简介：摘要目的探讨宏基因组二代测序(mNGS)在免疫缺陷并发重症肺炎患儿中的应用，了解病原体分布，为临床经验性预防和治疗提供参考。方法收集2019年7月至2020年7月在我院PICU确诊为重症肺炎的免疫缺陷患儿的一般临床资料、传统检测方法报告及mNGS结果，评估两者与临床判断的一致性。结果23例患儿中，男15例，女8例，年龄1个月28 d～10岁，平均年龄(3.67±3.20)岁，共7例治愈，2例好转，14例死亡。均行mNGS检测，其中血标本21例，肺泡灌洗液标本2例。23例患儿中，单一感染者5例，混合感染15例。检测的病原中真菌15例(65.22%)，其中耶氏肺孢子菌12例，烟曲霉2例，白色念珠菌2例；病毒14例(60.87%)，其中巨细胞病毒10例(8例合并有耶氏肺孢子菌感染)，疱疹病毒3例，细环病毒2例(1例合并疱疹病毒感染)；细菌10例，其中不动杆菌3例，肺炎克雷伯杆菌1例，嗜麦芽窄食单胞菌1例，皮疽诺卡菌1例，葡萄球菌4例，地衣芽孢杆菌1例；支原体3例，且均为混合感染。mNGS的检验阳性率及与临床判断符合率均高于传统检验方法，差异有统计学意义(P<0.05)。共19例使用激素或免疫抑制剂，当发生重症肺炎时，使用时间1～6个月者达17例。结论免疫缺陷并发重症肺炎患儿多为混合感染，其常见病原菌为耶氏肺孢子菌及巨细胞病毒，使用mNGS可显著提高病原检出率，有效指导治疗。

简介：摘要目的探讨宏基因组二代测序(mNGS)在免疫缺陷并发重症肺炎患儿中的应用，了解病原体分布，为临床经验性预防和治疗提供参考。方法收集2019年7月至2020年7月在我院PICU确诊为重症肺炎的免疫缺陷患儿的一般临床资料、传统检测方法报告及mNGS结果，评估两者与临床判断的一致性。结果23例患儿中，男15例，女8例，年龄1个月28 d～10岁，平均年龄(3.67±3.20)岁，共7例治愈，2例好转，14例死亡。均行mNGS检测，其中血标本21例，肺泡灌洗液标本2例。23例患儿中，单一感染者5例，混合感染15例。检测的病原中真菌15例(65.22%)，其中耶氏肺孢子菌12例，烟曲霉2例，白色念珠菌2例；病毒14例(60.87%)，其中巨细胞病毒10例(8例合并有耶氏肺孢子菌感染)，疱疹病毒3例，细环病毒2例(1例合并疱疹病毒感染)；细菌10例，其中不动杆菌3例，肺炎克雷伯杆菌1例，嗜麦芽窄食单胞菌1例，皮疽诺卡菌1例，葡萄球菌4例，地衣芽孢杆菌1例；支原体3例，且均为混合感染。mNGS的检验阳性率及与临床判断符合率均高于传统检验方法，差异有统计学意义(P<0.05)。共19例使用激素或免疫抑制剂，当发生重症肺炎时，使用时间1～6个月者达17例。结论免疫缺陷并发重症肺炎患儿多为混合感染，其常见病原菌为耶氏肺孢子菌及巨细胞病毒，使用mNGS可显著提高病原检出率，有效指导治疗。

