简介:摘要目的通过体外间接共培养的方式,分析兔膝关节软骨单位对体外软骨细胞增殖、凋亡的影响。方法2个月龄新西兰兔6只,购自山西医科大学动物中心。双侧股骨全层软骨组织依次酶解消化获取软骨细胞,联合酶解搅拌消化获取软骨单位。按2×105个/孔浓度接种于Transwell双层细胞培养板。实验组:软骨单位接种于上室,软骨细胞接种于下室;对照组:下室接种软骨细胞,上室未接种。分别在第2、4、6、8天提取各组Transwell下室软骨细胞,通过脱氧核糖核苷酸末端转移酶介导的缺口末端标记法(TUNEL)染色荧光显微镜观察及磷脂结合蛋白V(Annexin V)和7-氨基-放线菌素D(7-AAD)标记流式细胞仪分析软骨细胞早期凋亡率。通过5-乙炔基-2’脱氧尿嘧啶核苷(EdU)染色荧光显微镜观察及增殖细胞核抗原(PCNA)标记流式细胞仪分析软骨细胞增殖率检测。两组间比较用t检验。结果流式细胞仪分析发现,第6天实验组软骨细胞早期凋亡率为(13.60±4.65)%,明显低于对照组[(24.76±2.69)%,t=8.271,P<0.01];第8天实验组早期凋亡率明显低于对照组[(28.75±4.26)%比(42.48±6.06)%,t=7.419,P<0.01]。EdU染色荧光显微镜检测发现,第6天实验组软骨细胞增殖率为(46.23±6.17)%明显高于对照组[(32.23±5.40)%,t=3.254,P<0.05]。PCNA标记流式细胞仪检测发现,第6天实验组软骨细胞增殖率为(76.60±5.85)%明显高于对照组[(62.73±6.69)%,t=5.573,P<0.01];第8天实验组增殖率为(64.65±8.44)%明显高于对照组[(44.35±7.97)%,t=7.722,P<0.01]。结论软骨单位延缓了间接共培养后期软骨细的早期凋亡,促进软骨细胞的增殖。
简介:摘要目的探讨小型猪多间室骨关节炎(OA)模型的制备并分析其特征。方法18个月龄健康雌性巴马小型猪6只,购自北京市实创世纪小型猪养殖基地。右后肢(RH)实施前交叉韧带重建联合髌骨脱位术制备多间室OA模型,为实验组。左后肢(LH)不做任何处理,为对照组。术后3个月安乐处死猪,收集LH和RH。离体状态下用X线、CT三维重建、磁共振成像(MRI)方法检查各组膝关节的影像学变化,并采用Kellgren-Lawrenc、全器官磁共振成像(WORM)评分系统评分。计量资料采用t检验或秩和检验;计数资料采用χ2检验。结果X线显示实验组膝关节有少量骨赘形成,偶见狭窄。Kellgren-Lawrence评分显示,对照组0级(n=3),Ⅰ级(n=3);实验组Ⅰ级(n=2),Ⅱ级(n=3),Ⅲ级(n=1),差异无统计学意义(χ2=3.600,P>0.05)。CT三维重建结果显示实验组膝关节面整体粗糙,尤其髌股关节面毛糙。MRI压脂序列像显示实验组膝关节软骨连续性较差。WORM评分显示,实验组滑车内侧关节面(M=2.25,Q1=2.00,Q3=3.25)、内侧髁关节面(M=2.00,Q1=2.00,Q3=2.25)、内侧平台关节面(M=1.50,Q1=1.00,Q3=2.00)、滑车外侧关节面(M=2.25,Q1=1.75,Q3=2.63)、外侧平台关节面(M=1.00,Q1=1.00,Q3=1.63)评分显著高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。T2值测量显示,实验组滑车内侧关节面(63.94±5.67,t=8.589)、内侧髁关节面(58.02±7.53,t=5.108)、内侧平台关节面(55.82±5.78,t=6.114)、滑车外侧关节面(56.76±8.30,t=7.288)、外侧髁关节面(54.76±3.64,t=25.650)较对照组T2值更大,差异有统计学意义(P<0.05)。结论前交叉韧带重建联合髌骨脱位术可以制备多间室OA模型并明确其影像学特征;MRI对早期OA的评估可能更加敏感、准确。
简介:本文依托西部交通项目课题”混凝土桥梁时变效应耦合作用研究(合同号2009318812009),以延安仕望河大桥为工程背景,对温度徐变耦合作用进行了耦合特性分析,首次在混凝土结构桥梁中考虑徐变与温度等时变效应之间的耦合作用影响,并且建立了考虑徐变效应和温度效应的耦合参数.对∞徐变模型进行修正,在系数c0(t,t')中引入温度T有C0(t,t,r)得出新的徐变与温度耦合公式.从而得出相关结论,修正耦合公式,使计算更加精确.