简介：摘要目的观察巨噬细胞耐多药结核分枝杆菌(multidrug-resistant Mycobacterium tuberculosis, MDR-Mtb)感染模型的吞噬和杀菌功能特点，探讨其在吞噬杀菌过程中免疫应答和代谢功能的变化，为完善巨噬细胞在耐多药结核病(multidrug-resistant tuberculosis, MDR-TB)发生和发展中的作用机制提供依据。方法分别建立巨噬细胞MDR-Mtb和H37Rv株感染模型，采用菌落形成单位(colony-forming unit，CFU)计数、液相芯片技术和Cholesterol Assay试剂盒分别观察MDR-Mtb对巨噬细胞吞噬和杀菌功能、分泌细胞因子[Th1因子(IL-12/23 p40、IL-27和TNF-α)、Th2因子(IL-6和IL-10)]和胆固醇代谢的影响。采用SPSS25.0软件进行统计学分析，应用均值±标准差(Mean±SD)表示，比较采用t检验或F检验。以P<0.05为差异有统计学意义。结果(1)MDR-Mtb感染巨噬细胞后，胞内CFU计数逐渐增高，至感染后24 h达峰值；胞外CFU计数逐渐降低，至感染后24 h达低值。感染后48 h，胞内CFU计数较感染后24 h降低，胞外CFU计数则较感染后24 h增高(P<0.05)，均与感染后4 h相接近(P>0.05)。感染后8~48 h，MDR-TB组胞内CFU计数均低于H37Rv组，而胞外CFU计数则高于H37Rv组(P<0.05)。(2)MDR-TB组巨噬细胞上清液IL-12/23 p40、IL-27、TNF-α、IL-6和IL-10表达量均高于空白对照组(P<0.05)。与感染后4 h相比较，仅感染后24 h、48 h的TNF-α和IL-6表达量增高(P<0.05)。与H37Rv组相比较，MDR-TB组感染后48 h的IL-12/23 p40和TNF-α及感染后24 h的IL-6表达量降低，而其感染后48 h的IL-27表达量则增高(P<0.05)。(3)MDR-TB组感染后24 h、48 h胆固醇的表达量较感染后4 h降低，且低于空白对照组(P<0.05)，但与H37Rv组各时间点胆固醇表达量相接近(P>0.05)。(4)当感染后24 h MDR-TB组胞内CFU计数达峰值时，仅TNF-α表达量达峰值；当感染后48 h MDR-TB组胞内CFU计数降低时仅IL-6表达量达峰值。当感染后MDR-TB组胞内CFU计数呈现先增高后降低的趋势时，胆固醇表达量呈现降低趋势。结论MDR-Mtb感染巨噬细胞后可诱导其吞噬和杀菌功能，刺激相关Th1和Th2因子高表达，利用和消耗胆固醇。但此作用弱于H37Rv标准株。

简介：摘要目的评价以干扰素诱导蛋白-10（IP-10）为靶标的新型结核分枝杆菌特异性细胞免疫反应检测技术，即结核感染T细胞检测（PCR荧光探针法，简称IP-10.TB）在结核病辅助诊断中的性能，及该检测技术与结核感染T细胞斑点检测（T-SPOT.TB）技术的一致性。方法2018年3月至2019年11月，在首都医科大学附属北京胸科医院前瞻性纳入疑似结核病患者，并募集结核分枝杆菌低感染风险人群。所有入组者同时行外周血IP-10.TB检测和T-SPOT.TB检测，受试者操作特征曲线计算两种检测技术的诊断价值，两种检测技术的一致性分析采用kappa检验，IP-10相对表达量和释放γ-干扰素的斑点形成细胞数量的相关性分析采用Pearson检验。结果纳入结核病患者235例、非结核病患者110例、结核分枝杆菌低感染风险人群153例进行最终分析。IP-10.TB检测（3/498，0.60%）和T-SPOT.TB检测（6/498，1.21%）获得的不确定结果比例差异无统计学意义（P = 0.32）。在489例有效检测标本中，IP-10.TB检测的敏感度和特异度分别为91.3%（95%CI 86.8%~94.6%）和81.1%（95%CI 75.8%~85.7%），其中结核分枝杆菌低感染风险人群中的诊断特异度为98.0%（95%CI 94.4%~99.6%）；T-SPOT.TB检测的敏感度和特异度分别为93.0%（95%CI 88.9%~96.0%）和83.8%（95%CI 78.7%~88.1%），其中结核分枝杆菌低感染风险人群中的诊断特异度为100%（95%CI 97.6%~100.0%）。两种检测技术的诊断敏感度和特异度差异均无统计学意义（P>0.05）。两种检测技术的阳性符合率为91.0%（95%CI 87.5%~94.5%），阴性符合率为88.9%（95%CI 84.9%~92.9%），总符合率为90.0%（95%CI 87.3%~92.6%），一致性检验kappa值为0.80（95%CI 0.75~0.85，P<0.001）。结论IP-10.TB检测具有与T-SPOT.TB检测一致的诊断性能，可用于结核病辅助诊断。