简介：摘要二代测序技术(next generation sequencing，NGS)具有极高的检测通量，相对低的检测成本，高度的准确性(accuracy)和精准性(precision)，是遗传病临床检测的有力工具之一。NGS实验室的检测流程是否规范，将直接影响NGS数据的稳定性、可靠性和有效性，将决定其是否能被用于遗传病的临床辅助诊断或筛查。因此，作为遗传病基因检测的重要环节之一，NGS实验室中流程的规范化与标准化非常重要。2019年5月，在第二届基因检测联盟会议上，针对如何规范NGS检测流程，从事遗传病临床诊治、实验室检测以及第三方基因检测机构的专家进行了全面充分的讨论，旨在规范基于NGS的基因检测流程，对检测流程中的前、中、后三个阶段(包括样本采集/接收/保存、NGS建库、上机测序及数据质控)的操作与实施提出了专业性的指导意见，以规范NGS技术在遗传病基因检测领域中的应用。本文根据此次研讨会上各行业专家的讨论，总结并发布NGS实验室检测流程的规范共识，以促进NGS实验室流程的规范化和标准化，推进我国NGS实验室在遗传病基因检测领域的快速和专业化发展。

简介：

简介：摘要由致病性拷贝数变异(pathogenic copy number variations, pCNV)导致的基因组病是出生缺陷的一个重要遗传学病因。近年来，随着基于孕妇血浆胎儿游离DNA高通量测序技术的发展、生物信息分析流程的完善以及大样本数据的积累，无创产前筛查(noninvasive prenatal screening, NIPS)胎儿pCNV疾病已开始应用于临床，国内对此技术的规范应用亟需专业的指导意见。基于此，本组专家就筛查的目标疾病和全流程临床规范应用细节达成技术共识，以期达到NIPS筛查pCNV疾病规范应用的目的。

简介：摘要目的探讨冠状动脉慢血流（SCF）患者与健康人群的差异基因及SCF发病涉及的信号通路和蛋白相互关系。方法收集2018年住院的SCF患者和同期健康体检者各43例，记录患者一般资料，采集血液测定糖代谢、脂代谢和肾脏代谢相关指标。血液单核细胞中提取RNA，通过RNA测序获得差异基因表达谱。并进行GO功能注释、KEGG通路富集和蛋白相互作用网络分析及表型分析。ELISA检测SCF患者和对照组炎症细胞因子的水平，实时荧光定量PCR（qPCR）验证差异基因。结果SCF组男性27例（63%），女性16例（37%），年龄（54.3±8.8）岁，对照组男性29例（67%），女性14例（33%），年龄（57.2±8.3）岁。SCF组有吸烟史、空腹血糖异常、血脂异常的比例及体重指数高于对照组（P<0.05）。SCF组和对照组存在117个差异基因，其中上调基因73个，下调基因44个。GO功能注释和KEGG通路分析发现，差异基因主要与抗原处理和呈递、细胞吞噬、免疫球蛋白A的肠道免疫网络、辅助型T细胞1（Th1）、Th2和Th17细胞分化通路相关。与对照组相比，SCF组炎症细胞因子白细胞介素-6、白细胞介素-10、肿瘤坏死因子-α和干扰素-γ的表达水平升高（P<0.05）。2组差异最显著的前12个基因中，11个qPCR分析与转录组结果一致，蛋白相互作用网络分析表明甲酰化多肽受体-2（FPR2）和凝血酶致敏因子3（THBS3）蛋白位于整个蛋白作用网络的核心位置。结论SCF患者与健康人群的基因存在差异。FPR2和THBS3等基因可能通过抗原处理和呈递以及Th17细胞分化等免疫相关通路影响SCF的发生和发展。

简介：摘要目的研究沧源县蠓携带版纳病毒的全基因及其遗传进化特征。方法2018年在沧源县采集蠓，研磨后将上清液接种BHK-21细胞进行病毒分离的同时用宏转录组学方法检测蠓携带病毒情况，用Perl、Mafft等软件进行病毒序列比对、同源性和分子遗传进化分析。结果通过宏转录组学方法，从CYC1801组中获得1株版纳病毒的全基因序列，对全基因进行分析显示，节段4和节段7与越南株亲缘关系较近，其余节段均与中国株亲缘关系较近，根据节段12基因序列的系统进化分析，CYC1801与A2基因亚型处于同一进化分支，属于A2型版纳病毒。结论沧源县蠓携带有版纳病毒并可能作为传播媒介引起疾病流行，需加强监测及防控。

