简介:【摘要】目的:探讨siRNA 沉默HnRNP L基因对RWPE-1细胞、Lncap细胞、PC3细胞生物学行为的影响。方法:通过合成了靶向HnRNP L的特异性siRNA,并通过了Western Blot在蛋白水平上进行检测,并筛选出干扰效率最高的3号序列来干扰RWPE-1细胞、Lncap细胞、PC3 细胞中HnRNP L的表达,观察其对三种不同细胞生长、凋亡、体外侵袭能力及迁移能力的差异。结果:沉默HNRNPL后,CCK-8实验提示三种细胞的增值都明显降低,划痕实验结果提示:沉默HNRNPL后,RWPE-1细胞和PC3细胞的迁移力明显减弱。Transwell检测结果提示:沉默HNRNPL后,RWPE-1细胞、Lncap细胞和PC3细胞的侵袭能力明显减弱。结论:HnRNPL对前列腺癌的多种生物学行为有明显的影响,参与了前列腺癌的发生、发展的恶性进程,促进了前列腺癌的生长、侵袭和转移。
简介:目的:观察环境内分泌干扰物质——壬基苯酚(Nonylphenol,NP)对豚鼠心室肌细胞L-型钙电流和动作电位的影响。方法:应用酶机械法分离豚鼠单个心室肌细胞,用全细胞膜片钳方法记录不同浓度NP作用下单个心室肌细胞L-型钙电流(如。)和动作电位(AP)的变化。结果:1)NP(10^-5、10^-7、10^-6、10^-5mol.L^-1)使ICa-l峰值电流密度分别从-3.72±1.5pA/pF减少到-2.44±0.4pA/pF(P〈0.05),-2.34±0.6pA/pF(P〈0.05),-1.79±0.8pA/pF(P〈0.01),以及-1.66±0.7pA/pF(P〈0.01);2)NP使ICa-l的I—V曲线上移,但其形状和峰值电压无明显变化;3)NP对ICa-l稳态激活曲线无明显影响;4)NP可缩短动作电位复极50%和90%的时程(APD50,APD50),但对静息电位(RP)和动作电位幅值(APA)无明显影响。结论:NP能剂量依赖性地抑制豚鼠心室肌细胞ICa-l,并能够缩短动作电位时程。
简介:目的:研究β-L-D4A在2.2.15细胞内的代谢情况,以便为进一步明确其抗HBV作用机制和动物体内实验及人体内试验研究其抗HBV作用与药代动力学奠定基础.方法:以2μmol·L-1[3H]β-L-D4A或[3H]β-D-D4A处理2.2.15细胞2、4、8、12、24h,再以0.4mol·L-1预冷的高氯酸(含0.08mol·L-1磷酸三乙胺)抽提,离心后,溶解于酸的上清液,直接进行HPLC分离、相连的紫外检测器检测,然后分析各个峰值.结果:两化合物均出现4峰,且出现时间一致,保留时间依次在6、10、19、28min,24h处理后,β-L-D4A细胞内代谢峰明显高于β-D-D4A的代谢峰;β-L-D4A于2.2.15细胞内代谢进行了动态的检测,发现细胞内代谢物的含量于加药后迅速增加,以三磷酸形式增加最快,至8h时,达到最大值,以后开始缓慢降低;β-L-D4A处理2.2.15细胞24h后,换用不含药培养基继续培养,停药后3种磷酸化代谢物含量于前8h迅速减少,继后16h降低缓慢,于24h时,仍有8h时35.6%(0.32/0.9)的三磷酸化合物存在.结论:β-L-D4A较之β-D-D4A更易被磷酸化代谢;一磷酸化过程可能为限速步骤;β-L-D4A三磷酸化物在2.2.15细胞内降解缓慢.
简介:Aditerpenoid,neostellerin,wasisolatedfromtherootsofStellerachamaejasmeLtogetherwith4knowncompoundsidentifiedasβ-sitosterol,scopoletin,umbelliferoneanddaucosterol.Thestructureofneostellerin,whichwaselucidatedbyNMR,especially2DNMRanalysis,wasdifferentfromotherdaphnanetypediterpenesisolatedfromthisplant.
简介:目的:以L-半胱氨酸和吲哚为底物,利用色氨酸酶基因工程菌WW-11酶法合成L-色氨酸。方法:以IPTG诱导基因工程菌色氨酸酶表达,将酶活最高时的工程菌游离细胞作为转化反应的酶源,通过纸层析和氨基酸自动分析仪分析并测定转化液中L-色氨酸的含量,结果:80mL反应液(L-半胱氨酸0.75g,吲哚75g)37℃反应48h,可积累L-色氨酸1.18g,L-半腕氨酸转化率为93.2%,吲哚转化率为90.1%,经分离纯化所得的L-色氨酸晶体,在熔点,旋光性和红外吸收光谱等方面与标准品完全一致,结论:色氨酸酶基因工程菌能有效地催化L-半胱氨酸和吲哚合成L-色氨酸,这种酶合成法是工业化生产L-色氨酸较为有效的方法之一。
简介:目的:研究L-门冬酰胺酶脂质体对体外培养的人早幼粒细胞白血病(HL-60)细胞活性的影响.方法:MTT测定L-门冬酰胺酶脂质体的抗肿瘤活性,电镜观察药物对肿瘤细胞形态学的影响,流式细胞仪检测药物对肿瘤细胞周期的影响.结果:L-门冬酰胺酶脂质体(经前体脂质体水合而得)组与肿瘤细胞作用后,HL-60细胞的G0/G1期细胞量明显增加,而进入S期的细胞明显减少.增殖指数L-门冬酰胺酶脂质体组的PI值显著下降.HL-60细胞凋亡比例显著增多.结论:L-门冬酰胺酶脂质体抑制HL-60细胞的繁殖,可能与抑制细胞的S期有关.
