4]周小棉, 邹晓. 假性血小板减少症研究进展 [J]. 中华检验医学杂志 2007, 30 (9): 1065-1067.

[5]赵华, 李代渝, 林江. 60例假性血小板减少原因分析 [J]. 重庆医学 2011, 40 (12): 1207-1209.

[6]孙媛媛. 门诊采血中心幼儿静脉采血的护理效果分析 [J]. 世界最新医学信息文摘 2018, 18 (08): 247-250.

[7]窦心灵, 樊玉兰, 柴凤霞, 柴丽, 许丽. 冷凝集现象对血常规多项参数检测结果的干扰及处理对策 [J]. 国际检验医学杂志 2016, 37 (4): 562-563.

李涛  13888236548   kalina109@126.com

云南省中医医院检验科  650021  

[1] 通讯作者：周芳（1972-），女，副主任技师，电话：15825289772，研究方向：临床检验及病理研究，Email：15825289772@qq.com