简介：摘要目的了解云南省蝙蝠体表寄生蛛蝇中肯科伊病毒(Kaeng Khoi virus，KKV)的感染情况。方法2014年在保山市和2017年在瑞丽市采集蝙蝠体表寄生蛛蝇标本并进行鉴定，应用细胞组织培养法进行病毒分离，对阳性分离物进行序列扩增测序，对病毒全基因序列进行同源性和系统进化分析。结果用蛛蝇标本研磨上清液接种BHK-21细胞，从瑞丽市和保山市蛛蝇标本分离到3株阳性分离物(WDBC1704、WDBC1710和BSBC1406)，均能使BHK-21细胞出现圆缩、脱落的细胞病变。经RT-PCR和高通量测序扩增后，获得3株阳性分离物的全基因组序列。系统进化分析显示3株阳性分离物的S、M、L基因均与泰国分离的KKV原型株PSC-19在同一进化支。本次分离的3株KKV与云南省既往分离株WDBC1403亲缘关系最近，其中BSBC1406株又形成一个独立的小分支。序列对比显示3株分离株之间在M基因上存在较大差异，BSBC1406与其他2株相似度仅为78.0%~78.1%，开放阅读框区中Gc蛋白的氨基酸相似度均为85.3%。结论从云南蝙蝠寄生蛛蝇中新分离的3株KKV与原型株有较大差异，特别是BSBC1406株与其他分离株存在一定差异，可能已发生了变异，应加强云南省媒介昆虫携带KKV的监测及其与人类疾病关系的研究。

简介：摘要目的研究前列腺癌局部免疫细胞的浸润模式，探讨免疫细胞在前列腺癌发生发展中的作用。方法从基因表达综合（GEO）数据库下载正常前列腺及前列腺癌组织基因表达谱芯片数据集，通过R、SPSS软件计算两组中22种免疫细胞的比例，并比较两组之间免疫细胞比例的差异，计算前列腺癌组织中免疫细胞之间的相关系数。结果下载数据集GSE62872，得到样本共424例，包含正常前列腺组织160例、前列腺癌组织264例，每例样本均检测mRNA 20 228个，数据校正后使用反卷积算法得到22种免疫细胞的比例数据，采用P<0.01筛选样本，得到正常前列腺组织63例、前列腺癌组织57例。前列腺癌组织中浸润水平较高的免疫细胞包括：CD8+ T细胞[（23.48±6.16）%]、浆细胞[（18.46±5.74）%]、单核细胞[（12.15±3.82）%]、活化的NK细胞[（11.11±2.97）%]。构成比相关系数较大的免疫细胞包括：CD8+ T细胞与未活化的CD4+记忆性T细胞（r=-0.609，P<0.01），M0型巨噬细胞与M2型巨噬细胞（r=-0.596，P<0.01）。相比于正常组织，M1型巨噬细胞及未活化树突细胞浸润程度增加，差异均具有统计学意义（Z=-2.783，P=0.005；Z=-2.129，P=0.033）。结论前列腺癌肿瘤微环境中浸润的免疫细胞主要以CD8+ T细胞、浆细胞、单核细胞、活化的NK细胞为主，M0型巨噬细胞在肿瘤微环境的作用下主要向M2型分化，可能参与前列腺癌发生发展过程，为寻找潜在免疫治疗靶点提供新的线索。