简介:目的:观察次乌头碱对SD乳鼠心肌细胞内Ca2+浓度及细胞膜L-Ca通道mRNA的影响。方法:原代培养SD乳鼠心肌细胞,给予不同浓度的次乌头碱,采用流式细胞技术分别检测给药后15min、30min、60min心肌细胞内钙浓度的变化,并分析次乌头碱对心肌细胞内钙浓度的作用与L-Ca通道mRNA表达的相互关系。结果:30-120μM/L次乌头碱引起心肌细胞内游离Ca2+浓度升高,细胞“钙超载”出现在给药后15min(P〈0.01),且呈一定的剂量依赖性,但无明显的时间依赖性;60μM/L次乌头碱与心肌细胞作用5min即能增加L—Ca通道mRNA表达(P〈0.05),随着次乌头碱浓度的增加,L—Ca通道mRNA的表达也增多,但亦未表现出明显的时间依赖性。结论:次乌头碱为附子中的主要成分之一,其可能通过增加心肌细胞膜L-Ca通道开放数量而导致细胞内钙增加,发生钙超载,并最终导致心律失常的发生。
简介:ChinahasagreatresourceofCannabis.ResearchonthetaxonomyandmorphologyofChineseCannabishasbeencarriedout,butsofarnomoleculargeneticresearchhasbeenpublished.RandomamplifiedpolymorphicDNA(RAPD)isasuitabletechniqueformoleculargeneticresearchonCannabis.Intillsexperiment,usingCannabisherbariumspecimensasasourceofgeneticmaterials,thecorrelativeconditionsofthePolymerasechainreaction(PCR),(i.e.,gradientdensityofMg^2+,dNTPs,TaqDNApolymerase,annealtemperature,annealtimeandreactioncycles)wereexaminedseparately.AneffectiveprocedurefortheRAPDanalysisofCannabiswasobtained.
简介:ObjectiveToinvestigatethealterationsofL-typecalciumcurrent(IcaL)inabdominalaorticligation-inducedhypertrophiedratheartsandtheeffectoflosartanonthesealterations.METHODSCardiachypertrophywasinducedbyabdominalaorticligationinrats.TorecordIcaL,whole-cellpatch-clamptechniquewasused.RESULTSMembranecapacitancewaslargerinhypertrophiedcells(148±29pF)thaninsham-operatedcells(102±14pF,P<0.01)andlosartan-treatedcells(118±27,P<0.01).ThemaximalpeakIcaLWasincreasedfrom-835±124pAinsham-operatedcellsto-1404+_417pAinhypertrophiedcells(P<0.01),thecorrespondingIcaLdensitywasincreasedfrom-7.5±1.8pA.pF^1to-10.5±2.2pA.pF^1(P<0.01),whiletheywerereducedto-956-2:170pF(P<0.01)and-8.2±1.6pA.pF^1(P<0.05)respectivelyinlosartan-treatedcells.Themembranepotentialofhalfmaximalactivationofthehypertrophiedcells(-20.6±1.0mV)shiftedtomorenegativepotentialsthansham-operatedcells(-15.6±1.6mV,P<0.01)andlorsartan-treatedcells(-17.4±1.0mV,P<0.01).Theslopeoftheactivationcurveofhypertrophiedcells(5.7±0.4)wasdecreasedslightlythansham-operatedcells(6.4±0.5,P<0.05).Themembranepotentialofhalfmaximalinactivationofhypertrophiedcells(-27.6±1.9mV)shiftedtomorepositivepotentialsthansham-operatedcells(-31.4±2.2mV,P<0.05).Theslopeofinactivationcurveswerenotdifferentinthethreegroups.
简介:Osteoporosisisametabolicskeletaldisorderleadingtobonefracturewhichadverselyimpactsthequalityoflife.Inthepresent,weaimedtoinvestigatetheeffectofPeperomiapellucida(L.)Kunthherbjuiceandethanolicextractonovariectomy(OVX)-inducedosteoporoticratmodel.OsteoporosiswasinducedbyOVXwithadoubledorsolateralapproachonfemaleWistarrats.FemaleWistarratsundergoingshamsurgeries(sham-controlgroup)servedascontrols.Theovariectomizedratsweredividedintosixgroupsbasedonadministeredtreatments,(i)CMCNa0.3%(OVX-controlgroup),(ii)standarddrug(ethynilestradiol4.5μg/kg),(iii)P.pellucidajuiceatdoseof50mg/kg,and(iv)100mg/kg,(v)P.pellucidaethanolicextractatdoseof50mg/kg,and(vi)100mg/kg.Treatmentswerestarted1weekafterthesurgeriesandlastedfor6weeks.Ratstreatedwith100mg/kgP.pellucidaethanolextracthadsignificantlydecreasedserumALPlevelandreducedexcretionofurinecalciumcomparedwiththeOVX-controlgroup(P<0.05).Theselevelswerenotsignificantlyalteredwhencomparedwiththesham-controlgroup(P<0.05).Furthermore,100mg/kgethanolicextract-treatedgroupshowedimprovementonthree-dimensionalimageofthetrabecularbonecomparedwiththeOVX-controlgroup.Trabecularcavityformationin100mg/kgethanolicextract-treatedgroupwasminimal.EthanolicextractofPeperomiapellucida(L.)Kunthherbsatadoseof100mg/kghadpreventiveeffectonOVX-inducedosteoporoticrats.