简介:摘要目的通过观察乙醛刺激的肝星状细胞生长速度的变化以及细胞中Wnt信号通路中主要下游分子及目的基因mRNA表达的改变,探讨乙醛刺激对肝星状细胞活化的作用机制。方法用乙醛刺激大鼠肝星状细胞,与同时正常培养的大鼠肝星状细胞为对照1。由MTT法绘制细胞生长曲线并对比。同时采用RT-PCR从mRNA水平观察Wnt信号通路相关指标的变化。结果从细胞生长曲线的对比可以清晰发现大鼠肝星状细胞在乙醛刺激后的生长和增殖速度明显高于正常细胞组。在乙醛刺激的大鼠肝星状细胞中,Wnt信号通路中β-catenin(β一链蛋白)的mRNA表达增强2。结论乙醛通过对大鼠肝星状细胞中Wnt信号通路的活化刺激大鼠肝星状细胞的增殖。
简介:摘要目的探究雌激素(17β-E2)调控人皮肤成纤维细胞(HSFB)增殖是否受到丝裂原活化蛋白激酶信号转导通路(MAPKs)的影响。方法原代培养HSFB,按干预因素的不同将第四代细胞分为6组空白对照组(A组)、17β-E2组(B组)、17β-E2+ICI-182780组(C组)、17β-E2+PD98059组(D组)、17β-E2+SP600125组(E组)和17β-E2+SB203580组(F组)。同步化处理各组细胞后,以17β-E2直接刺激或经上述受体拮抗剂及激酶抑制剂预处理后再以17β-E2刺激。收集细胞,提取总RNA和总蛋白,分别利用荧光定量PCR和Western-Blot技术检测各组细胞增殖细胞核抗原(PCNA)mRNA和蛋白的表达情况。结果1.B组的PCNAmRNA表达较A组显著增强(P<0.01),但C、D组与B组相比其表达被显著抑制(P﹤0.05);2.各组PCNA蛋白表达基本与其mRNA表达相一致。结论雌激素β受体(ERβ)及ERK/MAPK信号通路参与雌激素调控的HSFB增殖过程。
简介:目的探讨白藜芦醇(Res)对胃腺癌细胞(AGS)生长的影响及其与Wnt/β-catenin信号通路的关系。方法体外培养胃癌细胞株AGS,并以不同浓度Res(25、50、100μmol/L)干预24、48、72h后,四甲基偶氮唑蓝(MTT)法测定细胞抑制率;不同浓度Res干预24h流式细胞仪检测细胞周期,细胞免疫组化检测Wnt1、β-catenin、Lgr5的表达情况。实验数据以x±s表示,采用SPSS13.0软件进行统计分析,多组间比较采用单因素方差分析,两两比较采用t检验。P<0.05表示差异有统计学意义。结果不同浓度Res(25、50、100μmol/L)干预24、48、72h后,AGS细胞的状态变差,细胞形态变圆密度及数量减少,贴壁较差,细胞增殖抑制率分别为:25μmol/LRes作用24h组(0.2033±0.0207)、48h组(0.3949±0.0199)、72h组(0.5102±0.0155);50μmol/LRes作用24h组(0.3554±0.0207)、48h组(0.5157±0.0321)、72h组(0.6167±0.0248);100μmol/LRes作用24h组(0.5005±0.0199)、48h组(0.6251±0.0299)、72h组(0.7271±0.0147),细胞增殖抑制率呈时间依赖性与剂量依赖性(P<0.05);不同浓度Res作用24h后,检测G1期细胞所占比分别为空白组(48.33±0.21)%、25μmol/LRes作用组(52.61±0.41)%、50μmol/LRes作用组(58.53±0.48)%、100μmol/LRes作用组(71.16±0.20)%,细胞周期阻滞在G0/G1期(P<0.05);不同浓度Res干预24h后100μmol/L组(207.36±0.52)、50μmol/L组(202.65±0.53)、25μmol/L组(197.13±1.07)Wnt1灰度值均高于对照组(191.40±0.28)(P<0.05);100μmol/L组(206.51±0.68)、50μmol/L组(200.49±0.30)、25μmol/L组(196.53±0.59)β-catenin灰度值均高于对照组(191.98±0.30)(P<0.05),100μmol/L组(209.22±0.51)、50μmol/L组(204.53±0.92)、25μmol/L组(195.7±60.90)Lgr5灰度值均高于对照组(188.16±0.86)(P<0.05)。结论Res可抑制胃癌细胞AGS的生长作用,其机制可能通过减�
简介:摘要目的研究双氢青蒿素(dihydroartemisinin,DHA)对人胶质瘤细胞增殖和侵袭的作用及对Notch信号通路关键基因和蛋白表达的影响。方法体外培养人胶质瘤U87细胞,加入不同浓度的DHA,采用MTT比色法检测不同浓度DHA对人胶质瘤U87细胞增殖的影响;采用Transwell小室和基质渗透率测定试验检测DHA对人胶质瘤U87细胞迁移和侵袭的影响;采用Real-timePCR和Westernblot检测不同浓度DHA后人胶质瘤U87细胞Notch信号通路关键基因和蛋白表达的变化。结果不同浓度的DHA处理后,人胶质瘤U87细胞的增殖、迁移和侵袭均明显受到抑制(P<0.01或P<0.05);随着DHA浓度的增加,人胶质瘤U87细胞内Notch信号通路关键基因和蛋白的表达逐渐下降(均P<0.01或P<0.05)。结论DHA可能通过下调Notch信号通路的表达抑制人胶质瘤U87细胞的增殖、迁移和侵袭。
简介:摘要目的研究厄贝沙坦对大鼠缺血再灌注心肌细胞的凋亡及相关基因的影响。方法取45只30周龄健康清洁WKY大鼠随机分为假手术组,缺血再灌注组和厄贝沙坦组。制备心肌缺血再灌注动物模型,TUNEL原位末端检测缺血再灌注区凋亡细胞,免疫组化检测心肌组织STAT1,STAT3的表达。结果与假手术组比缺血再灌注组细胞凋亡率明显升高(p<0.01)SP染色见STAT1蛋白表达显著增强(p<0.01)STAT3蛋白表达显著减少(p<0.01)与缺血再灌注组比,厄贝沙坦组细胞凋亡率明显下降(p<0.01),STAT1蛋白表达减少(p<0.01),STAT3蛋白表达显著增加(p<0.01)。结论厄贝沙坦通过对JAK-STAT信号通路的调节作用能减轻缺血再灌注心肌细胞的损伤,减少细胞凋亡,发挥心脏保护作用。