简介：摘要目的探讨1例Au-Kline综合征(AKS)新生儿的临床表型与基因特征。方法回顾性分析2021年1月收治入安徽医科大学附属省儿童医院的1例AKS患儿的临床资料及基因变异信息，并以"Au-Kline syndrome""Au-Kline综合症""HNRNPK""AKS"为关键词进行检索，分别检索2000年1月1日至2020年12月31日的万方数据、中国知网、PubMed数据库的相关文献，总结分析该病临床特点及遗传学特征。结果本例患儿为男性，临床表现为喂养困难、肌张力低下、上颚缺如至悬雍垂处及特殊面容，家系全外显子组测序检测结果提示该例患儿HNRNPK基因发生移码变异c.478dupA(p.Ile160AsnfsTer7)。Sanger测序显示该例患儿的父母未见异常，可能为新发变异。查阅数据库未见该变异有收录，根据美国医学遗传学与基因组学学会变异评级指南评级为致病性(PVS1+PS2+PM2_Supporting)。通过文献检索，纳入研究AKS患儿14例，均为HNRNPK基因新发变异，临床表现均有生长发育迟缓、运动发育迟缓及不同程度智力障碍等，具有可辨识度的特殊面容，其余高频表型为先天性心脏畸形。结论HNRNPK基因c.478dupA移码变异导致提前终止编码氨基酸可能是该患儿发生AKS的遗传学病因。在鉴别诊断上对于先天性多发畸形伴智力障碍亦或歌舞伎综合征患儿时，临床医师应考虑AKS的可能性。

简介：摘要：在小学语文教学中教师应结合低年级学生特点来采用有效的教学模式，其中看图写话方式可发挥出有效的作用，符合学生的认知发展特点。为了加强教学的效果，教师应对看图写话教学充分运用。通过对看图写话在小学语文教学中开展的必要性的阐述，分析低年级语文教学中看图写话教学模式的应用，可使语文看图写话教学模式应用优势体现。

简介：摘要目的探讨肾移植受者继发新型冠状病毒感染的肺炎(COVID-19)临床特点、诊治和预后。方法回顾性分析2例肾移植受者继发COVID-19的病例资料，从临床表现、血常规、炎症因子、细胞免疫、胸部CT、治疗效果方面，对比《新型冠状病毒肺炎诊疗方案(试行第五版)》。 2例受者均以中低热起病，初期无咳嗽、乏力，血常规提示白细胞正常范围，淋巴细胞计数明显减少，C-反应蛋白增高，降钙素原稍偏高，细胞免疫极低，胸部CT提示双肺多发斑片状磨玻璃影。结果起病1周后2例受者均病情进展明显，与已报道的普通人COVID-19发病过程及影像学改变高度相似。给予抗病毒、停免疫抑制剂、中小量激素维持、丙种球蛋白静脉滴注、呼吸支持、避免继发感染及对症支持治疗。目前2例受者病情均明显好转，肾功能稳定，其中1例已康复出院。结论肾移植受者COVID-19临床表现与普通患者大体一致。虽无特异性的治疗COVID-19方法，但停用免疫抑制剂、中小剂量激素维持、积极恢复免疫力、及时给予呼吸支持是行之有效的。

简介：摘要目的探讨老年人群载脂蛋白E(ApoE)基因多态性与血脂代谢水平、老年常见慢性心脑血管病的相关性。方法回顾性分析，入选我院门诊和住院的老年患者4 322例，分析ApoE亚型在老年人群中的分布。分析600例老年人(动脉粥样硬化组321例，健康体检对照组279例)血脂相关生化指标，ApoE基因测定采用基因芯片法。结果ApoE亚型E3最常见为67.1%(2 898/4 322)；ApoE亚型在老年慢性心脑血管疾病中的分布与人群分布水平基本一致，但在神经退行性变的患病人群中，E4亚型的携带率高于E2亚型[(26.4%，152/576)比(12.2%，70/576)]，差异有统计学意义(P<0.01)；在动脉粥样硬化组与对照组患者中，携带ε2与ε4等位基因三酰甘油水平分别为(1.85±2.09)mmol/L比(2.00±1.44)mmol/L、(1.53±1.31)mmol/L比(1.84±1.32)mmol/L(均P<0.05)。三酰甘油(OR＝4.360，95%CI：2.150～8.844)、高密度脂蛋白胆固醇(OR＝0.486，95%CI：0.307～0.770)、低密度脂蛋白胆固醇(OR＝2.321，95%CI：1.020～5.281)及ApoE等位基因(OR＝0.335，95%CI：0.210～0.533)均为动脉粥样硬化的危险因素(均P<0.01)。结论ApoE多态性与老年患者血脂代谢水平有关，遗传因素可能是影响血脂代谢的因素之一，携带ε4等位基因者的血脂异常风险增加，心血管患病、神经退行性疾病患病率风险增加。

简介：摘要目的总结肾移植术后局灶节段性肾小球硬化(FSGS)复发的诊断、治疗及转归；探讨循环渗透因子组风险等级评估对FSGS复发的预测价值。方法总结2例肾移植术后FSGS复发受者的术前及术后临床病史、肾穿刺活检病理、循环渗透因子组风险等级评估、治疗方法及效果；分析循环渗透因子组风险等级评估与FSGS复发之间的关系。结果2例受者原发病均为原发性FSGS，24 h尿蛋白定量超过10 g，经移植肾活检确诊FSGS复发，术前的循环渗透因子组风险等级评估均为高风险。经过血浆置换联合利妥昔单抗，辅以雷公藤多甙治疗后，24 h尿蛋白定量明显下降，全身水肿减轻，肾功能稳定。结论肾移植术后复发FSGS经血浆置换联合利妥昔单抗治疗可以有效缓解症状；循环渗透因子组风险等级评估对预测FSGS复发风险可能有参考价值。

简介：摘要本文介绍郑州大学附属肿瘤医院1例骨髓增生异常综合征(MDS)异基因造血干细胞移植后二次复发受者，骨髓细胞学、流式免疫分型检测支持MDS复发，但染色体和供者细胞嵌合率以及移植后嵌合状态分析检测复发细胞为完全供者型，证实二次复发为供者源复发，进一步分析首次复发时出现的ASXL1突变消失，新出现RUNX1突变。表明血液肿瘤基因突变参与供者源MDS复发的过程，为了解造血干细胞移植后供者源MDS/急性白血病的发病机制提供启示。

简介：摘要目的研究抗氧化剂叔丁基对苯二酚(tBHQ)对早期糖尿病大鼠视网膜结构和功能的保护作用及其机制。方法选取8周龄健康清洁级雄性SD大鼠45只，采用随机数字表法将其分为正常对照组、糖尿病模型组和tBHQ干预组，每组15只；糖尿病模型组和tBHQ干预组采用一次性腹腔内注射链脲佐菌素(STZ)诱导糖尿病模型，正常对照组大鼠腹腔内注射等容量枸橼酸钠缓冲液；tBHQ干预组在STZ注射前2周喂食质量分数为1% tBHQ添加饲料，其余2个组大鼠喂食普通饲料；分别于造模后72 h、2周和4周尾静脉采血用于血糖检测。取造模成功的大鼠于造模后4周行视网膜电图(ERG)检测；采用苏木精－伊红染色法观察大鼠视网膜组织形态结构变化；采用TUNEL法观察视网膜组织各层细胞凋亡情况；Western blot法检测视网膜组织中蛋白激酶B(Akt)、p-Akt、内皮型一氧化氮合酶(eNOS)和p-eNOS的表达情况。另取体外培养的Müller细胞系rMC-1进行分组。正常对照组、甘露醇对照组、高糖组细胞分别在正常培养基、含5.5 mmol/L葡萄糖+24.5 mmol/L甘露醇的培养基、高糖培养基中培养72 h。tBHQ干预组细胞先于含5 μmol/L tBHQ的正常糖培养基中预处理24 h，然后于含5 μmol/L tBHQ的高糖培养基中继续培养72 h；磷脂酰肌醇3激酶(PI3K)抑制剂组细胞先于含5 μmol/L LY294002的正常糖培养基中预处理6 h，然后于含5 μmol/L LY294002及5 μmol/L tBHQ的正常糖培养基中继续培养24 h，最后于含5 μmol/L LY294002及5 μmol/L tBHQ的高糖培养基中继续培养72 h，收集各组细胞提取蛋白，Western blot法检测Akt、p-Akt、eNOS和p-eNOS的表达情况。结果造模后72 h、2周和4周，糖尿病模型组大鼠血糖较正常对照组和tBHQ干预组高，差异均有统计学意义(均P<0.01)。造模后4周糖尿病模型组大鼠暗适应ERG的a波、b波振幅较正常对照组和tBHQ干预组下降，差异均有统计学意义(均P<0.05)。组织病理学染色结果显示，与正常对照组相比，糖尿病模型组视网膜神经节细胞数目减少，内丛状层水肿增厚，内核层及外核层变薄，结构疏松且排列紊乱，而tBHQ干预组各结构较糖尿病模型组有所改善。TUNEL染色结果显示，糖尿病模型组大鼠视网膜细胞凋亡指数较正常对照组和tBHQ干预组高，差异均有统计学意义(均P<0.05)，且凋亡细胞主要存在于外核层。Western blot法检测结果显示，正常对照组、糖尿病模型组和tBHQ干预组大鼠视网膜组织p-Akt/Akt的相对表达量分别为0.76±0.11、0.52±0.10和1.14±0.31，p-eNOS/eNOS的相对表达量分别为0.83±0.06、0.52±0.08和1.03±0.13，糖尿病模型组大鼠视网膜组织p-Akt/Akt、p-eNOS/eNOS的相对表达量均较正常对照组和tBHQ干预组降低，差异均有统计学意义(均P<0.01)；正常对照组、甘露醇对照组、高糖组、tBHQ干预组和PI3K抑制剂组细胞p-Akt/Akt的相对表达量分别为0.95±0.38、0.94±0.27、0.33±0.25、1.32±0.37和0.24±0.09，p-eNOS/eNOS的相对表达量分别为0.86±0.11、0.74±0.29、0.45±0.29、1.28±0.22和0.73±0.29，高糖组细胞p-Akt/Akt、p-eNOS/eNOS的相对表达量较正常对照组和tBHQ干预组显著降低，差异均有统计学意义(均P<0.05)，PI3K抑制剂组p-Akt/Akt、p-eNOS/eNOS的相对表达量较tBHQ干预组明显降低，差异均有统计学意义(均P<0.01)。结论tBHQ对早期糖尿病大鼠视网膜结构和功能均具有保护作用，其保护作用机制可能与Akt/eNOS信号通路的活化有关。

简介：【摘要】：目的 观察分析联合应用二甲双胍与 来曲唑治疗多囊卵巢综合征 (PCOS) 合并不孕症患者的临床疗效，并观察其对患者内分泌水平的影响。方法 选择我院 2015 年 9 月 -2019 年 7 月收治的 PCOS 合并不孕患者 90 例作为本次的研究对象，随机将其分为两组：研究组（ n=45 ）与对照组（ n=45 ）。对照组患者采用盐酸二甲双胍治疗，研究组患者在对照组基础上采用来曲唑片治疗。观察比较两组患者治疗前后体质量指数（ BMI ）、子宫内膜厚度。检测比较治疗后两组血清垂体泌乳素 (PRL) 、睾酮 (T) 、雌二醇 (E2) 、空腹血糖（ FBG ）、空腹胰岛素（ FINS ）、胰岛素抵抗指数 (HOMA-IR) 水平。结果 两组患者治疗后 BMI 以及子宫内膜厚度均明显降低，差异有显著性（ P<0.05 ）。与对照组治疗后比较，研究组治疗后 BMI 以及子宫内膜厚度均明显降低，差异有显著性（ P<0.05 ）。与对照组比较，研究组患者治疗后血清 PRL 、 T 、 FBG 、 FINS 及 HOMA-IR 均明显降低， E2 水平明显升高，差异有显著性（ P<0.05 ）。结论 二甲双胍与 来曲唑可以显著改善 PCOS 导致不孕症患者的内分泌功能，改善患者体质量及子宫内膜厚度，值得进行大力的临床推广及应用。